CARVALHO, Daniel Cardoso; KALAPOTHAKIS,Evanguedes; GODINHO, Hugo (c);

GODINHO, Alexandre (c)

Departamento de Farmacologia e Departamento de ZoologiaICB-UFMG

Crescimento populacional

Maior demanda de energia elétrica

Construção de represas

Interrupção de vias migratórias

Figura I1: A figura mostra como ocorre o aumento (esquerda) ou diminuição (direita) nonúmero de repetições de microsatélites numa fita de DNA, durante a replicação atravésdo deslizamento da polimerase. (MOXON & WILLS, 1999)

Biblioteca Genômica

Isolamento dos clones

Hibridização

Sequenciamento

Sítio de corte da enzima utilizada deixando extremidades coesivas

Mapa do vetor utilizado

Escolha da enzima apropriada para a montagem da biblioteca

Corte do DNA total com Sau3A Divisão das frações da biblioteca

Técnica de transformação bacteriana utilizada (eletroporação)

Isolamento dos clones da biblioteca seguido de PCR ou mini-prep para a posterior aplicação na

membrana

Oligonucleotídeos utilizados como sonda: CA, TC, CTT,

ACGA, TA, GGA, AAAG,TATC

Hibridização com sondas radioativas

Equipamento de Sequenciamento automático utilizado:

ABI 310

Seqüência de um dos microsatélites encontrados Seqüência de outro dos microsatélites encontrados

PCR dos loci de microsatélite de cada indivíduo.

Gel de poliacrilamida dos produtos de PCR.

Montagem de tabela com nº e freqüência de MS.

Cálculo da heterozigosidade observada e esperada.

Definição da distância genética e fluxo gênico entre as populações.

Verificação da necessidade de construçãode mecanismos de transposição.

Árvore Genealógica