Norgcstomct para resincronizar o estl'o em bovinos(NorgeslolllCtj(lr eslms res\'IIclirolliz,alioll ill c((llle)

'.Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária - EMBRAPACentro de Pesquisa de Pecuária elo Sudeste - CPPSECaixa Postéll 339. CEP 13560-970. São Carfos. SP.

? University 01 IlIinoislDept. 01 Animal Sciences.106 ASL. 61801. Urbana. IL. EUA.

Um experimento foi conduzido visando avaliara eficácia de implantes de silicone, contendodiferentes quantidades de norgestomet, pararesincronizar o estro em vacas de corte previamenteinseminadas e não-prenhes. Cinqüenta e nove vacasde corte no pós-parto foram sincronizadas pelométodo Syncro-Mate B", o qual consistiu de umainjeção de 3mg de norgestomet e 5mg de valerato deestradiol associada a inserção subcutânea de umimplante com 6mg de norgestomet na orelha. Oimplante permaneceu "in situ" por nove dias e asvacas foram artificialmente inseminadas 48 horasapós a retirada dos implantes. Um implante adicionalcom 6mg ou com 8mg de norgestomet foi inserido,respectivamente em 29 e em 30 vacas no ~. dia apósa inseminação. Estes implantes foram removidos 16dias depois. Uma segunda inseminação artificial foirealizada, após a remoção do segundo implante,apenas em vacas cuja concentração sérica deprogesterona era <1,5ng/ml quando da retirada dosegundo implante (n=35). A taxa cumulativa deparição foi de 57, 1%. A taxa de parição à segundainseminação não foi superior (P>0,05) à da primeirainseminação artificial. Uma carga maior denorgestomet (8mg) suprimiu o estro, com eficácia,por 16 dias e tendeu a proporcionar uma taxa deparição maior (55,6%; P>O,05) daquela para vacastratadas com implantes de 6mg de norgestomet(41,2%). Tal diferença deve-se ao aparecimento deestro (17,6%), enquanto os implantes aindapermaneciam in situ, nas fêmeas tratadas comcápsulas de 6mg. O uso de implantes de silicone comnorgestomet tornou possfvel procederem-se duasinseminações artificiais em ocasiões distintas sem anecessidade da observação contInua do estro. Onúmero de bezerros nascidos pela inseminaçãoartificial excedeu a 50% e as inseminações haviamtomado lugar dentro dos primeiros 23 dias da estaçãode ácasalamento.

PALAVRAS-CHAVE: Bovino, sincronização do estro,norgestomet.

An investigation was conducted aiming to evaluate ifsilicone implants impregnated with different amountsof norgestomet were efficacious to resynchronize thereturn to estrus in cows previously synchronizedinseminated but non-pregnant. Fifty-nine postpartumbeef cows were synchronized by means of Syncro-Mate B program which consisted of an injection of3mg of norgetomet and 5mg of estradiol valerateassociated to the subcutaneous insertion of a 6mgnorgetomet implant in the ear. The implant remained"in situ" for nine days and cows were artificial/yinseminated 48 hours after implant remo vai. Anadditional 6mg or 8mg norgestomet implant was givenrespectively to 29 and 30 cows five days after service.These implants were withdrawn 16 days !ater and asecond artificial insemination was performed 48 hoursafter implant removal only in cows with low serumprogesterone (<1,5ng/ml) at implant removal (n=35).Overal/ cumulative calving rate was 57.1%. A greaterload of norgestomet (8mg) effectively suppressedestrus for 16 days and tended to promote a higher(P>.05) calving rate (55.5%) than that observed forcows reimplanted with 6mg capsules (41.2%). Thisdifference was the result of breakthrough estrus(17.6%) seen in the 6mg norgestomet implantfemales. The use of norgestomet silicone imp/ants inresynchronization protocols made it possible toartificial/y inseminate on different occasions withoutthe need of estrus detection. The calves bom toartificial insemination exceeded 50%.

KEY WüRDS:norgestomet.

A sincronização do estro facilita o uso detouros geneticamente superiores através dainseminação arificial e pode aumentar a performancereprodutiva por permitir estações de acasalamento ede nascimento mais concentradas (Odde, 1990). Ainseminação artificial em horário pré-determinado éempregada após a sincronização do estro parareduzirem-se o tempo, a mão-de~obra e o manejodispendidos com a detecção do estro. Entretanto, astaxas de concepção após tal programa são variáveis e

frequentemente baixas. Além disso, a fertilidade aoprimeiro estro pós-parto é inferior à dos subsequentes(Pleasants & Barton, 1992) devido a fase lúteaanormal (Garverick & Smith, 1986) e perdasembrionárias (Niswender & Nett, 1988; Van Cleef etaI., 1991). Deste modo, os genótipos superiores,oriundos de touros provados, usualmente atingemmenos da metade dos bovinos de corte que sãosubmetidos à sincronização do estro e inseminaçãoartificial por apenas uma oportunidade na estação deacasalamento. Assim, a disseminação de genes deinteresse e o seu impacto sobre o mérito genético deuma determinada população estão limitados.

Uma segunda oportunidade para efetuar-se ainseminação artificial em horário pré-estabelecidopoderia contornar as limitações acima mencionadas.Em verdade, um protocolo sincronizador, baseadoem dois tratamentos repetidos de oito dias de duraçãocom norgestomet, aumentou a taxa de prenhez emnovilhas anestrais. dentro de uma estação deacasalamento com 24 dias (Ghallab et aI.. 1984). VanCleeff et aI. (1991) verificaram que a resincronizaçãodo estro através da colocação de um dispositivo intra-vaginal de liberação de progesterona (PRID) no 17°'dia e mantido até o 22°' após o serviço, promoveuuma concentração de estros e melhorou as taxas deconcepção, tanto da inseminação prévia como dasubsequente. Em adição, tratamentos comdiferentes quantidades de norgestomet. aplicados no9°' ou no 11 o. dia e permanecendo até o 21 o. dia apóso serviço inicial aumentaram o taxa de parição denovilhas de corte e sincronizaram eficientemente oretorno ao estro das fêmeas não-prenhes tratadas(Favero et aI., 1993). Assim, comprovou-se que aadministração do norgestomet no meado da faselútea do ciclo estral não teve efeitos detrimentaissobre a fertilidade do estro anterior e nem do estrosubsequente. Além disso. o aparecimento do estrosubsequente ocorreu de maneira mais concentrada(Favero et aI.. 1993).. A eficiência dos implantes de norgestomet nasupressão do estro depende de inúmeros fatores.incluindo a quantidade do esteróide impregnado(Favero, 1992) e o período de tempo in situ (King etaI., 1988; Coy & Garcia-Winder, 1991; Favero et aI..1993). O presente estudo objetivou comparar osefeitos da quantidade de norgestomet em implantesmanufaturados à base de silicone, os quais foraminseridos cinco dias após uma inseminação ....artificial emantidos in situ por 16 dias. sobre a fertilidade à umasegunda inseminação em vacas de corte no pós-parto.

Cinqüenta e nove vacas da raça Angus oumestiças de Angus. com 57,4±15.2 dias pós-parto.foram mantidas numa fazenda da University of IIlinoisem Urbana-Champaign, Estado de IIlinois - EUA.

durante a estação de inverno da reglao. As vacasforam sincronizadas pelo método Syncro-Mate B. queconsistiu da aplicação subcutânea na orelha. de umimplante com 6mg de norgestomet ('17aacetoxi-11 pmetil-19nor-preg 4ene.3.20,diona). o qual foi removidonove dias depois. Simultaneamente à colocação doimplante foi administrada uma injeção oleosa.composta da associação entre 3mg de norgestomet e5mg de valerato de estradiol. As vacas foraminseminadas drtificialmente 48 horas após, a remoçãodos implantes. Um segundo cilindro, manufaturadocom poli-dimetil siloxane (silicone), contendo 6mg ou8mg de norgestomet, foi implantado, respectivamente,em 29 e 30 vacas no 5 o. dia após a inseminaçãoinicial. Estes implantes foram removidos 16 diasdepois da sua inserção. Quarenta e oito horas apósa retirada do implante, efetuou-se uma segundainseminação artificial, apenas nas vacas que, nomomento da remoção do implante apresentavambaixa concentração sérica de progesterona«1,5ng/ml). a qual foi dosada por um ELlSA.devidamente validado (Kesler et aI., 1990). Asconcentrações de progesterona ~1,5ng/ml foramconsideradas como indicativas de prenhez ao primeiroserviço (Favero et aI., 1993). Com base nos valoresreais de P4 e de parição. uma simulação foiprocedida. onde estudou-se, hipoteticamente, o efeitoda elevação do valor discriminatório sobre inúmerosparâmetros relacionados ao diagnóstico da prenhezem bovinos.

A manifestação do estro foi monitorada pordois machos deferentectomizados, desde a colocaçãodo primeiro implante, até a remoção do segundo.

A taxa de parição relativa ao segundo serviçofoi calculada através dos partos alocados sobre ointervalo 283±11 dias desde a data da segundainseminação artificial. O teste do Qui-quadrado foiempregado para determinar as diferenças nas taxasde parição entre os tratamentos. A análise decovariância foi realizada usando modelo linear ondeos efeitos principais examinados foram estádio dociclo estral ao primeiro tratamento (verificado atravésde dosagens de progesterona realizadasestrategicamente aos dias -11, O e +5 do início doexperimento). nível de progesterona à primeiraimplantação e o tipo de implante na segundaimplantação. A covariável usada foi o número de diaspós-parto ao ínicio do tratamento. Interações tambémforam analisadas (Steel & Torrie, 1980). O teste t deStudent foi utilizado para comparar as médias daconcentração sérica de progesterona entrediagnósticos de prenhez, corretos e incorretos. Todasas análises foram processadas pelo programa SAS(SAS...• 1985).

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Durante o curso do experimento, duas vacasperderam o segundo implante e uma outra não

vVllltJUlvvvU ,..,\.A, •....•.•..• _ _-- - r ,

Assim, para computar-se a taxa de parição, o númerode vacas por grupo tornou-se: 28 para o implantecom 6mg e 28 para o implante de 8mg.

A remoção do segundo implante, 35 vacastinham baixa concentração sérica de progesterona.Deste modo, 17 e 18 vacas respectivamente dosgrupos 6mg e 8mg foram reinseminadas. A Tab. 1mostra as taxas de parição obtidas após cadaprocedimento sincronizador, bem como a combinaçãodos resultados.

A taxa de parição à segunda inseminaçãonão diferiu (P>O,05) da taxa da primeira inseminação(48,6% vs. 26,8%). Tal resultado permite inferir que,aparentemente não houve aumento significativo defertilidade ao primeiro serviço devido à suplementaçãoprogestogênica, a qual havia sido iniciada na faselútea do ciclo estral. Esta suposição encontra suportenos achados de Favero (1992), onde nenhum efeitodo norgestomet, dado no meado da fase lútea eremovido 21 dias após o serviço prévio, foi observadosobre a taxa de parição da primeira inseminaçãoartificial. Analogamente, a suplementaçãoprogesterônica, administrada como PRIO não haviaaumentado a taxa de concepção à um serviço prévio(Stevenson & Mee, 1991; Van Cleeff et aI., 1991).

A suplementação com progesterona ouprogestágenos tem sido empregada para reforçar afunção lútea e deste modo, assegurar a sobrevivênciaembrionária nos primeiros estádios dodesenvolvimento zigótico (Niswender & Nett, 1988).Esta hipótese foi amparada pela maior taxa deprenhez de receptoras de embriões que foraminovuladas no 7°' dia do ciclo estral (Broadbent et aI.,1992). No presente estudo, a decisão em iniciar-se aterapia progestôgenica no 5°' dia do ciclo estralbaseou-se nos achados de Garverick & Smith (1986),objetivando afetar um estádio no qual, mesmo oscorpos lúteos fadados à regredirem precocemente,que ainda estavam em luteinização progressiva, ouseja ainda não haviam iniciado a regressão.Entretanto, Butcher et aI. (1992) concluiram que 25mgde norgestomet ou 100mg de progesterona dados até35 dias pós-inseminação foram insuficientes para amanutenção da prenhez de receptoras, após aprimeira ovulação pós-parto em vacas com faseslúteas curtas ou normais. Foi também observado queo norgestomet impediu a ovulação, suprimiu o estromas o crescimento folicular e a secreção de estradiolainda permaneceram ocorrendo. Assim, é provavelque a disfunção luteal não é a única causa de baixafertilidade ao primeiro estro pós-parto. Além disso,mortalidade embrionária tão baixa quanto 3,5% emvacas de corte no pós-parto, foi relatada por Blasco &Revilla (1992). Isto significa que, a população alvopara a ação benéfica da terapia progestacional pós-acasalamento pode representar apenas uma pequenafração do rebanho e o eventual incremento na taxa de

se computado sobre o plantei como 'um todo. .A proporção de vacas prenhes ao segundo

serviço foi maior (17/35), apes~r .de nã.o-si~nifi~ativaestatisticamente, comparado a Insemlnaçao inicial(15/56). A proporção de vacas cíclicas expostas a~segundo serviço foi maior, uma vez que as vacas Jaestariam, em média, no 91,5±12,O dias pós-parto àsegunda inseminação, comparados aos 68,4±15,2dias na inseminação inicial. Protocolos empregando acombinação norgestometlvalerato de estradiol têmsido capazes de induzir a atividade ovariana em vacasanestrais (Hixon et aI., 1981). Entretanto, as taxas deparição de vacas cíclicas tendem a ser superiores àstaxas para vacas em anestro, após a indução daatividade ovariana, e o grau de ciclicidade érelacionado diretamente com dias pós-parto(Machado, 1994).

Nenhum efeito detrimental sobre a taxa deprenhez após a remoção dos implantes no 16° diadesde a inserção foi observado. Broadbent et aI.(1992) tiveram conclusão semelhante após usarimplantes com 3mg de norgestomet desde o dia seteaté o 19°' dia em receptoras de embrião.Similarmente, Favero et aI. (1993) verificaram que umtratamento com norgestomet de nove a doze diasdurante um estádio específico do ciclo estral nãodiminui a fertilidade do estro detectado. Este conjuntode conclusões similares esta ancorado pelos achadosde Coy & Garcia-Winder (1991) que verificaram queum implante com 6mg de norgestomet mantido entrenove e 18 dias in situ não alterou a duração da faselutea e os ovários mostraram responder àgonadotrofinas com a formação de tecido lutealnormal, idêntico àquele observado. durante o cicloestral natural da vaca.

A taxa de parição cumulativa obtida nesteestudo foi inferior àquelas relatadas em estudosprévios para vacas e novilhas de corte, as quaisatingiram, respectivamente, 69% e 73% (Favero,1992).

As taxas de parição obtidas, consoante osegundo implante utilizado estão sumariadas na Tab.2. Os implantes carregados com 8mg tenderam(P>O,05) a aumentar a fertilidade à segundainseminação artificial. Por outro lado, houve aocorrência de estro, durante a permanência in situ doimplante, nas vacas que receberam cápsulas com6mg (3/17=17,6%) e nenhuma delas concebeu após asegunda inseminação artificial. Portanto, a supressãomarginal do estro, conferida pela pequena carga denorgestomet (6mg), levou a uma redução (P>O,05) nataxa de parição ao segundo serviço. Assincronía entreinseminação e eventual ovulação pode estarimplicada na obtenção de tal resultado. Corroboraesta hipótese o fato em que, o estro nas fêmeas não-prenhes e submetidas a suplementaçãoprogestogênica tem sido consistentemente mostradoser apresentado numa forma muito concentrada (Van

consonância com relatos prévios (Domatob, 1993).Neste caso, a dosagem sérica de progesterona emvacas sincronizadas pode representar um discrimina-dor entre corpo lúteo espurium e verum. Como re-

sultado, a acuraClct uct ulJlerminação de prenhez, en Ivacas sob suplementação progestogênica, peladosagem sérica de progesterona pode ser aumentadacom o uso de valores discriminatórios mais elevados.

Tabela 3 - Acurácia 1 da análise de progesterona sé rica para a determinação do número de vacas a seremreinseminadas após a sincronização do estro com Syncro-Mate B e submetidas à resincronização com implantede norgestomet.Concentração sé ricade progesterona N Acurácia

vacas paridas n/N %~ 1,5 ng/ml 21 15 15/21 71,4< 1,5 ng/ml 35 O 0/35 100,0Geral 56 50/56 89,31. R81açãoentre o número de diagnósticos corretos e o número total de diagnósticos realizados.

Tabela 4 - Efeito dos aumentos hipotéticos da concentração sérica de progesteronadiscriminatória para a determinação da prenhez em vacas após sincronização do estro.

Concentraçãodiscriminatória(ng/ml) 1

79,1 87,9 68,281,4 89,3 71,483,7 91,4 75,088,4 91,4 75,088,4 91,4 75,088,4 91,4 78,990,7 93,1 83,3

Não há dados desde 4,5 ng/ml até 7,0 ng/ml7,5 86,7 93,0 91,4 81,2 95,38,0 66,7 93,0 87,9 78,6 91,1

1. As fêmeas com concentrações séricas de progesterona ([P4J) menores do que este nível eram consideradas não-prenhes e aquelas cuja concentração era igualou superior ao valor discriminatório eram tidas como prenhes.2. Número de fêmeas prenhes tendo [P4]> valor discriminatório dividido pelo número total de fêmeas prenhes x100.3. Número de fêmeas não-prenhes tendo [P4]< valor discriminatório divido pelo número total de fêmeas não-prenhes x100.4. A proporção de todos os resultados, de fêmeas prenhe e não-prenhes,os quais estavam corretos x100.5. Número de fêmeas prenhes dividido pelo número de fêmeas com [P4]> valor discriminatório (1- falso positivos) x100.6. A proporção de fêmeas indicadas como não-prenhes, as quais eram não-prenhes (1- falso positivos) x100.

1,01,52,02,53,03,54,0

100,0100,0100,0100,0100,0100,0100.0

A Tab.4 mostra o hipotético aumento no valordiscriminatório e o efeito deste, sobre inúmerosparâmetros relacionados ao diagnóstico da prenhezem bovinos. Verifica-se que, ao se aumentar osvalores discriminatórios até 4,Ong/ml, aespecificidade; a acurácia; e o valor preditivo positivotambém aumentam. Nesta situação, ocorre reduçãono número de diagnósticos falso-positivos e não háaumento no número de falso-negativos. Incrementosnestes parâmetros afetam o número de vacasdestinadas à reiseminação após a remoção dosegundo implante e consequetemente aumenta-se aprobabilidade de se obter uma taxa de pariçãoacumulada maior após as duas inseminaçõesartificiais

NegativoS100,0100,0100,0100,0100,0100,0100,0

o uso dos implantes com norgestometinseridos cinco dias após uma inseminação Iléln

trouxe efeitos negativos sobre as inseminações iJrevié:le subsequente.

O implante com 8mg de norgestomet suprimiueficientemente o estro por 16 dias e tendeu aaumentar a fertilidade à segunda inseminaçãoartificial.

A acurácia do diagnóstico de prenhez relativoà primeira inseminação pode ser aumentada pelo usode valores discriminatórios da progesteroneimia maiselevados, ou seja, superiores a 1,5ng/ml.

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