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Fotometria

Karin A. Riske

kariske@unifesp.br

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Fotometria

estudo da difuso

experimento: determinao da concentrao de uma substnciaa partir de sua absoro de luz (fotometria ou colorometria)

- o que luz (radiao eletromagntica) ?

- absoro de luz

- fotometria

- medidas e erros

muito utilizada em anlises clnicas

ferramenta para: - caracterizao desubstncias

- determinao de concentrao

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radiao eletromagntica

variao dos campos eltrico e magntico

variao de variao de variao de ...

no depende de um meio material para se propagar

velocidade, comprimento de onda (frequncia), energia

c

E = henergia de 1 fton

O que luz?

energia depende s de

e no da amplitude

= hc /

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O que luz?

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O que luz?

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Absoro de luz tomos e molculas possuem nveis discretos de energia

Energy

nveis vibracionais

nveis rotacionais

nveis eletrnicos

Eo

E1

Vo

V1

V2V3V4

ro

r1

r2

rn

...

h2

h1

luz visvel

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Ab

sorb

nc

iaEspectro de Absoro

Absoro de luz

Energy

hv

espectro caracterstico para cada molcula

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Absoro de luz espectro caracterstico para cada molcula

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Absoro de luz medida de absoro de luz

Io I detetor

caminho ptico

concentraoc

d d d d

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Absoro de luz medida de absoro de luz

caminho ptico

concentraoc

transmitncia T

Lei de Lambert-Beer

deve depender de c,e propriedades da substncia

: coeficiente de extino molar A

x 100 T(%)

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Absoro de luz medida de absoro de luz

transmitncia absorbncia

linearizao

Lei de Lambert-Beer

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Absoro de luz

Lei de Lambert-Beer

condies de validade da lei de Lambert-Beer

- absorvedores independentes

- meio homogneo e no absorvente

- ausncia de espalhamento de luz

- concentrao baixa

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Absoro de luz

Lei de Lambert-Beer

curva padromenor sensibilidade

concentrao

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Absoro de luz

Lei de Lambert-Beer

regio de validade da lei

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Medidas e Erros

medidas experimentais esto sempre sujeitas a erros

erros

acidentais

sistemticos

estatsticos

tendenciosos

preciso

exatido

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Medidas e Erros

erros acidentais

+ precisa - precisa

mesma exatido

erros sistemticos

mesma preciso

+ exata - exata

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Medidas e Erros

exatido boa preciso boa

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Medidas e Erros

exatido boa preciso ruim

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Medidas e Erros

exatido ruim preciso boa

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Medidas e Erros

exatido ruim preciso ruim

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Medidas e Erros

erros acidentais

Ab

so

rb

nc

ia

concentrao

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Medidas e Erros

erros sistemticos

Ab

so

rb

nc

ia

concentrao

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Experincia

Estudo da difuso do permanganato de potssio (KMnO4)

atravs de uma membrana de celofane

compartimento 1 compartimento 2

membrana de celofane

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Experincia

Estudo da difuso do permanganato de potssio (KMnO4)

atravs de uma membrana de celofane

compartimento 1 compartimento 2

membrana de celofane

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Experincia

Estudo da difuso do permanganato de potssio (KMnO4)

atravs de uma membrana de celofane

compartimento 1 compartimento 2

membrana de celofane

0,5 g/lKMnO4

medir A(t)

c(t)

J

ANTES:

construir curva padro do KMnO4

P

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Experincia

obteno da curva padro do KMnO4

preparar solues de diferentes concentraes de KMnO4

Tubo KMnO4(ml)

H2O

destilada(ml)

Concentraode KMnO4

(g/l)

1 1 9

2 2 8

3 3 7

4 4 6

5 5 5

soluo estoque [KMnO4] = 0,10 g/l

0,01

0,02

0,03

0,04

0,05

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Experincia

obteno da curva padro do KMnO4

medida da absorbncia de cada concentrao

Io I

= 525 nm

caminho ptico 1cm

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Tubo Concentraode KMnO4

(g/l)

Absorbncia Transmitncia

1 0,01 0,16

2 0,02 0.32

3 0,03 0,48

4 0,04 0,64

5 0,05 0,80

Experincia

obteno da curva padro do KMnO4

medida da absorbncia de cada concentrao

0,69

0,48

0,33

0,23

0,16

fazer o grfico A x c e T x c

achar

x 100 T(%)

69%

48%

33%

23%

16%

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Experincia

obteno da curva padro do KMnO4

= 2,54 x 103 M-1cm-1

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Experincia

Estudo da difuso do permanganato de potssio (KMnO4)

atravs de uma membrana de celofane

0,5 g/lKMnO4

medir A(t)

c(t)

J

a cada 5 min medir absorbncia

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Experincia

Estudo da difuso do permanganato de potssio (KMnO4)

atravs de uma membrana de celofane

0,5 g/lKMnO4

a cada 5 min medir absorbncia

5 min

10 min

15 min

20 min

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Experincia

Estudo da difuso do permanganato de potssio (KMnO4)

atravs de uma membrana de celofane

0,5 g/lKMnO4

Tempo(min)

Absorbncia Concentraode KMnO4

(g/l)

5 0,1410 0,29

15 0,43

20 0,58

0,00850,0180

0,0270

0,0360

fazer o grfico c x tcalcular a permeabilidade P

assumindo estado estacionrio dados: rea da membrana 7 cm2

volume dos compartimentos 10ml

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Experincia

Estudo da difuso do permanganato de potssio (KMnO4)

atravs de uma membrana de celofane

P = 8,6 x 10-5 cm/s

J = 4,3 x 10-8 g/cm2s

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