DOSAGEM DOSAGEM C-Hb e M-HbC-Hb e M-Hb

CO-OXIMETROCO-OXIMETRO Princípio do método: Amostras de sangue total são quimicamente hemolisadas

por íntimo contato com agente surfactante não iônico. O sangue hemolisado é então analisado espectrofotometricamente , através de um fluxo em cubeta termostática.

O sangue total é aspirado pelo instrumento, misturado com diluente, hemolisado, e O sangue total é aspirado pelo instrumento, misturado com diluente, hemolisado, e mantido em temperatura constante na cubeta. mantido em temperatura constante na cubeta.

A absorbância é gerada através de medida de luz monocromática em seis A absorbância é gerada através de medida de luz monocromática em seis comprimentos de onda específicos (isolados no range de 530 a 670nm) que comprimentos de onda específicos (isolados no range de 530 a 670nm) que passa através da cubeta captada por um foto-detector.passa através da cubeta captada por um foto-detector.

O microcomputador mede Hemoglobina Total (tHb), percentual de Oxihemoglobina (%O2Hb), percentual de Carboxihemoglobina (%COHb), percentual de Metahemoglobina (%MetHb) e percentual de Deoxyhemoglobina (%HHb).

Absorbâncias: Medida do branco – obtida com seis leituras de absorbância da

solução zero (zeroing solution); Medida da amostra – amostra diluída e hemolisada (sangue,

controle ou calibrador) obtida com seis leituras de absorbância;

Cálculo da absorbância – As seis absorbâncias do branco são subtraídas das seis absorbâncias obtidas para a amostra:

A(NET) = A(SAMPLE) – A(BLANK) Onde A = abs obtida em cada comprimento de onda Cálculo da concentração: È calculado através da concentração fracional de várias

hemoglobinas presentes na amostra: A = K1C1+2C2+3C3+......C C = concentração de diferentes espécies de Hb K = escala constante utilizada para calibração do processo

tHb = coeficiente da matrix A = Valor de absorbância no sangue nos diferentes

comprimentos de onda

Concentrações são utilizadas para determinar tHb e percentual relativo de espécies de Hb.

O valor de concentração da hemoglobina total (g/dL) é a soma das quatro concentrações:

CtHb = C(HHb)+C(O2Hb)+C(COHb)+C(MetHb)

Parâmetros de medida ( como todos os parâmetros são calculados):

Concentração de Hemoglobina Total: A concentração de hemoglobina total é a soma da

concentração das espécies de hemoglobina HHb, O2Hb, COHb e MetHb.

Valor de referência para adultos: 12.0 a 18.0g/dL

THb = (HHb+O2Hb+COHb+MetHb) x KTHb = (HHb+O2Hb+COHb+MetHb) x K

Porcentagem de Oxihemoglobina (%O2Hb) Valor de referência para sangue arterial: 94.0 a 97.0%

%O2Hb = O2Hb X 100 HHb+O2Hb+COHb+MetHb

Porcentagem de Carboxihemoglobina (%COHb)

%COHb = COHb X 100 HHb+O2Hb+COHb+MetHb

Porcentagem de Deoxyhemoglobina %HHb):

%HHb = HHb X 100 HHb+O2Hb+COHb+MetHb

Detecção/correção de interferentesDetecção/correção de interferentes::

Detecção de sulfahemoglobina:Detecção de sulfahemoglobina: Devido a características espectrais do comprimento de onda Devido a características espectrais do comprimento de onda

utilizado no IL 682, a SHb pode interferir em medidas de utilizado no IL 682, a SHb pode interferir em medidas de outras hemoglobinas. A presença de sulfahemoglobina outras hemoglobinas. A presença de sulfahemoglobina causa um aparente acréscimo de MetHb e um resultado causa um aparente acréscimo de MetHb e um resultado negativo de carboxihemoglobina. negativo de carboxihemoglobina. EQUIPAMENTO EQUIPAMENTO SINALIZASINALIZA ALERTA:ALERTA:

SulfHb Warning – Sulfahemoglobina detectada superior SulfHb Warning – Sulfahemoglobina detectada superior a a 1,5%1,5% ERROERRO não liberar resultado.não liberar resultado.

High SulfHb Warning – equipamento não libera resultado.High SulfHb Warning – equipamento não libera resultado.

Correção de turbidimetria:Correção de turbidimetria: Presença de lípides pode interferir na medida de absorbância Presença de lípides pode interferir na medida de absorbância

e afetar os resultados do Co-oxímetro. Existe um sistema de e afetar os resultados do Co-oxímetro. Existe um sistema de correção automático. correção automático.

Para valores de triglicérides de aproximadamente Para valores de triglicérides de aproximadamente 1500mg/dL (acima de 3%) é liberado para o operador uma 1500mg/dL (acima de 3%) é liberado para o operador uma mensagem de alta turbidimatria .mensagem de alta turbidimatria . EQUIPAMENTO EQUIPAMENTO SINALIZASINALIZA ALERTA: High turbidity – não liberar ALERTA: High turbidity – não liberar resultadoresultado..

Limitações:Limitações:

RangeRange ResoluçãoResolução Inexatidão *Inexatidão * Imprecisão**Imprecisão** tHbtHb 5-20g/dL5-20g/dL 0,1g/dL0,1g/dL ++ 0,3g/dL 0,3g/dL 0,2g/dL0,2g/dL

O2HbO2Hb 0-100%0-100% 0,1%0,1% ++1%1% 0,5%0,5% COHbCOHb 0-100%0-100% 0,1%0,1% ++1%1% 0,5%0,5% HHbHHb 0-100%0-100% 0,1%0,1% ++3%3% 1,5%1,5% MetHbMetHb 0-10%0-10% 0,1%0,1% ++1%1% 0,5%0,5% MetHbMetHb 10-100%10-100% 0,1%0,1% ++10%relative10%relative 1,5%1,5%

Exatidão definida como 95% dos limites de confiança para Exatidão definida como 95% dos limites de confiança para amostras com MetHb de 0 – 10% e hemolisadas no PH 7.0 a amostras com MetHb de 0 – 10% e hemolisadas no PH 7.0 a 7.4;7.4;

Precisão de um desvio padrão.Precisão de um desvio padrão. Interferências:Interferências: Sulfahemoglobina: Presença de SHb pode causar um Sulfahemoglobina: Presença de SHb pode causar um

aparente aumento de metahemoglobina e um decréscimo de aparente aumento de metahemoglobina e um decréscimo de carboxihemoglobina e Oxyhemoglobinacarboxihemoglobina e Oxyhemoglobina

Bilirrubina: pode causar um decréscimo de 1,5% de Bilirrubina: pode causar um decréscimo de 1,5% de Oxyhemoglobina e pode ter um acréscimo de 1 a 2% de Oxyhemoglobina e pode ter um acréscimo de 1 a 2% de carboxihemoglobina em um nível de bilirrubina de 30mg/dL.carboxihemoglobina em um nível de bilirrubina de 30mg/dL.

Turbidimetria: acima de 3% interfere nos resultadosTurbidimetria: acima de 3% interfere nos resultados Indocyanine green (marcador de fluorescência): alterações Indocyanine green (marcador de fluorescência): alterações

de resultados do equipamentode resultados do equipamento

Azul de metileno: acréscimo de metahemoglobina e Azul de metileno: acréscimo de metahemoglobina e diminuição de oxyhemoglobinadiminuição de oxyhemoglobina

Algumas drogas e substâncias que podem alterar Algumas drogas e substâncias que podem alterar hemoglobina a metahemoglobina causando hemoglobina a metahemoglobina causando metahemoglobinemia. Sulfahemoglobina podem ser metahemoglobinemia. Sulfahemoglobina podem ser formadas com o uso de certas drogas, causando formadas com o uso de certas drogas, causando interferência.interferência.

Especificações do equipamentoEspecificações do equipamento: : AmostraAmostra sangue totalsangue total AnticoagulanteAnticoagulante EDTA ou heparinaEDTA ou heparina Quantidade de amostraQuantidade de amostra 6565LL Fluxo de reagentesFluxo de reagentes Ciclo: Zero Diluent CleaningCiclo: Zero Diluent Cleaning Sample 0.6mL 0.12mL NASample 0.6mL 0.12mL NA Prime 2.0mL 0.92mL 0.28mLPrime 2.0mL 0.92mL 0.28mL Clean 1.3mL 0.27mL 0.34mLClean 1.3mL 0.27mL 0.34mL Zero ref. 0.6mL 0.10mL NAZero ref. 0.6mL 0.10mL NA Tempo do ciclo de amostraTempo do ciclo de amostra 58 segundos58 segundos monitoradosmonitorados 535.0nm, 585.2mn, 594.5mn, 626.6mn, 638.3mn, 535.0nm, 585.2mn, 594.5mn, 626.6mn, 638.3mn,

667.8nm667.8nm Temperatura ambienteTemperatura ambiente 15-3215-32ºº C C Humidade ambienteHumidade ambiente 90% 90%