Avaliação da resistência às drogas Avaliação da resistência às drogas tuberculostáticas no LACEN-PR em tuberculostáticas no LACEN-PR em

20082008

SESA/SVS/LACEN-PRSESA/SVS/LACEN-PR

Andressa SpradaAndressa Sprada

Maio de 2009Maio de 2009

DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DA TUBERCULOSE NO LACEN/PR:

-BACILOSCOPIA

*** Coloração de Ziehl-Neelsen

-CULTURA

*** Meio sólido: Lowenstein Jensen

*** Descontaminação : Método de Petroff

-CULTURA

• Se POSITIVO (Após 42 dias de incubação) → Desenvolvimento de BAAR

• Se for solicitada a identificação da espécie → Niacina / PNB / TCH / PCR (NaCL 5%, tween 80, telurito, nitrato, urease,...)

OBS.: NIACINA: Produzida por todas as micobactérias, mas apenas algumas espécies se detecta “in vitro” (M. tuberculosis, M. africanum, M. simiae, M. chelonae, M. marinum)

- CULTURA

• Se for solicitado o Teste de Sensibilidade:

1. A cultura deverá ser positiva;

2. A identificação é feita simultaneamente à realização do teste de sensibilidade.

-TESTE DE SENSIBILIDADE

*** Método utilizado: Método das proporções em LJ – teste indireto (Descrito em 1963 por Canetti, Rist e Grosset)

OBS.: Para assegurar a precisão do método utilizado é importante observar todas as etapas do processo com muito cuidado e atenção (cepa padrão H37RV)

*** Princípio: Detectar a proporção de bacilos resistentes contidos em uma amostra de M. tuberculosis frente a uma concentração da droga que é capaz de inibir o desenvolvimento das células sensíveis, mas não o das células resistentes (concentração crítica).

Para cada droga foi definida uma proporção de mutantes resistentes em uma população bacilar, igual ou acima da qual a amostra é considerada resistente (proporção crítica).

• Incubar à 36 1°C, 24-48 horas deitados e com tampa frouxa;• Incubar até 42 dias (28 dias).

-TESTE DE SENSIBILIDADE

DROGA CONC. CRÍTICA (µg/mL) PROPORÇÃO CRÍTICA (%)

Etionamida (ETH) 20 10

Isoniazida (INH) 0,2 1

Rifampicina (RFP) 40 1

Etambutol (EMB) 2 1

Estreptomicina (SM) 4 1

Pirazinamida (PZA) 100 10

- TESTE DE SENSIBILIDADE

-TESTE DE SENSIBILIDADE

*** Quando solicitar:

- Retratamento após falência bacteriológica ao esquema 1;

- Recidiva da doença;

- Reinício após abandono;

- Pacientes com suspeita de resistência primária;

- Contatos de um caso de tuberculose resistente;

- Vigilância epidemiológica.

OBS.: Definido em 2004 no II Congresso Brasileiro de tuberculose......Mas cada Estado pode acrescentar detalhes aos seus PECT

-MECANISMOS DE RESISTÊNCIA :

•Exclusivamente por mutações espontâneas – A mutação ocorre no gene que codifica a proteína para o alvo da droga, desta forma, é possível:

*** Inibir enzima que transforma a droga que é inativa em droga ativa contra o bacilo;

*** Diminuir o acúmulo da droga dentro da célula por dificultar sua entrada ou por acelerar sua remoção da célula.

OBS.: No caso de outras micobactérias (MNT) a maioria apresenta uma resistência natural a todas as drogas, provavelmente devido à estrutura da parede celular.

-DADOS ESTATÍSTICOS DE 2008

Material

92%

8%

Escarro Outros

*** Total de TS realizados → 214 testes

- DADOS ESTATÍSTICOS DE 2008

*** Do total de 214 testes:

Teste de sensibilidade a drogas tuberculostáticas

70%

22%

8%

Sensível Multirresistente Monorresistente

- MATERIAL:

*** Outros (LCR, LBA, Biopsia, Lavado gástrico) = 17 (8%)

14 → M. tuberculosis → Sensível a todos

1 → MAC (Complexo M. avium-intracellulare) → Resistente a RFP, INH, SM → LBA

1 → M. Kansasii → Resistente a INH, PZA, SM → LCR

1 → M. tuberculosis → Resistente a SM → Biopsia pleural

-Material:

*** Escarro = 197 (92%)

6 MAC → Resistente a todas as drogas testadas

191 M. tuberculosis :

136 → Sensível a todas

34 → Resistente a RFP, INH

3 → Resistente a EMB, INH, RFP

5 → Resistente a RFP

11 → Resistente a INH

1 → Resistente a RFP, INH, EMB, SM

1→ Resistente a ETH e PZA

- ENVIO DE ISOLADOS PARA CENTRO DE REFERÊNCIA:

*** Quando o paciente é conhecidamente infectado por um bacilo multirresistente;

*** Quando é uma micobactéria não tuberculosa resistente às drogas testadas no LACEN/PR

EX.: M. Kansasii (testar também amicacina, claritromicina, cipro...além da RFP, INH, EMB,...)

M. massiliense (testar claritromicina, amicacina,...)

OBRIGADA!!!!