CENTRO FEDERAL DE EDUCAÇ ÃO TECNOLÓGICA DE QUÍMICA

PROVA DE CROMATOGRAFIA – recuperação 2001

Nome:_____________________________________________ nº____ T_____

1- O cromatograma abaixo representa a análise de oligosacarídeos em amostra de soja. Utilizou-se coluna de sílica-amino (fase normal) com fase móvel acetonitrila/H2O 1:1 e detetor de índice de refração.

OO

O O

CH2OH

OH

HO

HOH2C

H

H

H

O

H

OH

HOOH

H

H

H

H2C

OHO

OH

OH

H

H

HH

OH

H2C

O

OH

OH

H

H

HH

CH2OH

Sacarose

Rafinose

Estaquiose

A) Considerando a velocidade do papel = 10 mm/min, calcule o tempo de retenção da sacarose (dissacarídeo), da rafinose (trisacarídeo) e da estaquiose (tetrasacarídeo).

B) O que ocorreria no cromatograma, com relação à resolução e aos tempos de retenção, se a proporção de água na fase móvel fosse aumentada?

C) Por que o detetor de índice de refração foi usado ao invés do detetor UV-VIS?

D) Baseado na estrutura dos oligosacarídeos identificados e na polaridade da fase estacionária, explique a ordem de saída observada.

2- Para analisar cafeína no mate comercial, um técnico resolveu fazer a quantificação por HPLC. Ele procedeu a confecção de uma curva de calibração após a injeção dos padrões. As áreas dos padrões e amostra estão listadas abaixo:

Concentração Área1,3 mg/l 229872,6 mg/l 450053,9 mg/l 659985,2 mg/l 89003Amostra 38001

Considerando um aparelho com detetor UV-VIS, loop de 50 l e que a amostra sofreu diluição de 1:25, qual é a concentração de cafeína no mate comercial?