Micologia médica
• Laboratório Clínico• 4o ano Biomedicina
Classificação dos fungos
Classificação dos fungosAscomycotina (ascomicetos) – esporos sexuados = formação de um saco ou asco contendo os produtos da meiose, 4 ou 8 espsoros (ascoporos)
- esporos assexuados = conidios externos nas pontas das hifasEx. Trichophyton, Microsporum, Blastomyces
Basidiomycotina (basidiomicetos) – fusão sexuada = formação de organela em forma de clava, basidio,4 produtos da meiose (basiodiosporos)
- esporos assexuados = conidios externos nas pontas das hifasEx. Cryptococcus neoformans
Classificação dos fungosDeuteromycotina (fungos imperfeitos) – classe artificial incluídas todas as formas cujo processo sexuado ainda é desconhecido. Morfologia semelhante aos ascomicetosEx. Epidermophyton, Sporothrix, especies de candida
Zygomycotina (ficomicetos) – micélio não é septado - fusão sexuada resulta na formação de uma célula
quiescente e de parede espessa = zigosporo - esporos assexuados = produzidos em número indefinido
na estrutura esporangioEx. Rhizopus nigrans (apenas patógenos oportunistas)
EB FC D
Tipos de conídias
A
Crescimento e isolamento dos fungos
• ágar Sabouraud - cultivo, isolamento e identificação de fungos patogênicos e leveduras • crescimento fungos - altas concentrações de carboidratos
• inibidores de microflora acompanhante - ciclohexemida (500mg/L), penicilina (20.000UI/L), estreptomicina (40mg/L), cloranfenicol (40mg/L)
• detecção de leveduras - 40mg/L de neomicina e 20.000UI/L de penicilina
•isolar Candida albicans - Sabouraud com 4% de dextrose adicionado de cloreto de trifeniltetrazolio (TTC) (100mg/L)
• pH levemente ácido - inibe o desenvolvimento de algumas bactérias e de algumas espécies de fungos
• período de incubação - mínimo 3 dias a 25ºC
• ágar Sabouraud glicose - meio adequado para o isolamento dermatófitos
• Ágar Sabouraud com cloranfenicol - meio usado quando se deseja inibir o crescimento bacteriano e realizar a contagem de fungos.
Tipos de infecção Microrganismos causais DoençaSuperficial Malassezia furfur Pitiríase versicolor
Cutânea Trichophyton, epidermophyton e especies de Microsporum
Dermatofitose (pele, couro cabeludo unhas) Candidiase na pele, candidiase oral (sapinho) das mucosas
Subcutânea Sporothrix schenkii Esporotricose
Profunda (sistemica) Blastomyces dermatidis, Coccidioides immitis, Histoplasma capsulatum, Paracoccidioides brasiliensis
Blastomicose, coccicioidomicose, histoplasmose, paracoccicioidomicose
Oportunista sistemica
Aspergillus fumigatus e outras especies de Aspergillus, Candida albicans e outras especies, Cryptococcus neoformans e especies de Mucor e Rhizopus
Aspergilose, candidiase, criptococose, zigomicose
Principais infecções fúngicas e microrganismos causais
Micoses superficiais
Tinea versicolor = Pitiríase versicolor
Infecção superficial leve e comum – Malassezia furfur, fungo semelhante a levedura, membro da microbiota normal da pele
Afeta jovens na puberdade provavelmente está relacionada com mudanças hormanais e aumento da secreção sebácea. Crianças também são afetadas. Mulheres e homens são igualmente afetados
Temperaturas altas e humidade favorecem a ocorrência de pitiríase versicolor
Crescimento no interior da pele (estrato córneo) de cachos de células esféricas, brotamento parede espessa e de hifas curtas e curvas
Máculas múltiplas e escamas de aparecimento variável (hipopigmentada, hiperpigmentada, marrom escuro ou eritematosa) rodeadas por pele normal são lesões típicas de pitiríase versicolor
Extensão e severidade das lesões tende a ser pior em climas tropicais. Áreas afetadas: tórax, costas, abdome, pescoço e braço
Coloração PAS - pele
Cultura de Malassezia furfur agar Dixon's
Micoses superficiais
Tinea versicolor = Pitiríase versicolor
Diagnóstico – baseado dados clínicos. Forma rápida de confirmar o diagnóstico utilizar Wood's lamp = fluorescencia amarelo a amarelo-verde
Tratamento – sulfeto de selênio a 1%, ketoconazol, fluoconazol e itraconazol
Malassezia furfur requer cadeias longas de ácidos graxos (adicionar óleo de oliva ao meio). Levedura cresce em 3-7 dias a 30°-37°C. (colonias amarelo-marrom cremoso). Leveduras podem ser isoladas de cateteres contaminados
365 nm
Micoses superficiais
Tinea nigra = pitiríase nigra, ou tinea nigra palmares
Infecção superficial do estrato córneo – Exophiala werneckii, mais recentemente classificado como Hortaea werneckii.
Tinea nigra é rara. Mais frequente em climas tropicais. Adquirida pelo contato com vegetação, madeira e solo
Doença normalmente assintomática. Máculas castanho clara a negra. Mais comum no estrato córneo palmar ou plantar
Raspado superficial em 10% KOH apresenta hifas septadas e fragmentadas (1.5 a 5 µm de diametro). Células alongadas em brotamento ( 3 X 10 µm) em clusters.
Inocular espécimens clínicos no agar glicose sabouraud, incubar 30°C – 21 dias. Tolera 10% NaCl
Tratamento – uso tópico de antifúngicos. Agentes antifúngicos sistemicos, itraconazole tervinafine
Horteae werneckii hifa pele - KOH
Horteae werneckii Levedura - conidia
Micoses superficiaisPiedra
Fungo encontrado no solo clima tropical (piedra negra e branca) e água, vegetais, mamíferos e aves (piedra branca). Faz parte da flora normal da boca, pele e nariz (piedra branca)
Nódulos duros e negros (Piedra negra) em torno dos fios de cabelo por Piedraia hortae
Nódulos de consistência mais macia, de coloração branca a castanho clara (piedra branca) causado por Trichosporon beigelii formam-se nos pelos axilares, púbicos barba e nos cabelos
Colonias de Piedraia hortae tem crescimento lento, são pequenas e encurvadas, com cor marrom escuro a preto.
Colonias deTrichosporon colonies são leveduras-like, crescimento rápido,brancas ou amareladas. Produzem urease. Produzem pseudohifas e hifas em agar cornmeal tween 80 a 25°C após 72 h de incubação. A principal característica microscópica desse genero é a produção de artroconídia, que são unicelulares, cúbicas e alongadas em forma.
Terapia - raspagem de áreas afetadas e aplicação de ácido salicídico, formaldeído a 2% ou cremes azois. Terapia oral com ketoconazol ou terbinafine tb tem sido utilizada. Recidivas são frequentes, mesmo após terapia adequada.
Piedraia hortae
Trishosporon beigelii
Micoses cutâneas
Fungos que invadem apenas o tecido queratinizado superficial - pele, cabelos e unhas
Fungos dermatófitos classsificados em tres generos: Epidermophyton, Microsporum e TrichophytonReino: FungiFilo: AscomycotaClasse: EuascomycetesOrdem: OnygenalesFamilia: Arthrodermataceae
Espécies só encontradas no solo, outras podem provocar doenças nos seres humanos (parasitismo completo)
Formam colonias agar sabouraud a temperatura ambiente. Formam conidios na cultura em lamina
Trichophyton
Genero: Trichophyton (teleomorph: Arthroderma)
Dermatófito que habita o solo, homens e animais. É um dos fungos que causam infecções humanas do cabelo, pele e unha. Apresentam formas teleomórficas e essas formas classificam o genero em Artroderma
Fungo filamentoso com habilidade de invadir tecidos queratinosos. Fatores de virulencia = enzimas como proteinases, elastase e queratinase
Trichophyton rubrum é o principal agente causador da dermotofitose no mundo. Espécies de Trichophyton podem causar infecções invasivas em hospedeiros imunocomprometidos
Colonias de Trichophyton crescem lentamente a moderado. Coloração branca a amarelo brilhante
Hifas septadas onde observa-se conidiosporos (pouco diferenciado das hifas), microconidia (microaleuriconidia – predominante, forma piriforme produzidas em grandes quantidades - solitarias ou arranjadas em clusters), macroconidias (macroaleuriconidia – muticelular, cilindrica, macia, forma de charuto, produzidas em pequenas quantidades - solitarias ou arranjadas em clusters)
Tratamento : terbinafine, ketoconazol, clotrimazol, itraconazol, naftifine e amorolfine, derivados de azois
Micoses cutâneas
T. mentagrophytes
T. rubrum
Micoses cutâneasMicrosporum
Genero: MicrosporumDermatófito filamentoso queratinofilico. Seu habitat natural é o solo (espécies geofílicas), outros afetam animais (zoofílicas) ou humanos (antropofílicas).
Composto de 17 espécies, detnre elas: M audouinii, M gallinae, M. Ferrugineum, M distortum, M nanum, M canis, M gypseum, M cookei, M vanbreuseghemii
Microsporum é um dos generos que causam a dermatofitose = infecção do cabelo, pele e unha. Tem a habilidade de degradar a queratina e então pode residir na pele e seus arredores e permanecer não invasivo. A maioria dos Microsporum spp. infectam a pele, exceto Microsporum persicolor .
A patogenese da infecção depende do reservatório natural das espécies.
Colonias de Microsporum são cotonosas. O crescimento no agar sabouraud dextrose a 25°C pode ser lento ou rápido e o diametro das colonias variam entre 1 a 9 cm após 7 dias de incubação. A cor da colonia varia dependendo da espécie, de branco para beje ou amarelo para rosa.
Teste da perfuração do cabelo, habilidade em crescer em grãos de arroz a 37°C ajuda na diferenciação de uma espécie de Microsporum spp. da outra
Microsporum spp. produz hifas septadas, microaleurioconidia (solitárias, unicelular, oval de parede fina), e macroaleurioconidia (fusiforme, multicelular)
Tratamento : terbinafine, itraconazol
Microsporum gypseum macroconidia e microconidia
Microsporum canis
Cultura de M. audouinii agar sabouraud dextrose
M. ferrugineum no agar micobiotico
Micoses cutâneasEpidermophyton
Genero: Epidermophyton Epidermophyton é um fungo filamentoso dermatófito. Distribuído no mundo e o homem é o principal hospedeiro de Epidermophyton floccosum, a única espécie patogênica.
E. floccosum é o um dos mais comuns causadores da dermatofitose em indivíduos normais. Infecta pele (tinea corporis, tinea cruris, tinea pedis) e unhas (onychomycosis). Infecção é restrita a camadas cornificadas de células mortas da epiderme. Esse fungo não tem a habilidade de penetrar em tecidos viaveis de hospedeiros imunocompetentes.
Colonias de E. floccosum crescem rapidamente e maturam em 10 dias. Após incubação a 25 °C no agar batata-dextrose, as colonias são amarelas amarronzadas a cinza
Hifas septadas, macroconidia, e ocasionalmente clamidoconidias são visualizadas. Ausencia de microconídias e as macroconídias são de parede fina, em forma de clave com pontas arredondadas.
Epidermophyton floccosum é diferenciado do Microsporum eTrichophyton pela ausencia de microconidia
Tratamento: terbinafine, itraconazol, voriconazol e ketoconazol
Onychomycosis devido a Epidermophyton floccosum
Epidermophyton floccosum
Doença cutânea
Localização das lesões
Aspecto clínico Fungos mais frequentes responsáveis
Tinea corporis (tinha)
Pele lisa e glabra Placas circulares com bordas vesiculares e vermelhas que avaçam e descamação central
Microsporum canis, Trichophyton mentagrophytes
Tinea pedis (pé de atleta)
Espaços interdigitais nos pes (sapatos)
Aguda – pruriginosa, vesicular avermelhadacronica – pruriginosa, escamação fissura
Trichophyton rubrum, T. mentagrophytes, Epidermophyton floccosum
Tinea cruris (prurido de jóquei)
Virilha Lesão eritematosa descamativa na região intertriginosa, pruriginosa
T. rubrum, T. mentagrophytes, E floccosum
Tinea capitis Couro cabeludo Placas circulares de calvicie com pontas de cabelo no interior de folículos profundos
M. canis, Trichophyton tonsurans
Tinea barbae Pelos da barba Lesão edematosa e eritomatosa T. rubrum, T. mentagrophytes
Tinea unguium (onicomicose)
Unhas Unhas espessadas ou com fragmentação distalmente, despigmentadas sem brilho
T. rubrum, T. mentagrophytes, E. floccosum
Dermatofitides Faces laterais e flexora dos dedos das mãos. Palma das mãos
Lesões visuculares bolhosas, pruriginosas
Ausencia de fungos na lesão, pode torna-se infectada por bacterias
Manifestações clínicas das dermatofitoses
tinea capitis - Trichophyton tonsuransEpidermophyton floccosum – antes e após tratamento
tinea corporis - Epidermophyton or Trichophyton
tinea cruris - Epidermophyton floccosum.
Infecções cutaneas
onychomycosis - Epidermophyton ou Trichophyton destruindo as unhas
Infecção por Trichophyton sp
Infecções cutaneas
Micoses cutâneas
Diagnóstico Laboratorial
Amostras – raspados da pele e das unhas, pelos arrancados de áreas afetadasPelos infectados por Microsporum emitem fluorescencia sob a lampada de Wood
Exame microscópico – amostras são colocadas na lâmina com uma gota de hidróxido de potássio 10-20%, cobertas com lamínulas e examinadasPele e unha – observam-se hifas ramificadas ou cadeias de artrosporos
Pêlos – Microsporum formam bainhas de esporos num padrão de mosaico ao redor do folículo piloso
Cultura – identificação de todos os dermatófitos baseia-se em culturas. Inocular em ágar inclinado de sabouraud com cicloexamida e cloranfenicol (incubar 1-3 semans a t.a.) e examinadas em culturas de laminas.
Determinação da especie baseia-se na morfologia das colonias, exame microscopico e alguns casos testes bioquímicos
Tratamento
Couro cabeludo – cabelos são arrancados manualmente, cortados ou raspados. Griseofulvina (1-2 semanas). Shampoos e creme de miconazolInfecções do corpo – creme de miconazol, creme de ácido undecilênico, ácido salicílico ou benzóicoInfecções dos pés – permanganato de potássio (forma aguda) antifúngicos cremes (fase crônica)
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