UPCII - Microbiologia

Aula Laboratorial 8

MJC19-11-2012

2012/2013

Sumário P8:

Leitura dos resultados da aula anterior: Leitura dos testes miniaturizados Strep 9R e

STAF18R. Determinação da sensibilidade do microrganismo

isolado a vários antibióticos

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Caracterização Fisiológica e Bioquímica de Microrganismos

o A leitura do teste incubado na semana anterior deve ser feita de acordo com o protocolo.

o Nalguns casos basta identificar a cor da solução no poço.

o Noutros casos é preciso adicionar reagentes para a revelação do teste.

o O teste terá de ser lido primeiro identificando as reacções positivas e negativas.

o Posteriormente é atribuído um valor às reacções positivas.

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Para o STREP9R

No poço 1-PYR adicionar 2 gotas de reagente PYR No poço 3-IPP adicionar 2 gotas de reagente

Ninydrin 7% A atribuição de valores corresponde a um código

que deve ser lido nas tabela fornecidas. marcando 1 para o 1º teste positivo de cada grupo

(PYR, ONPG e RAF).Marcando 2 para o 2º teste positivo de cada grupo

(ESC, ARA e BAC).Marcando 4 para o 3º teste positivo de cada grupo (IPP,

MAN e OPT)

Adicionar o total de cada grupo (obtendo um nº de 3 dígitos) e consultar a tabela.

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Tabela de interpretação dos códigos Strep 9R

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Para o STAF18R

Adicionar 2 gotas de reagente alfa-naftol e 1 gota de NaOH no poço 3-VP aguardar 15-20minutos e verificar se aparece uma cor rosa avermelhada.

Adicionar 2 gotas de ácido sulfanílico e 2 gotas de alfa-naftilamina no poço 4-NIT. Aguardar alguns segundos por uma cor vermelha alaranjada.

Observar os resultados de acordo com a tabela seguinte.

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Leitura dos testes STAF18R

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Poço Positivo Negativo

1-ADC Violeta Amarelo

2-UR Fuschia Amarelo

3-vp Vermelho/rosa Amarelo

4-NIT Vermelho Laranja Amarelo

5-ONPG Amarelo Sem cor

6-NOV Amarelo-Laranja Vermelho

7-MAL Amarelo-Laranja Vermelho

8-TRE Amarelo-Laranja Vermelho

9-MAN Amarelo-Laranja Vermelho

10-XYL Amarelo-Laranja Vermelho

11-XYT Amarelo-Laranja Vermelho

12-CEL Amarelo-Laranja Vermelho

13-SAC Amarelo-Laranja Vermelho

14-MNN Amarelo-Laranja Vermelho

15 RIB Amarelo-Laranja Vermelho

16-RAF Amarelo-Laranja Vermelho

17-LAC Amarelo-Laranja Vermelho

18-FRU Amarelo-Laranja Vermelho

Para o STAF18R

Depois de marcados os testes positivos e negativos:

Atribuir os valores corresponde a um código: marcando 1 para o 1º teste positivo de cada grupo

(ADC, NIT, MAL, XYL, SAC e RAF).Marcando 2 para o 2º teste positivo de cada grupo

(UR, ONPG, TRE, XYT, MNN e LAC).Marcando 4 para o 3º teste positivo de cada grupo

(VP, NOV, MAN, CEL, RIB E FRU)

Adicionar o total de cada grupo (obtendo um nº de 6 dígitos) e consultar a tabela das espécies.

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Leitura do antibiograma

o Para ler o antibiograma será necessário usar uma régua graduada para medir as zonas de inibição.

o Essas zonas de inibição são depois lidas em tabelas como a em anexo e determinada a susceptibilidade do microrganismo ao agente farmacológico.

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