0

UNIVERSIDADE DE TAUBATÉ Arnaud Alves Bezerra Junior

AVALIAÇÃO DE PARÂMETROS SALIVARES EM PACIENTES PORTADORES DE DOENÇA PERIODONTAL

Taubaté - SP 2006

Livros Grátis

http://www.livrosgratis.com.br

Milhares de livros grátis para download.

1

UNIVERSIDADE DE TAUBATÉ Arnaud Alves Bezerra Junior

AVALIAÇÃO DE PARÂMETROS SALIVARES EM PACIENTES PORTADORES DE DOENÇA PERIODONTAL

Dissertação apresentada para obtenção do Título de Mestre pelo Programa de Pós-Graduação em Odontologia do Departamento de Odontologia da Universidade de Taubaté. Área de Concentração: Periodontia Orientador: Prof. Dr. Celso Silva Queiroz Co-orientador: Prof. Dr. José Roberto Cortelli

Taubaté - SP 2006

2

ARNAUD ALVES BEZERRA JÚNIOR AVALIAÇÃO DE PARÂMETROS SALIVARES EM PACIENTES PORTADORES

DE DOENÇA PERIODONTAL

Dissertação apresentada para obtenção do Título de Mestre pelo Programa de Pós-Graduação em Odontologia do Departamento de Odontologia da Universidade de Taubaté. Área de Concentração: Periodontia

Data: _______________________

Resultado: ____________________________________

COMISSÃO JULGADORA

Prof. Dr._____________________________Universidade de Taubaté

Assinatura: __________________________

Prof. Dr. _____________________________ Universidade_______________

Assinatura: __________________________

Prof. Dr. _____________________________ Universidade_______________

Assinatura: __________________________

3

Dedico este trabalho aos meus pais, Arnaud (in memorian) e Ana Elizabeth,

pelos preceitos morais, éticos e sobretudo pelos exemplos de perseverança, dedicação e de

solidariedade transmitidos .

À minha amada esposa Heloíza pela cumplicidade, dedicação, incentivo, apoio e amor tão

carinhosamente doados.

À minha filha Isabelle, pelo grande amor e pelo impulso para mais esta jornada.

Aos meus irmãos, Luciana, Renata e Leonardo, grandes incentivadores deste projeto.

À minha avó, Darci Fortini, pelos ensinamentos de sabedoria ante as dificuldades.

Aos grandes amigos e irmãos Rodrigo Richard, Maurício Aquino, Emerson Carvalho,

Marcelo Costa, Paulo César Tavares, Alexandre Lustosa e Carlos Augusto pela sinceridade,

generosidade e companheirismo.

Ao restante da minha família, com especial menção ao primo Luís Antônio Bezerra, pelo seu

senso de justiça e retidão de caráter ímpar.

4

AGRADECIMENTOS

A Deus pelo dom da vida e pela constante proteção de Pai, sempre renovando minha

esperança e fé, além da possibilidade de crescimento pessoal e realização de um sonho.

À Universidade de Taubaté - UNITAU.

Ao Magnífico Reitor Prof. Dr. Nivaldo Zöllner.

À Pró-reitora de Pesquisa e Pós-Graduação da Universidade de Taubaté, Profa Dra. Maria

Júlia Ferreira Xavier Ribeiro, pela organização do Curso de Mestrado.

Ao Coordenador Geral do Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Prof. Dr. Antonio

Olavo Cardoso Jorge.

Ao grande mestre e amigo, Prof. Marcos Vinícius Moreira de Castro, pelos ensinamentos

desde os meus primeiros passos na Periodontia, mas, sobretudo, pelo exemplo profissional

exponencial.

Ao valoroso Prof. Dr. José Roberto Cortelli e aos demais professores do Curso de Pós-

Graduação.

Às secretárias do Curso de Pós-Graduação em Odontologia Adriana Peloggia e Alessandra.

Borges Serra, sempre informando com atenção e carinho os procedimentos necessários.

Ao Laboratório de Ciências Básicas da Faculdade de Odontologia de São José dos Campos-

UNESP e ao técnico Domingos pelo seu empenho.

À Profa. Marina Buselli pela correção das normas.

5

AGRADECIMENTO ESPECIAL

Ao Professor Doutor Celso Silva Queiroz,

pela orientação valorosa, preciosa e rica em conhecimento, se constituindo, sem dúvida, em

uma pedra fundamental para a realização do trabalho. Faz-se necessário ressaltar seu grande

comprometimento e um perfil docente de excelência como qualidades a serem registradas e

seguidas.

Meu sincero Agradecimento.

6

Sábio é o homem que conhece alguma coisa

sobre tudo, e tudo sobre alguma coisa. Mais

sábio é aquele que estuda como se fosse viver

eternamente, e vive como se fosse morrer

amanhã.

7

RESUMO A saliva tem sido avaliada em sua composição, bem como em suas características físico-químicas, na busca de possíveis marcadores de atividade e progressão da doença periodontal. Assim, o objetivo desse estudo foi avaliar a influência da doença periodontal nos parâmetros bioquímicos da saliva como fluxo, pH, proteína total, atividade, fosfatase alcalina e concentração de uréia em indivíduos com periodontite crônica. Para tanto, quarenta indivíduos foram divididos em dois grupos: Grupo 1: vinte indivíduos sem doença periodontal (grupo controle) e Grupo 2: vinte indivíduos com periodontite crônica. Foi realizada coleta de saliva estimulada em tubos milimetrados acondicionados em ambiente refrigerado em ambos os grupos para análise dos parâmetros bioquímicos . O fluxo salivar foi obtido logo após a coleta, o valor do pH salivar foi mensurado em pHmetro com eletrodo previamente calibrado. A atividade de fosfatase alcalina e a concentração foram analisadas por método espectrofotométrico. Após a obtenção dos dados, o teste t student foi aplicado para comparar os grupos. Os valores médios e desvios-padrão do fluxo salivar, pH, proteína, fosfatase alcalina e uréia do grupo 1 e do grupo 2 foram respectivamente: Grupo 1 (2,88±1,07a); (6,91±0,18a); (618,09±17,52a); (10,63±1,48a); (52,67±7,27a) e Grupo 2 (2,33±1,11a); (7,71±0,43b); (599,15±51,86b); (16,79±1,72b); (117,99±12,52b., Letras distintas comparadas em ambos os grupos de acordo com cada análise diferem entre si ao nível de significância de 5%. Os resultados sugerem que a periodontite crônica pode afetar a composição da saliva e que o exame dos parâmetros salivares pode complementar o tratamento da doença.

Palavras-chave: Doença periodontal. Saliva. Fosfatase alcalina. Uréia.

8

ABSTRACT

Saliva has been evaluated in composition and biochemical characteristics attempting to possible activity and progression markers of periodontal disease. This way, the aim of this study was to evaluate the influence of periodontal disease in the biochemical patterns of saliva as flow, pH, total protein, alkaline phosphatase activity and urea concentration. For this, forty subjects were divided in two groups: Group 1: twenty subjects without periodontal disease (Control Group) and group 2: twenty subjects with chronic periodontitis (Experimental Group). The stimulated saliva collect was made and storaged in refrigerated air for analyzing of biochemical salivary parameters in both groups. The salivary flow rate was obtained and the pH value was measured by pH electrodes. The alkaline phosphatase activity and urea concentrations were analyzed by spectrophotometer method. The test t student was applied to compare the groups. The average values and standard deviations of salivary flow rate, pH, total protein, alkaline phosphatase and urea of group 1 was respectively (2,88±1,07a); (6,91±0,18a); (618,09±17,52a); (10,63±1,48a); (52,67±7,27a) and group 2 was (2,33±1,11a); (7,71±0,43b); (599,15±51,86b); (16,79±1,72b); (117,99±12,52b), distinct letters compared in both groups according to each analyze differs each other with 5% significance. The results suggest that chronic periodontitis may affect saliva composition and salivary parameters exam can complete the therapy disease.

Key words: Periodontal disease. Saliva. Alkaline phosphatase. Urea

9

LISTA DE TABELAS

Tabela 1 – - Médias e desvios-padrão dos parâmetros salivares nos grupos controle e experimental

36

Tabela 2 - Correlação dos Parâmetros Clínicos entre si 39

Tabela 3 - Correlação dos Parâmetros Salivares entre si 40

Tabela 4 - Correlação entre os parâmetros clínicos e parâmetros salivares 41

10

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 - Valores médios do fluxo salivar estimulado 37

Figura 2 - Valores médios do pH da saliva 37

Figua 3 - Valores médios da concentração de proteína total 38

Figura 4 - Valores médios da atividade enzimática da fosfatase alcalina 38

Figura 5 - Valores médios da concentração de uréia 39

Figura 6 - Correlação positiva e estatisticamente significante entre pH e Uréia

40

11

LISTA DE ABREVIATURAS, SIGLAS E SÍMBOLOS

AAP – Academia Americana de Periodontologia

FS – Fluxo salivar

FA – Fosfatase alcalina

IG – Índice gengival

IP – Índice de placa

PS – Profundidade de sondagem

% - Porcentagem

< – Menor

> – Maior

± – Mais ou menos

°C – Graus Celsius (graus centígrados)

cm – Centímetro

mm – Milímetro

µm – Micrometro

nm - Nanômetro

mm2 – Milímetro quadrado

Kg – Quilograma

g – Grama

mg - Miligrama

H2Odd – Água destilada e deionizada

n °– Número

s – Segundos

min - Minutos

h –Horas

12

SUMÁRIO

1 INTRODUÇÃO......................................................................................................... 13 2 REVISÃO DA LITERATURA................................................................................ 15 2.1 DOENÇA PERIODONTAL.................................................................................... 15 2.1.1 Peridontite Crônica............................................................................................. 16 2.2 SALIVA................................................................................................................... 17 2.2.1 Secreção Salivar.................................................................................................. 17 2.2.2 Fluxo Salivar....................................................................................................... 19 2.2.3 Funções da Saliva................................................................................................ 21 2.2.4 Composição da Saliva......................................................................................... 21 2.2.4.1 Composição Inorgânica..................................................................................... 21 2.2.4.2 Composição Orgânica........................................................................................ 22 3 PROPOSIÇÃO.......................................................................................................... 27 4 MATERIAL E MÉTODO........................................................................................ 28 4.1 CRITÉRIOS DE INCLUSÃO................................................................................. 28 4.2 CRITÉRIOS DE EXCLUSÃO................................................................................ 28 4.3 ANAMNESE........................................................................................................... 29 4.4 EXAME CLÍNICO PERIODONTAL..................................................................... 29 4.5 COLETA E ARMAZENAMENTO DAS AMOSTRAS DE SALIVA................... 30 4.6 MENSURAÇÃO DO FLUXO SALIVAR.............................................................. 31 4.7 MENSURAÇÃO DO PH SALIVAR...................................................................... 31 4.8 ANÁLISE DA CONCENTRAÇÃO DE PROTEÍNA TOTAL NA SALIVA ....... 31 4.9 ANÁLISE DA ATIVIDADE ENZIMÁTICA DA FOSFATASE ALCALINA..... 32 4.10 ANÁLISE DA CONCENTRAÇÃO DE URÉIA.................................................. 32 4.11 ANÁLISE ESTATÍSTICA.................................................................................... 32 5 RESULTADOS......................................................................................................... 34 6 DISCUSSÃO.............................................................................................................. 40 7 CONCLUSÕES......................................................................................................... 48 REFERÊNCIAS........................................................................................................... 49 APÊNDICE A – Termo de Esclarecimento Livre e Esclarecido................................... 55 APÊNDICE B – Análises estatísticas empregadas após a obtenção dos dados............ 57 ANEXO A – Cópia do protocolo da aprovação do projeto pelo Comitê de Ética e Pesquisa da Universidade de Taubaté – CEP/UNITAU.................................................

62

ANEXO B – Modelo das Fichas Clínica utilizada para obter os parâmetros clínicos... 63

13

1 INTRODUÇÃO

A doença periodontal é uma alteração patológica causada por grupos específicos

microbianos que envolve os tecidos periodontais de suporte e proteção; tendo, como

conseqüência, a degradação do colágeno tecidual, resultando destruição progressiva do

ligamento periodontal e osso alveolar. A resposta do hospedeiro diante da infecção leva às

alterações teciduais, resultando na formação de bolsas periodontais, representadas pela

migração do epitélio no sentido apical dos dentes, formando um espaço entre a superfície

radicular e o tecido gengival (CARRANZA et al., 2004).

Dentre as formas das doenças periodontais, a periodontite crônica é a mais

comum, sendo altamente prevalente em adultos, porém podendo ocorrer em qualquer idade. A

doença associa-se normalmente à presença de biofilme e cálculo dental, apresentando uma

progressão de perda de inserção de modo lento na maior parte dos casos. Ela pode ser

classificada de acordo com a extensão (generalizada ou localizada) ou ainda de acordo com a

gravidade (leve, moderada ou avançada) (CORTELLI et al., 2005).

Os tecidos periodontais estão constantemente sujeitos às agressões bacterianas e

mecânicas, e uma das formas de proteção se deve à ação das secreções salivares, as quais são

protetoras por natureza, pois mantêm os tecidos bucais em estado de homeostasia. A saliva

exerce uma influência sobre o biofilme dental de diversas maneiras, através da limpeza

mecânica, do tamponamento de ácidos produzidos por bactérias e pelo controle da atividade

microbiana. Além disso, a saliva contém numerosos fatores orgânicos e inorgânicos que

influenciam as bactérias e seus produtos no meio bucal. Dessa maneira, o fluxo e composição

da secreção salivar podem exercer grande influência no metabolismo do biofilme dental e no

curso da doença periodontal (CARRANZA et al., 2004).

14

Alguns fatores provenientes da existência do biofilme dental frente ao

desenvolvimento da doença periodontal podem ser evidenciados através da mensuração de

parâmetros salivares como o volume e a composição do fluxo salivar, acidificação ou

alcalinização do meio intrabucal, concentração e atividade de proteases. Portanto, a análise

bioquímica desses parâmetros salivares pode oferecer um meio não invasivo de avaliar a

resposta do hospedeiro frente à doença periodontal, sugerindo o seu uso como biomarcador no

diagnóstico e monitoramento da terapia dessa doença (BUTTERWORTH et al., 2002;

CHAPPLE et al., 1999; ELEY; COX, 1998).

15

2 REVISÃO DA LITERATURA

Levando-se em consideração as variáveis estudadas, apresentaremos

inicialmente uma breve revisão sobre doença periodontal e sobre saliva. Também serão

descritos os trabalhos encontrados na literatura que relacionam alguns componentes presentes

na saliva de pacientes com doença periodontal crônica.

2.1 DOENÇA PERIODONTAL

O conceito comum em relação à periodontite que prevaleceu até meados da

década de sessenta sugeria que:

a) era uma condição continuamente progressiva e que a gengivite

inevitavelmente progrediria para periodontite e consequentemente para a perda dental;

b) aceitava-se ainda que a maioria da população era afetada pela doença;

c) a idade era um importante fator de risco para o desenvolvimento das doenças

periodontais.

Com o avanço dos métodos de diagnóstico e maior compreensão da patogênese

das doenças, estas hipóteses foram reformuladas e adequadas aos novos conceitos de doenças

periodontais (PAPAPANOU, 1996).

Comumente, usa-se o termo doença periodontal na caracterização das doenças

gengivais (gengivite), quanto nas inflamações dos tecidos de sustentação do periodonto

(periodontite) (CORTELLI et al., 2005). Entretanto, desde a última publicação da

classificação das doenças periodontais (ARMITAGE, 1999), esse termo deve ser avaliado

com maior cautela, já que a classificação, além de doenças inflamatórias causadas pelo

biofilme dental, também se refere às doenças com etiologia virótica ou fúngica, além da

16

inclusão das alterações morfológicas. Sendo assim, a gengivite é considerada a condição

inflamatória nos tecidos moles que circundam os dentes, como uma resposta imune direta ao

biofilme dental acumulado subjacente à gengiva, podendo essa inflamação ser modificada por

diferentes fatores, tais como: tabagismo, medicamentos e alterações hormonais

(ALBANDAR; RAMS, 2002). Já a periodontite, caracteriza-se pelo aumento da profundidade

à sondagem e perda de inserção clínica, ou seja, há perda óssea. Assim como na gengivite,

outros fatores podem modificar a progressão da doença.

2.1.1 Periodontite Crônica

A periodontite crônica é uma doença infecciosa resultando na inflamação dos

tecidos de proteção do dente, na perda progressiva de inserção conjuntiva e de osso alveolar

de suporte. É a patologia periodontal mais frequentemente encontrada, podendo ocorrer em

qualquer idade e afetar ambas as dentições, embora sua ocorrência envolva comumente

indivíduos adultos. Apresenta um padrão de progressão lenta ou moderada, podendo,

entretanto, apresentar períodos de progressão rápida (ARMITAGE, 1999).

A quantidade de destruição tecidual observada clinicamente na periodontite

crônica é consistente com a presença de fatores locais, como a placa e o cálculo subgengival.

Pode ser associada ou modificada por doenças sistêmicas, como por exemplo, a diabetes

melito e infecção por HIV, ou ainda modificada por fatores de risco como fumo e estresse

emocional (ARMITAGE, 1999).

A periodontite crônica pode ser caracterizada baseando-se na extensão e

gravidade. A extensão representa o número de sítios envolvidos na doença, podendo ser

localizada ou generalizada. De forma geral, é considerada localizada quando até 30% dos

sítios são afetados, ou generalizada, quando mais de 30% dos sítios são atingidos

17

(ARMITAGE, 1999). A gravidade pode ser descrita para toda a dentição ou para dentes ou

sítios individuais, levando em consideração o nível clínico de inserção conjuntiva. Pode ser

considerada leve quando a perda de inserção clínica é de 1 a 2 mm, moderada entre 3 a 4 mm

e severa quando esta é igual ou superior a 5 mm.

2.2 SALIVA

2.2.1 Secreção Salivar

A saliva total é uma mistura complexa de fluidos oriundos das glândulas

salivares maiores, parótida, submandibular e sublingual. Há também uma modesta

contribuição das glândulas menores e do fluido gengival, detritos celulares e microrganismos

da cavidade bucal (FERGUSON, 1999; KAUFMAN; LAMSTER, 2002).

As glândulas salivares são divididas em três pares de glândulas maiores

(parótida, submandibular e sublingual) e numerosas glândulas menores que se distribuem por

quase toda a mucosa bucal (BERNE et al., 2004). Em humanos são classificadas de acordo

com o tipo de células secretoras. Assim, as glândulas parótidas, por exemplo, são ditas

serosas, pois suas células produzem uma secreção fina, aquosa e rica em enzimas. Já as

glândulas submandibulares e sublinguais são classificadas como mistas, pois contém células

serosas e mucosas e secretam um fluido viscoso contendo mucinas, sais e enzimas.

Entretanto, as glândulas submandibulares são principalmente serosas e as sublinguais

principalmente mucosas (THYLSTRUP; FEJERSKOV, 1995).

Além desses três pares de glândulas maiores, que são responsáveis pela maior

parte do volume de saliva, existem numerosas glândulas menores, presentes em todas as

partes da mucosa oral, com exceção da gengiva e da porção anterior do palato duro. Essas são

18

classificadas de acordo com sua localização: bucal, lingual, palatina e glândulas sublinguais

menores. Como exemplo de glândulas menores essencialmente mucosas tem-se as

concentradas no palato mole (THYLSTRUP; FEJERSKOV, 1995).

As glândulas salivares são inervadas por fibras do sistema nervoso

parassimpático e simpático. As fibras inervam as células acinares, dos ductos, as mioepiteliais

e os vasos sanguíneos. A natureza da secreção depende do tipo de estímulo. Quando há

predominância do estímulo parassimpático, a secreção será aquosa, contendo eletrólitos e

algumas enzimas, enquanto que se predominar o estímulo simpático, grande quantidade de

macromoléculas, principalmente mucinas, farão parte da secreção (EDGAR, 1992;

THYLSTRUP; FEJERSKOV, 1995).

2.2.2 Fluxo Salivar

O fluxo da saliva total é um índice da umidade oral e indicativo da atividade

metabólica das glândulas salivares. A medida do fluxo salivar é básica para o entendimento

do processo de secreção e para avaliação das condições e doenças orais e sistêmicas que

levam à hipofunção salivar (SREEBNY, 2000).

A saliva é rotineiramente classificada como não estimulada (repouso) e

estimulada, e significante correlação existe entre os fluxos salivares estimulado pela

mastigação e saliva não estimulada (HEINTZE; BIRKHED; BJORN, 1983). Cerca de 60% da

saliva total é produzida em condições de repouso e reflete a velocidade do fluxo basal, ou

seja, é a mistura de secreções que entram na boca na ausência de estímulos exógenos. Está

presente na cavidade oral cerca de 14 horas por dia e é a secreção que recobre os tecidos orais,

19

fornecendo muito da sua proteção. A saliva estimulada, que também exerce ação de proteção,

está presente em nossas bocas cerca de duas horas do dia e associa-se com a função da saliva

sobre os alimentos. Cerca de 70% da saliva total em repouso é derivada das glândulas

submandibular e sublingual, 15%–20% da parótida e 5%–8% das glândulas salivares

menores. Na condição de estímulo, cerca de 45%–50% da saliva total resulta das glândulas

parótida, submandibular, sublingual e menor quantidade das glândulas salivares menores

(SREEBNY, 2000).

Vários estudos da saliva total não estimulada em indivíduos saudáveis

encontraram valor médio ao redor de 0,3 mL/min, sendo que valores entre 0,1–0,2 mL/min

são considerados baixo fluxo salivar (hipossalivação) e abaixo de 0,1 mL/min xerostomia

(DAWES, 2004).

Dados coletados com a saliva total de adultos mostraram que o valor normal da

secreção estimulada com goma de mascar está entre 1,0–2,0 mL/ min, valores entre 0,7–1,0

mL/min são baixos (hipossalivação) e inferiores a 0,5 mL/min considerados xerostomia

(GHEZZI; LANGE, 2000; HEINTZE; BIRKHED; BJORN, 1983). A concentração da

maioria dos componentes da saliva depende da velocidade de secreção das glândulas

salivares. Um aumento na velocidade de secreção aumenta as concentrações de sódio, cálcio,

cloreto, bicarbonato e proteínas totais, enquanto as concentrações de potássio e fluoreto

permanecem inalteradas e as de fosfato e iodeto diminuem (DAWES, 1974; FERGUSSON,

1999).

Os fatores que afetam o fluxo da saliva não estimulada são o grau de hidratação,

exposição à luz, ritmo circadiano e medicamentos. Fatores menos importantes são idade, peso

corporal e efeitos psíquicos (DAWES et al., 1987).

20

Os fatores que afetam o fluxo da saliva estimulada são a natureza do estímulo,

vômito, fumo, tamanho da glândula e ingestão de alimentos ácidos (DAWES et al., 1978;

GHEZZI; LANGE, 2000).

Sem adequada função das glândulas salivares, um indivíduo pode experimentar

severa debilidade na saúde oral que resulta em aumento dramático do número de cáries novas

ou recorrentes, infecção microbiana, acúmulo de biofilme dental, perda da estrutura dos

dentes por erosão química, alterações na membrana da mucosa, perda da acuidade gustativa,

dificuldade para falar, mastigar, deglutir e problemas de digestão e absorção de alimentos

(DAWES, 2004). A redução crônica da secreção salivar pode levar à depressão, perda de

dentes e afetar a qualidade de vida do indivíduo (SHIP et al., 2002).

A hipofunção das glândulas salivares é causada por múltiplos fatores, incluindo

distúrbios e doenças orais e sistêmicas, desordens imunológicas, desidratação, medicações

prescritas ou não, quimioterapia e radioterapia da cabeça e pescoço, fatores psicogênicos e

diminuição da mastigação que podem causar danos permanentes ou temporários nas glândulas

salivares (GHEZZI; LANGE, 2000). A causa mais freqüente de hipofunção da glândula

salivar é a ingestão de medicamentos. Clinicamente, as classes de substâncias mais

importantes são os antidepressivos, anticolinérgicos, diuréticos, antihistamínicos,

antihipertensivos, sedativos e psicofármacos (SREEBNY; SCHWARTZ, 1997).

2.2.3 Funções da Saliva

A secreção salivar é essencial para a manutenção da saúde oral e sistêmica

através de múltiplas funções de defesa do hospedeiro (DEFABIANIS; RE, 2003). Embora a

saliva seja descrita como sendo 99% água, a complexidade dos seus constituintes fornece um

efetivo conjunto de sistemas importantes na lubrificação e proteção dos tecidos moles, na

21

formação e deglutição do bolo alimentar, sensibilidade gustativa, contribui para a fala e

aumento da sensação de bem estar geral dos indivíduos (PEDERSEN et al., 2002). A maior

função protetora resulta do papel da saliva como primeira linha de defesa na manutenção do

balanço ecológico na cavidade oral através da sua atividade antimicrobiana, antifúngica e

antiviral (BAEV et al., 2002; BATTINO et al., 2002). É efetiva na manutenção do pH do

biofilme dental e ajuda a neutralizar o refluxo ácido do esôfago. A manutenção salivar da

integridade dos dentes é dependente das suas elevadas capacidades de remineralização e

tamponante. A saliva também desempenha um papel no balanço de água, podendo servir de

maneira limitada na excreção de substâncias e tem possível função hormonal no trato

gastrointestinal (PEDERSEN et al., 2002).

2.2.4. Composição da Saliva

2.2.4.1 Composição Inorgânica

Dentre os componentes inorgânicos da saliva que representam cerca de 0,2 –

0,3% dos constituintes totais, destacamos os íons sódio, potássio, cloreto, bicarbonato, que

são os principais contribuintes para a sua osmolaridade, sendo sempre hipotônica em relação

ao plasma. Embora os íons salivares sejam os mesmos íons plasmáticos, a concentração

relativa de íons Na+, K+, Ca 2+ e CL- e também SO4-2, HPO4

-2 e H2PO- indica que a saliva não

é exatamente um simples ultrafiltrado plasmático. Uma parte desses íons, incluindo Ca2+ e

CL-, são encontrados geralmente em menor concentração que no plasma, enquanto o PO43- e

especialmente o K+ estão presentes em quantidades mais elevadas. Outros íons, além dos

citados, estão presentes em quantidades já detectadas: magnésio, cobre, fluoreto, brometo,

nitrito e tiocianato (THYLSTRUP; FEJERSKOV, 1995).

22

Dos componentes inorgânicos a concentração de íons H+ (hidrogeniônica) dos

fluidos orais pode ser considerada a variável principal, visto que ela influencia a maioria das

reações químicas que ocorrem na cavidade oral, mais notadamente o equilíbrio entre os

minerais de cálcio e fosfato da estrutura dentária com a saliva adjacente. Na maioria das

vezes, ela é expressa em unidades de pH, que são definidas como logaritmo negativo da

concentração de íons H+ (MANDEL, 1987).

2.2.4.2 Composição Orgânica

A saliva total contém uma mistura complexa de proteínas que exercem uma série

de atividades biológicas de defesa do hospedeiro, entre elas manutenção da integridade da

membrana da mucosa e dos dentes, manutenção do balanço ecológico bucal apropriado e

lubrificação facilitando a mastigação, deglutição e digestão dos alimentos (AMERONGEN;

VEERMAN, 2002).

As mucinas constituem importante classe de glicoproteínas, sintetizadas pelas

células acinares mucosas das glândulas salivares, que na saliva total não estimulada

representam cerca de 25 – 30% da concentração protéica total (AMERONGEN; BOLCHER;

VEERMAN, 1995; BOLSCHER et al., 2002). As mucinas têm sido extensivamente estudadas

e suas propriedades bioquímicas, interações com microrganismos orais e outras proteínas

salivares são bem conhecidas (OFFNER; TROXLER, 2000). A grande dimensão e forma

alongada dessas proteínas, em associação com açucares hidrofílicos, são responsáveis pelas

propriedades reológicas que incluem baixa solubilidade, alta viscosidade, elasticidade e

adesividade, que as torna capazes de se concentrarem sobre a superfície da mucosa oral e

dentes (TABAK, 1995). As mucinas da saliva humana têm papel multifuncional na cavidade

oral onde atuam como lubrificantes extremamente efetivos, as quais fornecem uma barreira

23

efetiva contra a desidratação e variações no meio bucal, ajudando na mastigação, fala e

deglutição.

Inúmeras glicoproteínas secretadas pelas glândulas salivares maiores,

especialmente a parótida e submandibular, pertencem ao grupo de proteínas ricas em prolina

(PRPs), muitas das quais são fosforiladas. As PRPs constituem uma significante fração da

proteína total salivar e têm importantes atividades biológicas. Em decorrência da

concentração relativamente alta de radicais ácidos, especialmente grupos fosfatos, essas

proteínas apresentam grande afinidade pela hidroxiapatita, sendo um dos principais

constituintes da película adquirida, filme orgânico que recobre a superfície dos dentes, e

também foram observadas no biofilme dental (VITORINO et al., 2004). São inibidoras do

crescimento cristalino do fosfato de cálcio, controlando a precipitação desse sal pela saliva

supersaturada em íons cálcio e fosfato, além de prevenirem a cristalização no interior da

glândula salivar e a formação de tártaro sobre a superfície dos dentes. Esta regulação do meio

iônico é em grande parte proporcionada pela estaterina, uma fosfoproteína rica em tirosina,

que inibe a precipitação espontânea de soluções supersaturadas de sais de cálcio e fosfato

(JENSEN et al., 1991).

As α-amilases constituem um grupo complexo de enzimas digestivas salivares

com grande número de variáveis genéticas. Além da função digestiva, existem evidências de

que as α-amilases imobilizadas na superfície da hidroxiapatita do dente apresentam receptores

para adesão de muitas espécies de Streptococcus e, portanto, contribuem para a formação do

biofilme dental (SCANNAPIECO; TORRES; LEVINE, 1995).

A saliva desempenha papel importante na acuidade gustativa através da

solubilização dos componentes dos alimentos e como meio de interação com os receptores das

células gustativas. Nesse aspecto, alguns trabalhos da literatura têm descrito a presença de

24

uma proteína específica da parótida humana denominada gustina, normalmente associada ao

zinco, como sendo a responsável pela sensação do paladar (SHATZMAN; HENKIN, 1981).

As pesquisas com saliva têm permitido a identificação de um completo arsenal

de proteínas com atividade antimicrobiana, cuja função é manter um balanço ecológico das

bactérias que afetam a saúde geral e oral. Além de uma série de mucinas de alto e baixo peso

molecular e glicoproteínas que atuam como agentes aglutinantes promovendo a aglomeração,

“clearance” bacteriano e redução da colonização bacteriana inicial na cavidade oral, outras

proteínas tais como a lisozima, lactoferrina, peroxidases, histatinas, imunoglobulinas e

defensinas exercem atividade antibacteriana, antiviral e antifúngica (BATTINO et al., 2002;

AMEROGEN; VEERMAN, 2002).

As glândulas salivares são consideradas um reservatório protéico natural de

muitos fatores de crescimento. Em humanos, a família do fator de crescimento epidérmico

(FCE), de fibroblastos (FCF), de hepatócito (FCH), semelhante à insulina (FCI) e fator de

crescimento endotelial vascular (FCEV) têm sido detectadas nas glândulas, bem como na

saliva, mas as funções fisiológicas destas substâncias na cavidade oral não estão totalmente

esclarecidas (CONSTIGAN; GUYDA; POSNER, 1988). Existem evidências de que estas

substâncias exercem papel fundamental no reparo de tecidos moles onde atuam na

cicatrização de ulcerações.

A fosfatase alcalina (FA) é uma proteína com atividade enzimática envolvida na

hidrólise de ligações ésteres-fosfato de inúmeras moléculas fosforiladas, cujos grupos fosfatos

são liberados na forma livre. Barabash et al. (1981) registraram a presença dessa enzima nas

glândulas salivares da parótida, submandibular e da mucosa, bem como em células epiteliais

esfoliadas, leucócitos e bactérias da placa.

Algumas pesquisas concluíram que a FA é produzida dentro da área periodontal

e sulco gengival. As principais fontes da enzima nessas áreas são os leucócitos

25

polimorfonucleares, bactérias do biofilme dental e células dos osteoclastos e fibroblastos

(ISHIKAWA; CIMASONI, 1970). A liberação dessa proteína intracelular no fluido gengival

é usualmente indicativa de inflamação e/ou destruição tecidual. Estes trabalhos têm mostrado

que o nível de FA no fluido gengival e saliva total estão positivamente correlacionados com a

gravidade da doença periodontal (CHAPPLE et al., 1994).

Existem relatos de que a atividade da FA na saliva e biofilme dental pode estar

positivamente correlacionada com a susceptibilidade à cárie. Nesse sentido, Gandhy e Damle

(2003) registraram aumento na atividade da FA em indivíduos com cárie rampante em relação

a indivíduos livres de cárie. Rudenko (1991) observaram níveis elevados de FA na saliva de

crianças com diferentes formas de cárie. Mais recentemente, concluiu-se que a FA é um

marcador de cárie estatisticamente significante e sugeriram o seu uso como método biológico

de detecção de cárie (N’DOBO-EPOY et al., 2001).

Embora pouco documentado, existem indícios de correlação positiva entre

cálculo dental e atividade da FA na saliva e biofilme dental. O pirofosfato é um potente

inibidor de cálculo dental. Investigações posteriores observaram que o pirofosfato é

facilmente hidrolisado pela FA salivar, produzindo grupos fosfatos livres que podem

favorecer a formação de depósitos de fosfato de cálcio (BERCY; VREVEN, 1979). Os

resultados dessa pesquisas sugerem que a mineralização do biofilme dental não é somente

uma mineralização passiva das bactérias, mas também um processo ativo promovido por

enzimas, onde a FA desempenha papel importante.

Dibdin e Dawes (1998) estudaram o efeito da concentração de uréia da saliva no

pH do biofilme dental e concluíram que níveis normais de uréia salivar são suficientes para

aumentar significativamente esse pH e reduzir a profundidade e extensão da curva de Stephan

após a exposição de carboidratos fermentáveis. Os mesmos autores também verificaram que a

26

exposição do biofilme dental à quantidade adicional de uréia através da mastigação de gomas

contendo uréia causa elevação do pH da mesma.

A amônia do biofilme dental resultante do metabolismo da uréia e de

aminoácidos pode inibir a progressão de cárie dental através da neutralização dos ácidos

gerados pela glicólise bacteriana (BISWAS; KLEINBERG, 1971; CLANCY et al., 2000).

Além disso, as condições menos ácidas resultante desses processos fornecem um meio mais

favorável para o crescimento de espécies bacterianas menos cariogênicas. Assim, a ureólise

pode ter um grande impacto na ecologia do biofilme oral (CLANCY et al., 2000).

27

3 PROPOSIÇÃO

O estudo tem como objetivo analisar os parâmetros salivares (fluxo salivar, pH,

proteína, fosfatase alcalina e uréia) e clínicos (índices gengival e de placa e profundidade à

sondagem) de pacientes portadores de doença periodontal crônica em comparação a

indivíduos saudáveis, além de verificar se esses parâmetros salivares podem complementar a

avaliação da resposta do hospedeiro frente à doença periodontal.

28

4 MATERIAL E MÉTODO

Este estudo foi previamente submetido e aprovado pelo Comitê de Ética em

Pesquisa da Universidade de Taubaté – (Protocolo CEP/UNITAU no 452/05 - ANEXO A). Os

indivíduos foram selecionados na Clínica de Pós-Graduação do Departamento de Odontologia

da Universidade de Taubaté – UNITAU. Os participantes foram informados sobre o objetivo

deste estudo, e aqueles que concordaram em participar assinaram um Termo de

Consentimento Livre e Esclarecido de acordo com a resolução 196/96 (APÊNDICE B).

4.1 CRITÉRIOS DE INCLUSÃO

Foram incluídos neste estudo quarenta indivíduos de ambos os gêneros, com

idade entre 18 e cinqüenta anos. Os indivíduos foram divididos em dois grupos:

Grupo 1 (Grupo Controle) com vinte indivíduos com boas condições bucais (periodonto

saudável, mucosa contínua sem qualquer tipo de ferimento, língua com padrão de

normalidade).

Grupo 2 (Grupo teste) composto por vinte indivíduos com doença periodontal crônica, com

pelo menos um sítio em quadrantes distintos com profundidade à sondagem ≥ 4,0 mm, perda

de inserção de pelo menos 2,0 mm e devendo apresentar pelo menos dez dentes na cavidade

bucal.

4.2 CRITÉRIOS DE EXCLUSÃO

Foram excluídos deste estudo os indivíduos portadores de doenças sistêmicas

que necessitassem de cobertura antibiótica profilática e/ ou condições debilitantes (Doenças

29

auto-imunes, cardiopatias associadas a um maior risco de endocardite bacteriana, artropatias

inflamatórias, condições de imunossupressão, hemofilia, entre outras) (DAJANI et al., 1997),

fumante ativo ou ex-fumante, usuários de medicamentos que pudessem alterar o fluxo salivar

(ansiolíticos, hipnóticos, antidepressivos, anti-histamínicos, diuréticos, narcóticos entre

outros), indivíduos que foram submetidos a antibioticoterapia e corticoterapia nos seis meses

antecedentes ao início do estudo e também usuários de enxaguatórios bucais.

4.3 ANAMNESE

Uma anamnese detalhada foi realizada, obtendo-se os dados pessoais e a história

médica com o objetivo de verificar o estado de saúde geral e bucal do indivíduo. As

informações obtidas foram registradas na ficha clínica, utilizada pela Disciplina de

Periodontia do Departamento de Odontologia da UNITAU (ANEXO B).

4.4 EXAME CLÍNICO PERIODONTAL

O exame clínico periodontal foi realizado, avaliando-se os seguintes parâmetros

clínicos:

a) Índice de Placa (IP) (SILNESS; LÖE, 1964) – foi obtido dos sítios estudados por meio da

avaliação da espessura da placa na superfície dental. Os elementos dentais foram secos com

jatos de ar e com explorador dental foi avaliada a quantidade de placa. A avaliação resultou

em valores de 0, 1, 2 ou 3, dependendo da quantidade encontrada de placa.

b) Índice Gengival (IG) (LÖE; SILNESS, 1963) – foi obtido dos sítios examinados pela

avaliação da quantidade de sangramento após sondagem dos dentes nas faces mesio-

vestibular, vestibular, disto-vestibular, mésio-lingual/Palatina, lingual/Palatina e disto-

30

lingual/Palatina. Os valores foram expressos na escala de 0, 1, 2 ou 3, dependendo das

características do sangramento.

c) Profundidade de Sondagem (PS) - utilizando um espelho clínico plano no 5, pinça clínica,

sonda periodontal milimetrada tipo Williams. A profundidade de sondagem (distância

compreendida entre a margem gengival e o fundo do sulco gengival ou bolsa periodontal) foi

realizada em seis pontos, sendo três pontos por vestibular (mésio-vestibular, centro-vestibular

e disto-vestibular) e três pontos por palatino ou lingual (mésio-palatino ou mésio-lingual,

centro-lingual ou centro-palatino, disto-palatino ou disto-lingual). Dessa maneira, verificou-se

a profundidade da bolsa periodontal e foram selecionados no mínimo quatro sítios com bolsas

periodontais ≥ 4,0 mm de profundidade. Em todas as fases experimentais desta pesquisa,

foram praticados todos os preceitos de biossegurança, tanto no que diz respeito ao uso de

máscaras, avental e luvas quanto à destinação do material utilizado, para o lixo conveniente

ou para a esterilização.

d) Perda de inserção clínica- medida correspondente à distância da junção

amelocementária(Ponto fixo) até a porção mais apical do sulco/bolsa periodontal, no ato da

sondagem periodontal e que estima a perda de suporte periodontal.

4.5 COLETA E ARMAZENAMENTO DAS AMOSTRAS DE SALIVA

As amostras de saliva dos grupos controle e teste foram coletadas preconizando

o método padrão descrito por Söderling et al. (1989). As coletas foram realizadas em tubos

graduados com precisão de 50,0 mL acondicionados em recipiente de isopor contendo gelo.

31

4.6 MENSURAÇÃO DO FLUXO SALIVAR

O voluntário recebeu um pedaço de filme (Parafilm), o qual foi mastigado por

1 min para se adaptar a esta condição (BIRKHED; HEINTZE, 1989). Após esse tempo toda a

saliva produzida foi deglutida, e a partir desse momento iniciou-se a contagem do tempo de 3

min e toda a saliva produzida foi coletada em um tubo graduado esterilizado e livre de

contaminações químicas. O volume de saliva estimulada coletado no tubo graduado foi

dividido pelo tempo estipulado (3 min) e o resultado foi expresso em mL/min.

4.7 MENSURAÇÃO DO PH SALIVAR

O valor do pH da saliva foi mensurado imediatamente após as coletas das

amostras. O valor do pH salivar foi registrado em um potenciômetro munido de um eletrodo

de vidro com membrana chata, previamente lavado com água deionizada e calibrado com

soluções tampões de pH 7,0 e 4,0.

4.8 ANÁLISE DA CONCENTRAÇÃO DE PROTEÍNA TOTAL NA SALIVA

O conteúdo protéico da saliva foi avaliado pelo método de Lowry et al. (1951).

A concentração do produto final da reação de cor azul foi mensurada em comprimento de

onda de 660 nm, utilizando-se um espectrofotômetro. Para o cálculo da concentração foi

utilizada como referência uma curva padrão com soluções de albumina de soro bovino.

32

4.9 ANÁLISE DA ATIVIDADE ENZIMÁTICA DA FOSFATASE ALCALINA

A atividade enzimática da fosfatase alcalina (FA) em U/L foi determinada pelo

método descrito por Roy (1970), utilizando a timolftaleína monofosfato como substrato, que

após hidrólise libera timolftaleína de cor azul em meio básico. A intensidade da cor formada é

diretamente proporcional à atividade enzimática e foi medida em espectrofotômetro com

comprimento de onda de 590 nm.

4.10 ANÁLISE DA CONCENTRAÇÃO DE URÉIA

A concentração de uréia na saliva foi determinada pelo método do diacetil

monóxido-tiosemicarbazida, descrito por Foster e Hochholzer (1971), o qual se baseia na

reação direta entre a uréia e o monóxido de diacetil na presença da tiosemicarbazida, que

intensifica a reação, diminuindo a necessidade de meios fortemente ácidos. A concentração do

produto final da reação de cor verde foi medida em espectrofotômetro com comprimento de

onda de 520 nm.

4.11 ANÁLISE ESTATÍSTICA

Após a obtenção dos dados dos parâmetros salivares (fluxo, pH, proteína,

fosfatase alcalina e uréia) e dos parâmetros clínicos (índice gengival, índice de placa e

profundidade de sondagem), foram analisados estatisticamente ao nível de significância (α)

de 5% por meio do programa BioEstat para Windows versão 3,0. A comparação das variáveis

dos parâmetros salivares entre os grupos controle e experimental foi realizada usando o Teste

t de Student. Em seguida, com o objetivo de se verificar o grau de associação entre duas ou

33

mais variáveis, foi aplicada a análise de correlação no grupo experimental para correlacionar

os parâmetros salivares entre si, os parâmetros clínicos entre si e os parâmetros salivares

versus parâmetros clínicos.

34

5 RESULTADOS

Os valores médios e desvios-padrão dos parâmetros bioquímicos da saliva:

fluxo salivar não estimulado (FSNE), fluxo salivar estimulado (FSE), pH, concentração de

proteína total, atividade enzimática da fosfatase alcalina (FA) e concentração de uréia, tanto

no grupo controle (indivíduos saudáveis) como no grupo teste (indivíduos com periodontite

crônica) são mostrados na Tabela 1. As variáveis apresentaram diferença estatística (p<0,05),

com exceção do fluxo salivar estimulado (p>0,05). As variáveis dos parâmetros salivares são

mostradas isoladamente nas Figuras 1, 2, 3, 4 e 5.

Tabela 1-Médias e desvios-padrão dos parâmetros salivares nos grupos controle e experimental

Parâmetros Salivares Grupos

Controle (n=20) Teste (n=20)

FSE (mL/min) 2,88 ± 1,07 a 2,33±1,11 a

pH 6,91 ± 0,18 a 7,71±0,43 b

Proteína (mg/dL) 618,09 ± 17,52 a 599,15±51,86 b

FA (U/L) 10,63 ± 1,48 a 16,79±1,72 b

Uréia (mg/dL) 52,67 ± 7,27 a 117,99±12,52 b

Valores médios seguidos por letras distintas (sentido horizontal) diferem estatisticamente entre si (p<0,05)

35

Figura 1-Valores médios do fluxo salivar estimulado

Figura 2-Valores médios do pH da saliva

36

Figura 3-Valores médios da concentração de proteína total

Figura 4-Valores médios da atividade enzimática da fosfatase alcalina

37

Figura 5-Valores médios da concentração de uréia

Os resultados da correlação dos parâmetros clínicos (índice de placa – IP, índice

gengival – IG e profundidade de sondagem - PS) entre si, mostraram que existe uma baixa

correlação negativa entre as variáveis IP vs IG e IP vs PS, e uma correlação quase nula entre

as variáveis IG vs PS, mas todas elas não foram estatisticamente significativas (p>0,05),

conforme Tabela 2.

Tabela 2-Correlação dos Parâmetros Clínicos entre si

Parâmetros Clínicos Coeficiente de Correlação (r) p – valor

IP vs IG - 0.1297 0.61 ns

IP vs PS - 0.4599 0.055 ns

IG vs PS - 0.0068 0.98 ns

ns = não significante (p>0,05)

A Tabela 3 mostra a correlação dos parâmetros salivares entre si. Houve uma

correlação positiva e estatisticamente significante somente entre as variáveis: pH e uréia. As

demais correlações não foram estatisticamente significativas. A Figura 6 mostra a correlação

entre a variável pH e uréia.

38

Tabela 3-Correlação dos Parâmetros Salivares entre si

Parâmetros Salivares Coeficiente de Correlação (r) p – valor

pH vs Uréia 0,5 0,035

Figura 6-Correlação positiva e estatisticamente significante entre pH e Uréia

Os resultados da correlação entre parâmetros clínicos versus parâmetros

salivares mostraram uma baixa correlação entre as variáveis, mas todas sem significância

estatística (p>0,05).

39

Tabela 4-Correlação entre os parâmetros clínicos e parâmetros salivares

Parâmetros Salivares

Parâmetros Clínicos FSE pH Proteína Fosfatase Alcalina Uréia

IP 0.20 ns 0.15 ns - 0.40 ns - 0.23 ns 0.05 ns

IG - 0.17 ns 0.13 ns 0.45 ns 0.05 ns - 0.01 ns

PS - 0.22 ns - 0.15 ns 0.43 ns - 0.16 ns - 0.07 ns

ns = não significante – (p > 0,05)

40

6 DISCUSSÃO

A periodontite é uma doença infecciosa que resulta na inflamação dos tecidos de

suporte do dente, na perda progressiva de inserção conjuntiva e de osso alveolar de suporte. A

presença de placa bacteriana está relacionada com o início e/ou exacerbação da gravidade da

doença e pode ter uma função como precursora para a perda de inserção ao redor do dente.

(ARMITAGE, 1999).

A periodontite crônica é uma doença infecciosa resultando na inflamação dos

tecidos de proteção do dente, na perda progressiva de inserção conjuntiva e de osso alveolar

de suporte. É a patologia periodontal mais frequentemente encontrada, podendo ocorrer em

qualquer idade e afetar ambas as dentições, embora sua ocorrência envolva comumente

indivíduos adultos. Apresenta um padrão de progressão lenta ou moderada, podendo,

entretanto, apresentar períodos de progressão rápida (ARMITAGE, 1999).

No presente estudo, o grupo teste foi composto por vinte indivíduos com

periodontite crônica, justamente por se tratar da patologia periodontal mais freqüente entre os

indivíduos acometidos por alterações periodontais.

O número de pacientes periodontais avaliados (n=20) está de acordo com a

literatura (OZMERIC; ELGUN; URAZ, 2000; TODOROVIC et al., 2005), visto que as

variáveis avaliadas nos parâmetros salivares apresentaram homogeneidade.

A avaliação dos parâmetros salivares em pacientes portadores de doença

periodontal vem sendo cada vez mais utilizada no monitoramento da evolução da doença. A

saliva pode ser coletada e analisada mais facilmente que o fluido gengival e trata-se de um

método não invasivo comparado à coleta da amostra de sangue. Diante disto, o interesse na

saliva como fluido de diagnóstico tem aumentado nas últimas décadas (MANDEL, 1990). Na

medicina, a saliva tem sido utilizada para diagnosticar problemas clínicos, como de toxicidade

41

(mensurações de cálcio e potássio), desordens inflamatórias (prostaglandinas),

imunodeficiência (imunoglobulinas) e uso de algumas drogas (MANDEL, 1993). Já na

Odontologia, os testes salivares têm sido correlacionados com a susceptibilidade ao

desenvolvimento de cárie dental (BIRKHED; HEINTZE, 1989) e com a presença e evolução

da doença periodontal (SAHINGUR; COHEN, 2004).

A utilização da saliva como meio de diagnóstico de doença periodontal tem sido

cada vez mais estudado (KAUFMAN; LAMSTER, 2000). As análises compreendem

imunoglobulinas, enzimas, constituintes do fluido gengival, componentes bacterianos e seus

produtos, compostos voláteis e características fenotípicas (KAUFMAN; LAMSTER, 2000;

MANDEL, 1990). Totan et al. (2006) ressaltaram que a saliva pode ser usada como um meio

de diagnóstico na medicina. Diversos componentes salivares podem ser considerados como

marcadores de doença, como algumas enzimas (fosfatase alcalina, esterase, glucuronidase,

aminopeptidase), imunoglobulinas (IgA, IgG) e hormônios (hormônios esteróides). Muitos

desses componentes salivares podem ser úteis como marcadores bioquímicos na evolução da

doença periodontal, para a qual a análise da saliva pode ser utilizada no monitoramento da

doença.

Há importantes enzimas associadas com a injúria e morte celular tecidual como

aspartato e alanina aminotransferase, lactato desidrogenase, creatina quinase, fosfatase ácida e

alcalina, γ-glutamil transferase. A atividade dessas enzimas reflete mudanças metabólicas na

inflamação da gengiva e do periodonto. Todorovic et al. (2005) mostraram aumentos

significativos estatisticamente da atividade dessas enzimas na saliva de pacientes com doença

periodontal em relação ao grupo controle e concluíram que a atividade das enzimas salivares,

como marcador bioquímico, pode ser útil no diagnóstico, prognóstico e evolução da doença

periodontal.

42

Entretanto, apesar da promissora utilização da saliva como meio de diagnóstico

em diversas patologias, seu valor pode ser comprometido devido à complexidade das

variáveis como, diferença na composição das glândulas, fluido gengival, microrganismos

orais, células epiteliais descamadas e outras substâncias provenientes do meio externo como

alimentos e produtos de higiene oral. Além disso, o efeito de diluição da saliva pode ocultar

um fator discriminatório de diagnóstico (TURNER, 1993). No entanto, a análise dos

componentes salivares pode revelar uma grande variedade de marcadores de diagnóstico e a

literatura sugere que a análise da atividade enzimática é um fator extremamente promissor

como diagnóstico periodontal (LAMSTER; GRIBIC, 1995).

Sendo assim, o presente estudo teve como objetivo analisar os parâmetros

bioquímicos da saliva (fluxo salivar, pH, proteína, fosfatase alcalina e uréia) em indivíduos

portadores de doença periodontal crônica e compará-los aos de indivíduos saudáveis.

Em relação ao fluxo salivar estimulado (FSE), os resultados não apresentaram

diferenças estatísticas entre os dois grupos, ou seja, o volume de secreção das glândulas

salivares não sofreu interferência quanto à instalação da doença. A mensuração do fluxo

salivar na condição de estímulo é um parâmetro importante para avaliar a capacidade

secretora das glândulas salivares dos indivíduos (SREEBNY, 2000).

A mensuração do pH da saliva mostrou que o valor de pH no grupo com doença

foi maior (p<0,05) em comparação ao grupo controle. O pH da saliva em condições

fisiológicas é de aproximadamente 7,0, sendo que os pacientes com doença periodontal

apresentaram um pH levemente alcalino (7,71), ocorrendo um aumento de aproximadamente

dez unidades, considerando que o valor de pH é expresso em logaritmo. A alcalinização do

pH pode ser entendida através da predominância da microbiota periodontopatogênica, a qual

apresenta como produtos metabólicos, compostos nitrogenados que elevam o pH. Além disso,

a excreção de prótons de hidrogênio (H+) do interior da célula bacteriana pode-se combinar

43

com carbonato (CO3-), formando assim bicarbonato (HCO3

-), aumentando a sua concentração

na saliva e caracterizando uma elevação no pH (DAWES; DONG, 1995).

A mensuração da concentração de proteína total revelou que o grupo com

periodontite crônica apresentou menor concentração (p<0,05) em relação ao grupo controle.

Esse resultado pode estar ligado à atividade proteolítica acentuada que ocorre em condições

patológicas periodontais (CHAPPLE et al., 1994). Ingman et al. (1993) avaliaram a atividade

proteolítica em pacientes com periodontite crônica (grupo 1), periodontite agressiva (grupo 2)

e pacientes saudáveis (grupo controle). O grupo 1 apresentou maior atividade enzimática de

proteases, elastases e colagenases comparado ao grupo 2 e controle. Apesar da atividade

proteolítica se apresentar mais localizada nos tecidos periodontais, a mensuração da proteína

total na saliva no presente estudo foi capaz de expressar essa condição, pois a saliva é

constituída também pelo fluido gengival e permanece constantemente em contato com todas

as estruturas bucais.

A fosfatase alcalina é uma enzima que cataliza a clivagem de ligações ésteres-

fosfato de inúmeras substâncias fosforiladas e hidrolisa compostos fosforilados da saliva e do

biofilme dental, entre eles fosfoproteínas e pirofosfato, liberando grupos fosfatos na forma

livre que contribuem para o aumento desse íon na saliva de pacientes com periodontite

crônica (TOTAN et al., 2006). A atividade da fosfatase alcalina aumenta em pH básico e na

presença de cálcio, o qual atua como cofator da enzima. Portanto, o pH alcalino e a alta

concentração de cálcio em pacientes com doença periodontal crônica podem contribuir para o

aumento da atividade dessa enzima (CHAPLLE et al., 1999; TOTAN et al., 2006). Além das

glândulas salivares e possível difusão, outra fonte de fosfatase alcalina na saliva de pacientes

com doença periodontal crônica podem ser os leucócitos polimorfonucleares, bactérias do

biofilme dental e células dos osteoclastos e fibroblastos presentes no tecido periodontal e

sulco gengival (SAHINGUR; COHEN, 2004). Alguns estudos têm mostrado correlação

44

positiva entre a concentração de fosfatase alcalina presente no fluido gengival e na saliva com

a presença de gengivite e o grau de severidade da doença periodontal (CHAPPLE et al.,1999).

No presente estudo, a atividade da fosfatase alcalina foi maior (p<0,05) em

indivíduos com periodontite crônica comparada com indivíduos saudáveis. Esses resultados

estão de acordo com os estudos de Nakamura e Slots (1983), os quais avaliaram a atividade

enzimática na saliva total e na saliva da parótida em dez indivíduos saudáveis (grupo

controle), dez indivíduos com periodontite crônica (grupo 2) e quatro com periodontite

agressiva (grupo 3). Os indivíduos com periodontite crônica apresentaram aumento da

atividade enzimática da fosfatase alcalina, comparado ao grupo controle, mas não houve

diferença entre os grupos 2 e 3. Abe et al. (1994) verificaram que houve aumento na atividade

enzimática da fosfatase alcalina nos fibroblastos de tecidos inflamados em relação aos tecidos

não inflamados.

A periodontite crônica é detectada pela perda de inserção clínica e profundidade

de sondagem, que como conseqüência, apresenta sangramento gengival e perda óssea

radiográfica (AMERICAN ACADEMY OF PERIODONTOLOGY, 2005). Quanto à

gravidade, a periodontite pode ser leve, quando apresenta de 1,0 a 2,0 mm de perda de

inserção clínica, moderada, quando a perda atinge de 3,0 a 4,0 mm de perda de inserção

clínica e avançada, quando supera 5,0 mm de perda de inserção clínica (ARMITAGE, 1999).

Apesar de não ter sido avaliado radiograficamente a condição dos pacientes com doença

periodontal neste estudo, vale ressaltar que o aumento da atividade da fosfatase alcalina em

pacientes com doença periodontal pode estar associado com a perda do osso alveolar, como

mostrou o estudo de Totan et al. (2006), no qual houve aumento significante (p<0.01) na

atividade da fosfatase alcalina em pacientes com doença periodontal e perda do osso alveolar

comparado ao grupo controle.

45

É interessante salientar que a elevada concentração de fosfatase alcalina na

saliva dos pacientes com doença periodontal crônica pode promover a hidrólise das ligações

ésteres-fosfato da estaterina. A estaterina é uma fosfoproteína rica em tirosina, responsável

pela estabilização da supersaturação de cálcio e fosfato da saliva inibindo, portanto a

precipitação espontânea de sais de cálcio e fosfato. Dessa forma, a degradação da estaterina é

um dos fatores que pode predispor os indivíduos à formação de cálculo dental.

A uréia é provavelmente a mais abundante fonte de nitrogênio na cavidade oral.

A uréia se difunde da saliva para o biofilme dental onde é rapidamente metabolizada pela

enzima urease bacteriana produzindo amônia e gás carbônico, provocando elevação do pH do

meio (CARLSSON; HAMILTON, 1995; DIBDIN; DAWES, 1998).

No presente estudo, a concentração de uréia na saliva dos pacientes com

periodontite crônica foi maior (p<0,05) quando comparada ao grupo dos indivíduos

saudáveis, Este resultado pode ser justificado pela produção de amônia (quanto maior a

concentração de uréia, maior será a concentração de amônia), através da atividade ureolítica

bacteriana, especialmente por bactérias anaeróbicas gram-negativas, a qual apresenta

potencial citotóxico para a mucosa e tecidos periodontais, tendo em vista a fácil difusão dessa

molécula nas membranas celulares do hospedeiro. Dessa maneira, torna-se pertinente a

mensuração da uréia como mais um importante parâmetro salivar na condição de doença

periodontal, apesar de a literatura abordar a concentração de uréia presente na saliva

relacionada mais com os aspectos de desenvolvimento de cálculo dental e atividade de cárie

em função do aumento do valor de pH.

Alguns estudos avaliaram a ação da uréia na cavidade bucal, inserindo-a em

goma de mascar ou dentifrício, no entanto os resultados são divergentes. No estudo de Fure,

Lingström e Birkhed (1998), os autores mostraram que os indivíduos que fizeram uso

freqüente de goma de mascar com uréia durante três meses tiveram aumento significativo no

46

valor do pH salivar, mas o fluxo salivar e a formação de cálculo não apresentaram diferenças

estatísticas em relação ao grupo controle.

Belting e Gordon (1966b) avaliaram em um estudo clínico, onde os indivíduos

utilizaram dentifrícios com uréia, ocorrendo redução de 36% na formação de cálculo. Os

mesmos autores sugeriram duas possibilidades para explicar os resultados. Primeiramente, a

uréia pode interferir na formação do cálculo artificial, dissolvendo o material

mucoproteináceo; segundo pode aumentar a solubilidade dos sais de cálcio na saliva

(BELTING; GORDON, 1966a).

Entretanto, resultados opostos também foram encontrados correlacionando o uso

de produtos com uréia e a formação de cálculo dental, como no estudo de Shapiro et al.

(1973), no qual foi utilizado um gel de peróxido de uréia a 11% durante seis meses e houve

um aumento significante na formação de cálculo dental, enquanto a formação de placa e a

presença de gengivite foram reduzidas.

No presente estudo foram realizados os testes de correlação dos parâmetros

clínicos (índice de placa, índice gengival e profundidade de sondagem) entre si, não

apresentando nenhuma significância estatística. Esse fato demonstra que os parâmetros

clínicos apresentam características independentes em relação aos fatores de influência da

doença periodontal. O mesmo ocorreu com a correlação entre os parâmetros salivares (fluxo,

pH, proteína, fosfatase alcalina e uréia) e os parâmetros clínicos. Esses resultados mostram

que a atividade da doença inserida dentro de um modelo de progressão em surtos episódicos

pode explicar a ausência de correlação entre esses parâmetros.

No entanto, o resultado da correlação dos parâmetros salivares entre si mostrou

uma correlação positiva e significativa (r = 0.50 e p =0.035) entre uréia e pH, ou seja, quanto

maior a concentração de uréia, maior o valor de pH. Esse resultado pode ser explicado através

47

da ação catalítica da enzima urease sobre a uréia e conseqüente formação de amônia,

responsável pelo aumento do pH do meio.

De acordo com este estudo, pode-se dizer que os parâmetros salivares constituem

um recurso de grande valia no diagnóstico e prognóstico da doença periodontal. Entretanto, é

de bom senso que os resultados obtidos neste estudo não sejam métodos unicamente

suficientes para caracterizar a doença e sim complementar a casuística, pois os diversos

métodos utilizados no diagnóstico e tratamento da doença têm como objetivo final o

restabelecimento biológico e funcional dos tecidos periodontais.

48

7 CONCLUSÕES

Com base nos resultados deste estudo, podemos concluir que:

1. Os indivíduos com periodontite crônica apresentam alterações nos parâmetros

salivares como:

a) aumento nos valores de pH

b) diminuição na concentração de proteína total

c) aumento da atividade da fosfatase alcalina

d) aumento na concentração de uréia

2. O fluxo salivar estimulado não é alterado na presença de periodontite crônica.

3. Não há correlação entre os parâmetros clínicos entre si e dos mesmos em relação

aos parâmetros salivares.

4. Dentre os parâmetros salivares entre si, houve uma correlação estatisticamente

significativa somente entre as variáveis pH e uréia.

49

REFERÊNCIAS

ABE, T. et al. Expression of membrane alkaline phosphatase activity on gingival fibroblasts in chronic inflammatory periodontal disease. J. Periodont. Res.,Copenhagen, v. 29, n. 8, p. 259-265, June 1994.

ALBANDAR, J. M.; RAMS, T. E. Global epidemiology of periodontal diseases. Periodontol. 2000, Copenhagen, v. 29, n. 7, p. 7-10, Dec. 2002.

AMERICAN ACADEMY OF PERIODONTOLOGY. Position Paper. Epidemiology of Periodontal Diseases. J. Periodontol., Chicago, v. 76, n. 6, p. 1406-1419, Aug. 2005.

AMERONGEN, A. V.; BOLCHER, J. G.; VEERMAN, E. C. Salivary mucins: protective functions in relation to their diversity. Glycobiolgy, Amsterdan, v. 5, n. 8, p. 733-40, Dec. 1995.

AMERONGEN, A. V.; VEERMAN, E. C. Saliva: the defender of the oral cavity. Oral Dis., New York, v. 8, n. 1, p. 12-22, Jan. 2002.

ARMITAGE, G. C. Development of a classification system for periodontal diseases and conditions. Ann. Periodontol., Chapel Hill, v. 4, n. 1, p. 1-6, Dec. 1999 Review.

BAEV, D. et al. Human salivary histatin 5 causes disordered volume regulation and cell cycle arrest in candida albicans. Infect. Immun., New York, v. 70, n. 9, p. 4777-4784, Sept. 2002.

BARABASH, R. D. et al. Source of enzimes of mixed human saliva. Vopr. Med. Khim, Moscou, v. 27, n. 1, p. 22-27, Jan./Feb. 1981.

BATTINO, M. et al. The antioxidant capacity of saliva. J. Clin. Periodontol., Newcastle, v. 29, n. 3, p. 1989-1994, Mar. 2002.

BELTING, C. M.; GORDON, D. L. In vitro effect of urea on artificial calculus formation. J. Periodontol., Chicago, v. 37, p. 20-25, Jan. 1966.

BELTING, C. M.; GORDON, D. L. In vivo effect of urea containing dentifrice on dental calculus formation. J. Periodontol., Chicago, v. 37, p. 26-33, Jan. 1966.

BERCY, P.; VREVEN, J. Correlation between calculus index and acid and alkaline pyrophosphatase activities of dental plaque and saliva. J. Biol. Buccale, Roma, v. 7, n. 1, p. 31-36, Mar. 1979.

50

BERNE, R. M. et al. Fisiologia, 5. ed. Rio de Janeiro: Elsevier, 2004. p. 663-749.

BIRKHED, D.; HEINTZE, U. Salivary secretion rate, buffer capacity and pH. In: TENOVUO, J. O. Human saliva: clinical chemistry and microbiology. Boca Ratton: CRC Press, 2. ed., 1989. v. 1, p. 25-74.

BISWAS, S. D.; KLEINBERG, I. Effect of urea concentration on its utilization, on the pH and formation of ammonia and carbon dioxide in human salivary sediment system. Arch. Oral Biol., Oxford, v. 16, n. 7, p. 759-780, July 1971.

BOLSCHER, J. G. et al. Inhibition of HIV-1IIIB and clinical isolates by human parotid, submandibular, sublingual and palatine saliva. Eur. J. Oral Sci., Londres, v. 110, n. 2, p. 149-156, Apr. 2002.

BUTTERWORTH, C. J. et al. Salivary alkaline concentration as an outcome measure for periodontal therapy. J. Dent. Res., New York, v. 81, p. A-203, Mar. 2002.

CARLSSON, J.; HAMILTON, I. Atividade metabólica das bactérias orais, In: THYLSTRUP, A.; FEJERSKOV, O. Tratado de cariologia Clínica. 2. ed. Rio de Janeiro: Santos, 1995. cap. 4, p. 71-88.

CARRANZA, F. A. et al. Periodontia clínica. 9. ed. Guanabara Koogan: Rio de Janeiro, 2004.

CHAPPLE, I. L. et al. Site-specific alkaline phosphatas levels in gingival crevicular fluid in health and gingivitis: cross-sectional studies. J. Clin. Periodontol., Birminghan, v. 21, n. 6, p. 409-414, July 1994.

CHAPPLE, I. L. et al. Prediction and diagnosis of attachment loss by enhanced chemiluminescent assay of crevicular fluid alkaline phosphatase levels. J. Clin. Periodontol., Boston, v. 26, n. 3, p. 190-198, Mar. 1999.

CLANCY, K. A. et al. Characterization of recombinant, ureolytic Streptococcus mutans

demonstrates an inverse relationship between dental plaque ureolytic capacity and cariogenicity. Infect. Immun., New York, v. 68, n. 5, p. 2621-2629, May 2000.

CORTELLI, J. R. et al. Glossário da sociedade brasileira de periodontologia. SOBRAPE, São Paulo: Santos, v. 15, n. 4, p. 5-76, Dec. 2005.

CONSTIGAN, D. C.; GUYDA, H. J.; POSNER, B. I. Free insulin-like growth factor I (IGF-I) and IGF-II in human saliva. J. Clin. Endocrinol. Metabol., Quebec, v. 66, n. 5, p. 1014-1018, May 1988.

51

DAJANI, C. et al. Prevention of bacterial endocarditis: Recommendations by the American Heart Association. Clin. Infect. Dis., Dallas, v.25, n.6, p.1458-1468, Dec. 1997.

DAWES, C. The effects of flow rate and duration of stimulation of the concentration of protein and main electrolytes in human submandibular saliva. Arch. Oral. Biol., Oxford, v. 19, n. 10, p. 887-895, Oct. 1974.

DAWES, C. The influence of gland size on the flow rate and composition of human parotid

saliva. Dent. J., Kidlington, v. 44, n. 1, p. 21-25, Jan. 1978.

DAWES, C. et al. Physiological factor affecting salivary flow rate, oral sugar clearance and sensation of dry mouth in human. J. Dent. Res., Gotemburgo, v. 66, p. 648-653, Feb. 1987.

DAWES, C.; DONG, C. The flow rate and electrolyte composition of whole saliva elicited by use of sucrose-containing and sugar-free chewing-gums. Arch. Oral Biol., Oxford, v. 40, p. 699-705, Sept. 1995.

DAWES, C. How much saliva is enough for avoidance of xerostomia? Caries Res., Winnipeg, v. 38, n. 3, p. 236-240, May/June 2004.

DEFABIANIS, P.; RE, F. The role of saliva in maintaining oral health. Minerva Stomatol., Turim, v. 52, n. 6, p. 301-308, June 2003.

DIBDIN, G. H.; DAWES, C. A mathematical model of influence on the pH of fasted dental plaque and on the changes occurring during a cariogenic challeng. Caries Res., New York, v. 32, n. 1, p. 70-74, Feb. 1998.

EDGAR, W. M. Saliva: its secretion, composition and functions. British Dental J., Londres, v. 172, n. 6, p. 305-312, Nov. 1992.

ELEY, B. M.; COX, S. W. Advances in periodontal diagnosis, proteolytic and hydrolytic

enzymes link with periodontitis. Br. Dent. J., Londres, v. 184, n. 7, p. 323-328, Apr. 1998.

FERGUSON, D. B. Flow rate and composition of human gland saliva. Arch. Oral Biol., Oxford, v. 44, May 1999.

FOSTER, L. B.; HOCHHOLZER, J. M. A single-reagent manual method for directly determined urea nitrogen in serum. Clin. Chem., New York, v. 17, p. 921-925, Sept. 1971.

52

FURE, S.; LINGSTRÖM, P.; BIRKHED, D. Effect of three months frequent use of sugar-free chewing gum with and without urea on calculus formation. J. Dent. Res., Gotemburgo, v. 77, n. 8, p. 1630-1637, Aug. 1998.

GANDHY, M.; DAMLE, S.G. Relation of salivary inorganic phosphorus and alkaline phosphatase of the dental caries status in children, J. Ind. Soc. Pedogy. Prev. Dent., Mumbai, v. 21, n. 4, p. 135-138, Dec. 2003.

GHEZZI, E. M.; LANGE, L. A. Determination of variation of stimulates salivary flow rates. J. Dent. Res., New York, v. 79, n. 11, p. 1874-1878, Nov. 2000.

HEINTZE, U. et al. Secretion rate, buffer effect of resting and stimulated whole saliva in relation to general health. Swed. Dent. J., Gotemburgo, v. 10, n. 5, p. 213-219, Oct. 1986.

HEINTZE, U.; BIRKHED, D.; BJORN, H. Secretion rate, buffer effect of resting and

stimulated whole saliva as an function of age and sex. Swed. Dent. J., Gotemburgo, v. 7, n. 6, p. 227-238, Sept. 1983.

INGMAN, T. et al. Salivary collagenase, elastase- and trypsin-like proteases as biochemical markers of periodontal tissue destruction in adult and localized juvenile periodontitis. Oral Microbiol. Immunol., Helsinki, v. 8, n. 5, p. 298-305, Oct. 1993.

ISHIKAWA, I.; CIMASONI, G. Alkaline phosphatase in human gingival fluid and its relation to periodontitis. Arch. Oral Biol., Oxford, v. 15, n. 12, p. 1410-1414, Dec. 1970.

JENSEN, J. L. et al. Multiple forms of statherin in human salivary secretions. Arch. Oral Biol., Oxford, v. 36, n. 7, p. 529-534, Aug. 1991.

KAUFMAN, K.; LAMSTER, I. B. Analysis of saliva for periodontal diagnosis: a review. J. Clin. Periodontol., New York, v. 27, n. 7, p. 453-465, July 2000.

KAUFMAN, K.; LAMSTER, I. B. The diagnostic applications of saliva: a review. Crit. Rev. Oral Biol. Med., New York, v. 13, n. 2, p. 197-212, Nov. 2002.

LAMSTER, I. B.; GRBIC, J. T. Diagnosis of periodontal disease based on analysis of the host response. Periodontol. 2000, Copenhagen, v. 7, p. 83-99, Feb. 1995.

LÖE, H.; SILNESS J. Periodontal Disease in pregnancy. Acta Odontol. Scand., Oslo, v. 21, p. 533, 1963.

53

LOWRY, D. R. et al. Protein measurement with the folin-phenol reagent. J. Biol. Chem., New York, v. 193, p. 265-275, 1951.

MANDEL, I. D. The functions of saliva. J. Dent. Res., New York, v. 66, p. 623-627, Feb. 1987.

MANDEL, I. D. The diagnostic uses of saliva. J. Oral Pathol. Med., New York, v. 19, p. 119-125, May 1990.

MANDEL, I. D. Salivary diagnosis: promises. Ann. N.Y. Acad. Sci., New York, v. 694, p. 1-10, Jan. 1993.

NAKAMURA, M.; SLOTS, J. Salivary enzymes. Origin and relationship to periodontal disease. J. Periodont. Res., Copenhagen, v. 18, n. 5, p. 559-569, Dec. 1983.

N’DOBO-EPOY, P. et al. Comparison of the clinical detection and the biological detection of dental caries. Odontostomatol. Trop., New York, v. 24, n. 96, p. 5-8, Dec. 2001.

OFFNER, G. D.; TROXLER, R. F. Heterogeneity of high-molecular human salivary mucins. Adv. Dent. Res., New York, v. 14, p. 69-75, Dec. 2000.

OZMERIC. N.; ELGUN. S.; URAZ. A. Salivary arginase in patients with adult periodontitis. Clin. Oral Investig. Ancara, v. 4, n. 1, p. 21-24, Mar. 2000.

PAPAPANOU, P. N. Epidemiology of periodontal diseases. J. Periodontol., Chicago, v. 67, n. 9, p. 935-945, Sept. 1996.

PEDERSEN. M. et al. Oral findings in patients with primary Sjogren’s Syndrome and Oral Lichen Planus – A preliminary study of the effects products. A of bovine colostrum –

containing oral hygiene. Clin. Oral Investig., Copenhagen, v. 1, n. 6, p. 11-20, Mar. 2002.

ROY, A. M. Rapid method for determining alkaline phosphatase activity with thymolphthalein monophosphate. Clin. Chem., New York, v. 16, n. 5, p. 431-436, May 1970.

RUDENKO, M. M. Metabolic disordens and their correction in schoolchildren with different form of caries. Stomatologiia, New York, v. 70, n. 1, p. 55-59, Jan./Feb. 1991.

SAHINGUR, E. S; COHEN, E. R. Analysis of host response and risk for disease progression. Periodontol. 2000, Copenhagen, v. 34, p. 57-83, Feb. 2004.

54

SCANNAPIECO, F. A.; TORRES, G. I.; LEVINE, M. J. Salivary amylase promotes adhesion of oral streptococci to hydroxiapatite. J. Dent. Res., New York, v. 74, n. 7, p. 1360-1366, July 1995.

SHAPIRO, W.B. et al. The influence of urea peroxide gel on plaque, calculus and chronic gingival inflammation. J. Periodontol., Chicago, v. 44, n. 10, p. 636-639, Oct. 1973.

SHATZMAN, A. R.; HENKIN, R. I. Gustin concentration changes relative to salivary zinc and taste in humans. Proc. Natl. Acad. Sci., New York, v. 78, n. 6, p. 3867-3871, June 1981.

SHIP, J. A. et al. Diagnosing, managing and preventing salivary gland disordes. Oral Dis., New York, v. 8, n. 2, p. 77-89, Mar. 2002.

SÖDERLING, E. et al. Effect of sorbitol, xylitol and xylitol/sorbitol chewing gums on dental plaque. Caries Res. Michigan, v. 23, n. 5, p. 378-384, Mar. 1989.

SREEBNY, L. M.; SCHWARTZ, S. S. A reference guide to drugs and dry mouth-2nd edition. Gerodontology, New York, v. 14, n. 1, p. 33-47, July 1997.

SREEBNY, L. M. Saliva in health and disease: an appraisal update. Int. Dent. J., New York, v. 50, n. 3, p. 140-161, June 2000.

TABAK, L. A. In defense of the oral cavity: structure, biosynthesis, and functions of salivary mucins. Annu. Rev. Physiol., New York, v. 57, p. 547-564, Oct. 1995.

THYLSTRUP, A.; FEJERSKOV, O. Tratado de cariologia. Rio de Janeiro: Cultura Médica, 1995.

TODOROVIC, T. et al. Salivary enzymes and periodontal disease. Med. Oral Patol. Oral Cir. Bucal, Belgrado, v. 133, n. 7, p. 372-378, July 2005.

TOTAN, A. et al. Salivary aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase and alkaline phosphatase: possible markers in periodontal diseases? Clin. Chem. Lab. Med., Bucareste, v. 44, n. 5, p. 612-615, Mar. 2006.

TURNER, R. J. Mechanisms of fluid secretion by salivary glands. Ann. N.Y. Acad. Sci., New York, v. 694, n.1, p. 24-35, Jan. 1993.

VITORINO, R. et al. In vitro hydroxyapatite adsorbed salivary proteins. Biochem. Biophys. Res. Comum., Aveiro, v. 320, n. 2, p. 342-346, July 2004.

55

APÊNDICE A – Termo de Esclarecimento Livre e Esclarecido

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE ESCLARECIDO

TÍTULO: Avaliação dos parâmetros bioquímicos da saliva e do fluido gengival em pacientes portadores de doença periodontal PESQUISADORES: Prof. Dr. Celso Silva Queiroz C.D. Arnaud Alves Bezerra Júnior 1 INTRODUÇÃO: As informações a seguir descreverão esta pesquisa e o papel que você terá como participante. Os pesquisadores responsáveis pelo estudo responderão a todas as perguntas que você possa ter sobre o estudo. Por favor, leia-o cuidadosamente e não tenha dúvida em perguntar qualquer coisa sobre as informações abaixo. 2 PROPÓSITO: Você está sendo convidado a participar de uma pesquisa clínica cujo objetivo é avaliar os parâmetros bioquímicos da saliva e do fluido gengival em pacientes portadores de doença periodontal crônica 3 DESCRIÇÃO DO ESTUDO: Serão selecionados 20 voluntários com doença periodontal crônica e 20 voluntários sem doença periodontal com idade entre 30 e 50 anos. 4 DESCONFORTO, RISCOS E BENEFÍCIOS ESPERADOS: As amostras de saliva e fluido gengival serão coletadas após o exame clínico, todo procedimento ao qual o voluntário será submetido não oferece nenhum prejuízo, trauma ou desconforto trauma. O estudo não oferece qualquer risco, custo ou ressarcimento ao voluntário. Por outro lado, todo voluntário, que apresente a doença será encaminhado para tratamento específico na clínica de pós-graduação (Curso de especialização – Periodontia) da Universidade de Taubaté. 5 COMPENSAÇÃO: Será oferecido à todos os voluntários da pesquisa orientação sobre promoção de saúde bucal e encaminhamento para tratamentos multidisciplinares. 6 CONFIDENCIALIDADE DOS REGISTROS: Concordando em participar desta pesquisa, você permite acesso aos dados obtidos durante o estudo aos pesquisadores nele envolvidos, aos membros do Comitê de Ética responsáveis pela análise deste projeto e à possível agência financiadora. Os resultados deste projeto de pesquisa poderão ser apresentados em congressos ou em publicações, porém sua identidade não será divulgada. 7 DIREITO DE PARTICIPAR, RECUSAR OU SAIR: Ao participar você concorda em cooperar com os procedimentos que serão executados e que foram descritos acima, não abrindo mão dos seus direitos legais ao assinar o termo de consentimento informado. Sua participação neste estudo é voluntária e você poderá recusar-se a participar ou interromper sua participação a qualquer momento, sem penalidade ou perda dos benefícios aos quais tem direito. 8 CONTATOS: Se ainda houver qualquer dúvida sobre o estudo, você poderá receber mais esclarecimentos falando com: Prof.: Dr. Celso Silva Queiroz Aluno: Arnaud Alves Bezerra Júnior

56

Departamento de Odontologia – UNITAU Telefone: (12) 3625 4150 ou 3625 4140

Consentimento do colaborador da pesquisa Eu,_______________________________________________________________________________________________________________________________________ Nascido em ___/___/___ na cidade de ______________________________________ Com R.G. n°_____________________ residente na___________________________ _____________________________________________________________________, Desejo participar da pesquisa sobre “Avaliação dos parâmetros bioquímicos da saliva e do fluido gengival em pacientes portadores de doença periodontal” e autorizo a liberação dos dados obtidos neste estudo aos pesquisadores, assim como sua publicação em revistas científicas especializadas e apresentação em Congresso e Jornadas Científicas. Declaro que minha participação é voluntária e que fui devidamente esclarecido sobre os objetivos deste estudo. Confirmo também que recebi cópia deste termo de consentimento.

Assinatura

Data: ___/___/___

57

APÊNDICE B – Análises estatísticas empregadas após a obtenção dos dados

ANÁLISE ESTATÍSTICA

Os dados obtidos foram analisados estatisticamente ao nível de significância (α) de

5% por meio do programa BioEstat para Windows versão 3.0.

Primeiramente, foi aplicado o Teste t de Student para amostras independentes, para

verificar se houve diferença entre as médias das variáveis em estudo dos grupos controle e

experimental.

A Tabela 1 mostra as médias e os desvios padrão para as variáveis em que

apresentaram diferença estatística nos Parâmetros Salivares. Pode-se observar que a

variável Uréia no grupo experimental foi a que apresentou maior média e a maior desvio

padrão. O Teste t de Student mostrou haver diferença extremamente significante, pois p <

0.0001, para todas as variáveis apresentadas na Tabela 1.

Tabela 1 - Médias e os desvios padrão para as variáveis em que apresentaram diferença estatística nos Parâmetros Salivares.

Parâmetros Salivares

pH Fosfatase Alcalina (U/l) Uréia (mg/dl)

Controle Experim. Controle Experim. Controle Experim.

Média 6.91 7.71 10.63 16.79 52.67 117.99

Desvio padrão 0.18 0.43 1.48 1.72 7.27 12.52

Em seguida, foi aplicada a Análise de Correlação, que tem como objetivo verificar o

grau de associação entre duas ou mais variáveis, no grupo experimental para correlacionar

os Parâmetros Clínicos entre si, os Parâmetros Salivares entre si e os Parâmetros Clínicos

versus Parâmetros Salivares.

Os resultados da correlação dos Parâmetros Clínicos entre si mostram existe uma

baixa correlação negativa entre as variáveis IP vs IG e IP vs PS, e uma correlação quase

58

nula entre as variáveis IG vs PS, mas todas elas não foram estatisticamente significativas (p

> 0.05), conforme Tabela 2.

Tabela 2 - Correlação dos Parâmetros Clínicos entre si.

Parâmetros Clínicos Coeficiente de Correlação (r) p - value

IP vs IG - 0.1297 0.61 ns

IP vs PS - 0.4599 0.055 ns

IG vs PS - 0.0068 0.98 ns

ns = não significante

As Figuras 1, 2 e 3 mostram graficamente a correlação entre as variáveis em estudo

nos Parâmetros Clínicos.

Figura 1 - Correlação entre IP e IG

59

Figura 2 - Correlação entre IP e PS

Figura 3 - Correlação entre IG e PS

A Tabela 3 apresenta o resultado da correlação dos Parâmetros Salivares entre si,

que mostra uma correlação positiva e estatisticamente significante (r = 0.50 e p =0.035)

somente entre as variáveis: pH e Uréia. As demais correlações não foram estatisticamente

significativas.

Tabela 3 - Correlação dos Parâmetros Salivares entre si.

60

Parâmetros Salivares Coeficiente de Correlação (r) p - value

pH vs Uréia 0.5 0.035

A Figura 4 mostra graficamente a correlação ente a variável pH e Uréia.

Figura 4 - Correlação positiva e estatisticamente significante entre pH e Uréia

Os resultados da correlação entre Parâmetros Clínicos versus Parâmetros Salivares

mostraram uma baixa correlação entre as variáveis, mas todas sem significância estatística

(p > 0.05).

A comparação das variáveis dos Parâmetros Salivares entre os grupos controle e

experimental foi realizada usando Análise Multivariada (Teste de Hotteling). A Tabela 4

apresenta as médias e os desvios padrão (DP) das variáveis dos grupos controle e

experimental. A análise mostrou haver diferença extremamente significante entre os grupos

(p < 0.0001).

61

Tabela 4 – Médias e desvios padrão das variáveis dos Parâmetros Salivares entre os grupos

controle e experimental

Parâmetros Salivares

FSE pH Proteína

Fosfatase

Alcalina Uréia

Média DP Média DP Média DP Média DP Média DP

Controle 2.88 1.07 6.91 0.18 618.09 17.52 10.63 1.48 52.67 7.27

Experim. 2.33 1.11 7.71 0.43 599.15 51.86 16.79 1.72 117.99 12.52

Teste Hotelling (F = 99.59 e p < 0.0001

62

ANEXO A – Cópia do protocolo da aprovação do projeto pelo Comitê de Ética e Pesquisa da Universidade de Taubaté – CEP/UNITAU

63

ANEXO B – Modelo das Fichas Clínica utilizada para obter os parâmetros clínicos

UNIVERSIDADE DE TAUBATÉ DEPARTAMENTO DE ODONTOLOGIA

PRONTUÁRIO DE PERIODONTIA

FICHA CLÍNICA PERIODONTAL RG:______________________________ NOME_____________________________________________________________________

NASCIMENTO ___/___/___ IDADE_________ SEXO_______RAÇA________________

ENDEREÇO________________________________________________________________ CIDADE_______________________CEP_________________ FONE__________________ PROFISSÃO__________________________________ESTADO CIVIL ________________ RG __________________________ CIC ___________________________________ ALUNO________________________________ ANO:_____________RA:__________________ INÍCIO DO TRATAMENTO___/___/ ___ TÉRMINO DO TRATAMENTO___/___/ ___

HISTÓRIA MÉDICA: Motivo da consulta ___________________________________________________________ Há quanto tempo foi a sua última consulta médica?__________________________________ Qual o motivo?_______________________Médico:_________________________________ No momento está fazendo algum tratamento médico?_________________________________

Está tomando algum medicamento? Sim Não

NOME DOSAGEM TEMPO DE USO

Tem sensibilidade a algum anestésico ou alergia a algum medicamento: __________________ Já esteve hospitalizado alguma vez?________ Motivo:________________________________ Teve hemorragia ? _____________________ Pressão arterial: _____________________ Você consome bebida alcóolica?____________ Com qual freqüência?___________________

64

Fuma?_____________ Quantidade. cigarros /dia:_____________ Ex.- fumante ?

_________

Tempo que fumou:____________________ A quanto tempo parou ? ___________________ Já fez uso de drogas injetáveis ou outras? _________________________________________ Está grávida? _______ Quantos meses?__________ Toma anticoncepcional? ____________

Sua gengiva sangra com facilidade? _________Sua gengiva parece inchar às vezes?

________

Seus dentes são moles? ____________ Os alimentos se prendem entre os dentes __________ Tem hábito de ranger os dentes ___________ Usa fio dental, fita ou palito? _____________ Quantas vezes ao dia você escova os dentes? _____ Qual o tipo de escova? _______________ ___________________________________________________________________________ Respira pela boca ? _______ Você já passou por um tratamento periodontal ? ________ Há quanto tempo?__________

Algum membro de sua família desenvolveu doença gengival

?__________________________

Já usou aparelho ortodôntico? ________ Fixo ( ) Móvel ( ) Por quanto tempo?_________

VOCÊ APRESENTOU ALGUM DOS SEGUINTES SINTOMAS ?

SIM NÃO SIM NÃO 1. Problema cardíaco: 23. Parentes Diabéticos 2. Angina 24. Problemas de tireóide 3. Pressão Alta 25. Problemas sangüíneos 4. Febre reumática 26. Artrite 5. Ataque cardíaco: 27. Transfusão sangüínea 6. Marca - passo cardíaco: 28. Hemofilia 7 Problema cardíaco congênito: 29. Problemas nervosos 8. Prolapso da válvula mitral 30. Epilepsia 9. Problema respiratório 31. Depressão 10 Tuberculose 32. Tratamento psiquiátrico 11. Asma 33. Problema de vista 12. Bronquite 34. Glaucoma 13. Enfisema Pulmonar 35. Problema nasal 14. Problemas Renais/ Diálise 36. Problema no ouvido 15. Problema Gastrointestinal 37. Dores de cabeça forte 16. Hepatite 38. Câncer 17. Anemia 39. Parentes com câncer 18. Úlcera 40. Quimioterapia 19. AIDS 41. Doença Venérea (Sífilis,

Gonorréia)

20. HIV Positivo 42. Uso de cortisona 21. Parentes ou próximos com AIDS

43. Herpes

22. Diabetes 44. Outros

65

Observações: ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________

SIM NÃO SIM NÃO

RADIOGRAFIAS MICROBIOLÓGICO FOTOS SANGUE Diagnóstico : ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ Plano de tratamento: ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ Técnica de escovação indicada: ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________

TRATAMENTO EXECUTADO DATA REGIÃO

PROCEDIMENTO OPERATÓRIO VISTO

66

AN –anestesia GV- gengivectomia AO- ajuste oclusal HB – higiene bucal AR – aplainamento radicular PF- preenchimento de ficha

BS- biopsia PROF- profilaxia

CONT- contenção provisória RD- raspagem dental DAB- drenagem de abcesso RX- radiografia EI- extração indicada SP- selamento provisório EX- exame clínico TFUR- tratamento de furca EXO- exodontia TGNA- tratamento de guna TPR- tratamento de periocoronarite Confirmo todas as informações acima citadas, e autorizo a utilização destas informações para um trabalho de pesquisa sobre doença periodontal.

__________________________________________ Assinatura do Paciente

67

SANGRAMENTO

FURCA

MOB

MG-FB

MG-JEC

PI

MG-FB

MG-JEC

PI

MG-FB

MG-JEC

PI

MG-FB

MG-JEC

PI

MOB

FURCA

SANGRAMENTO

69

ÍNDICE DE PLACA Silness – Löe (1964)

0= ausência de placa na área gengival. 1= presença de uma fina camada de placa da margem gengival. 2= moderado acúmulo de deposito moles na margem/ sulco gengival 3= abundante acúmulo de depósitos moles na margem/sulco gengival.

ÍNDICE GENGIVAL Löe- Silness (1963)

0= gengiva normal 1= inflamação branda – sem sangramento à sondagem. 2 = inflamação moderada com sangramento à sondagem 3= inflamação avançada, tendência ao sangramento espontâneo

ÍNDICE DE HIGIENE ORAL O’Leary (1974)

17 16 15 14 13 12 11 21 22 23 24 25 26 27 MédiaVestibularMesialLingualDistalMédia

47 46 45 44 43 42 41 31 32 33 34 35 36 37 MédiaVestibularMesialLingualDistalMédia

Maxila

Mandíbula

17 16 15 14 13 12 11 21 22 23 24 25 26 27 MédiaVestibularMesialLingualDistalMédia

47 46 45 44 43 42 41 31 32 33 34 35 36 37 MédiaVestibularMesialLingualDistalMédia

Maxila

Mandíbula

Data ___/___/___

____%

Data ___/___/___

____%

Data ___/___/___

____%

Data ___/___/___

____%

Data ___/___/___

____%

Data ___/___/___

____%

68

0

Autorizo cópia total ou parcial desta obra, apenas para fins de estudo e pesquisa,

sendo expressamente vedado qualquer tipo de reprodução para fins comerciais sem prévia

autorização específica do autor.

Arnaud Alves Bezerra Júnior

Taubaté, junho de 2006.

1

Júnior, Arnaud Alves Bezerra

Avaliação dos parâmetros salivares em pacientes portadores de doença periodontal / Arnaud Alves Bezerra - 2006.

68 f.: il.

Dissertação (Mestrado) – Universidade de Taubaté, Departamento de Odontologia, 2006.

Orientação: Prof. Dr. Celso Silva Queiroz

1. Doença periodontal. 2. Saliva. 3. Fosfatase alcalina. 4. UréiaI. I. Título.

Livros Grátis( http://www.livrosgratis.com.br )

Milhares de Livros para Download: Baixar livros de AdministraçãoBaixar livros de AgronomiaBaixar livros de ArquiteturaBaixar livros de ArtesBaixar livros de AstronomiaBaixar livros de Biologia GeralBaixar livros de Ciência da ComputaçãoBaixar livros de Ciência da InformaçãoBaixar livros de Ciência PolíticaBaixar livros de Ciências da SaúdeBaixar livros de ComunicaçãoBaixar livros do Conselho Nacional de Educação - CNEBaixar livros de Defesa civilBaixar livros de DireitoBaixar livros de Direitos humanosBaixar livros de EconomiaBaixar livros de Economia DomésticaBaixar livros de EducaçãoBaixar livros de Educação - TrânsitoBaixar livros de Educação FísicaBaixar livros de Engenharia AeroespacialBaixar livros de FarmáciaBaixar livros de FilosofiaBaixar livros de FísicaBaixar livros de GeociênciasBaixar livros de GeografiaBaixar livros de HistóriaBaixar livros de Línguas

Baixar livros de LiteraturaBaixar livros de Literatura de CordelBaixar livros de Literatura InfantilBaixar livros de MatemáticaBaixar livros de MedicinaBaixar livros de Medicina VeterináriaBaixar livros de Meio AmbienteBaixar livros de MeteorologiaBaixar Monografias e TCCBaixar livros MultidisciplinarBaixar livros de MúsicaBaixar livros de PsicologiaBaixar livros de QuímicaBaixar livros de Saúde ColetivaBaixar livros de Serviço SocialBaixar livros de SociologiaBaixar livros de TeologiaBaixar livros de TrabalhoBaixar livros de Turismo