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EFEITO DA COLETA, PROCESSAMENTO E ARMAZENAMENTO DE SANGUE SOBRE A ATIVIDADE DA ENZIMA LISOSSÔMICA BETA-GALACTOSIDASE, EM LEUCÓCITOS E PAPEL FILTRO Morgana Santos SOARES (Bolsista PIBIC/CNPq) – [email protected] Curso Biomedicina, Laboratório de Erros Inatos do Metabolismo, Instituto de Ciências Biológicas – UFPA. Prof. Dr. Luiz Carlos SANTANA da Silva (Orientador) – [email protected] Curso Biomedicina, Laboratório de Erros Inatos do Metabolismo, Instituto de Ciências Biológicas – UFPA. Os Erros Inatos do Metabolismo (EIM) são doenças metabólicas hereditárias, causadas pela deficiência de uma ou mais enzimas ou do defeito em uma proteína de transporte. Podem ser divididos em dois grandes grupos: os de pequenas moléculas e os de moléculas complexas (Doenças de Depósito Lisossômico - DDL). O diagnóstico das DDL é feito geralmente em centros de referência por causa da baixa frequência individual destes transtornos e por causa da complexidade das técnicas laboratoriais envolvidas. Quando amostras de sangue não são processadas logo após a coleta, podem ocorrer alterações nos parâmetros. Assim, foi proposto como objetivo do trabalho, avaliar o efeito dos diferentes procedimentos laboratoriais envolvidos na coleta, processamento e armazenamento de amostras biológicas sobre a atividade enzimática da enzima lisossomal beta- galactosidase, bem como avaliar o efeito de dois anticoagulantes e ainda avaliar a atividade das amostras em sangue impregnado em papel filtro. Tendo como materiais e métodos: a caracterização da amostra – em que foram utilizados 20 mL de sangue periférico de 20 indivíduos voluntários, homens e mulheres, com faixa etária entre 19 e 40 anos e divididos em cinco grupos - amostras processadas após a coleta, armazenadas por 24 horas, por 48 horas, 72 horas e 96 horas, sendo dividias e armazenadas a temperatura de 25ºC e 4ºC. Os resultados mostraram que não houve alterações significativas entre os tipos de anticoagulantes utilizados (heparina e EDTA), bem como no tempo de processamento e armazenamento das amostras, sendo que as amostras armazenadas durante 72 horas, apenas as que ficaram armazenadas a temperatura de 4ºC apresentaram atividade enzimática, já as armazenadas a 96 horas não apresentaram atividade. As amostras de sangue impregnado em papel filtro tiveram valores de atividades muito baixos, sendo preciso mais tempo para a análise. Sendo assim, necessários que esta pesquisa seja continuada para melhores resultados bem como melhor desenvolvimento da mesma. Palavras chave: Doenças de depósito lisossômico, Enzimas lisossomais, Beta-galactosidase Titulo do projeto do orientador: Avaliação Epidemiológica, Genética, Molecular e Bioquímica de Pacientes com Mucopolissacaridoses na Região Norte do Brasil. Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento no CNPq Grande-área: Ciências Biológicas Área: Genética Humana Sub-área: Genética Médica
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EFEITO DA COLETA, PROCESSAMENTO E ARMAZENAMENTO DE SANGUE SOBRE A
ATIVIDADE DA ENZIMA LISOSSÔMICA BETA-GALACTOSIDASE, EM LEUCÓCITOS E PAPEL FILTRO
Morgana Santos SOARES (Bolsista PIBIC/CNPq) – [email protected] Curso Biomedicina, Laboratório de Erros Inatos do Metabolismo, Instituto de Ciências Biológicas – UFPA.
Prof. Dr. Luiz Carlos SANTANA da Silva (Orientador) – [email protected] Curso Biomedicina, Laboratório de Erros Inatos do Metabolismo, Instituto de Ciências Biológicas – UFPA.
Os Erros Inatos do Metabolismo (EIM) são doenças metabólicas hereditárias, causadas pela deficiência de uma ou mais enzimas ou do defeito em uma proteína de transporte. Podem ser
divididos em dois grandes grupos: os de pequenas moléculas e os de moléculas complexas (Doenças de Depósito Lisossômico - DDL). O diagnóstico das DDL é feito geralmente em centros de referência por causa da baixa frequência individual destes transtornos e por causa da complexidade das
técnicas laboratoriais envolvidas. Quando amostras de sangue não são processadas logo após a coleta, podem ocorrer alterações nos parâmetros. Assim, foi proposto como objetivo do trabalho, avaliar o efeito dos diferentes procedimentos laboratoriais envolvidos na coleta, processamento e
armazenamento de amostras biológicas sobre a atividade enzimática da enzima lisossomal beta-galactosidase, bem como avaliar o efeito de dois anticoagulantes e ainda avaliar a atividade das amostras em sangue impregnado em papel filtro. Tendo como materiais e métodos: a caracterização
da amostra – em que foram utilizados 20 mL de sangue periférico de 20 indivíduos voluntários, homens e mulheres, com faixa etária entre 19 e 40 anos e divididos em cinco grupos - amostras processadas após a coleta, armazenadas por 24 horas, por 48 horas, 72 horas e 96 horas, sendo
dividias e armazenadas a temperatura de 25ºC e 4ºC. Os resultados mostraram que não houve alterações significativas entre os tipos de anticoagulantes utilizados (heparina e EDTA), bem como no tempo de processamento e armazenamento das amostras, sendo que as amostras armazenadas
durante 72 horas, apenas as que ficaram armazenadas a temperatura de 4ºC apresentaram atividade enzimática, já as armazenadas a 96 horas não apresentaram atividade. As amostras de sangue impregnado em papel filtro tiveram valores de atividades muito baixos, sendo preciso mais tempo
para a análise. Sendo assim, necessários que esta pesquisa seja continuada para melhores resultados bem como melhor desenvolvimento da mesma.
Palavras chave: Doenças de depósito lisossômico, Enzimas lisossomais, Beta -galactosidase Titulo do projeto do orientador: Avaliação Epidemiológica, Genética, Molecular e Bioquímica de
Pacientes com Mucopolissacaridoses na Região Norte do Brasil. Classificação do trabalho na Tabela de Áreas do Conhecimento no CNPq
Grande-área: Ciências Biológicas Área: Genética Humana Sub-área: Genética Médica
