RELATRIO DE AULA PRTICA

Pesquisa de taninos Perfil fitoqumico qualitativo

MANAUS 2011 MELLO SERRO

RELATRIO DE AULA PRATICA

Pesquisa de taninos Perfil fitoqumico qualitativo

Relatrio de aproveitamento para Disciplina de Farmacognosia, ministrada pela prof. ngela Lcia Carvalho de Andrade, no quino perodo para o Curso de Farmcia no Centro Universitrio do Norte,

MANAUS 2011 1 - OBJETIVO Verificar a presena de taninos na materia prima vegetal.

2 - INTRODUO Taninos so polifenis de origem vegetal, com pesos moleculares geralmente entre 500 e 3000 Dalton. Eles inibem o ataque s plantas por herbvoros vertebrados ou invertebrados e tambm por microorganismos patognicos. O termo largamente utilizado para designar qualquer grande composto polifenlico contendo suficientes grupos hidroxila e outros (como carboxila) para poder formar complexos fortes com macromolculas. Tradicionalmente os taninos so classificados segundo sua estrutura qumica em dois grupos: taninos hidrolisveis e taninos condensados. No centro de uma molcula de um tanino hidrolisvel, existe um carboidrato poliol, os grupos hidroxila dos carboidratos encontram-se parcial ou totalmente esterificados com grupos fenlicos como o cido glico. Estes protenas e outras

taninos so hidrolisados por cidos ou bases fracos produzindo-se carboidrato e cidos fenlicos. Este tipo de taninos encontrado nas folhas e sber de muitas espcies de plantas. Os taninos condensados tambm conhecidos como protoantocianidinas, so polmeros de 2 a 50 unidades flavonides ligadas por ligaes carbonocarbono, as quais no so susceptveis de serem rompidas por hidrlise. Apesar de muitos dos taninos condensados serem hidrossolveis, alguns taninos condensados de grande dimenso so insolveis na gua. Muitos alimentos contm taninos cereja, ch que contm catequinas e outros flavonides, o vinho, a rom, o damasco como maioria das bagas Na rea (arando-vermelho, morango, mirtilo) contm ambos tipos de taninos. industrial so importantes o processo de fabrico de curtumes. A casca de carvalhos tradicionalmente a principal fonte de taninos para esta indstria, apesar de atualmente serem utilizados tambm compostos inorgnicos. Historicamente, a importncia das plantas ricas em taninos est ligada s suas propriedades de transformar a pele animal em couro. Atualmente, o curtimento de peles tambm industrialmente conseguido com compostos minerais, entretanto, por vrios milnios esse processo requeria exclusivamente o uso de plantas tanferas. Durante o curtimento so formadas ligaes entre as fibras de colgeno na pele animal, a qual adquire resistncia ao calor, gua e abrasivos. Esta capacidade dos taninos em combinar-se com macromolculas explica a capacidade deles precipitarem celulose, pectinas e protenas. Essas propriedades so a base da definio clssica dos taninos: substncias fenlicas solveis em gua, as quais apresentam a habilidade de formar complexos insolveis em gua com alcalides, gelatina e outras protenas. Estes compostos so particularmente importantes componentes gustativos, sendo responsveis pela adstringncia de muitos frutos e produtos vegetais. A complexao entre taninos e protenas a base para suas propriedades como fatores ele controle de insetos, fungos e bactrias tanto quanto para suas atividades farmacolgicas. Classicamente, segundo a estrutura qumica, os taninos so classificados

em dois grupos: condensados e hidrolisveis. Os taninos hidrolisveis so molculas hidrossolveis e passam rapidamente em soluo nos meios hidroalcolicos tais como o vinho e as aguardentes. Estes taninos so encontrados principalmente na madeira do carvalho e outras espcies vegetais. Os taninos hidrolisveis no so naturais da uva, eles constituem os principais taninos comerciais onde a adio aos vinhos autorizada pela legislao. No vinho, o cido elgico provm da madeira ou pela adio de taninos enolgicos; o cido glico, presente nas pelculas e nas sementes, ao contrrio do cido elgico identificado nos vinhos. Os taninos elgicos so muito mais freqentes que os glicos, e provvel que o sistema bifenlico do cido hexaidroxidifenlico seja resultante da ligao oxidativa entre dois cidos glicos. So caracterizados por um poliol central, geralmente -D-glicose, cujas funes hidroxilas so esterificadas com o cido glico. O composto - 1, 2, 3, 4, 6-pentagaloil-D-glicose representa o padro mximo de substituio alcanado, sendo considerado o precursor imediato para ambas as classes de taninos hidrolisveis (galotaninos e elagitaninos). Os galotaninos resultam da unio entre unidades de cido glico via ligaes denominadas meta-depsdicas. O grau de substituio total de 10 a 12 resduos de cido glico por molcula de glicose pode ser alcanado. Os elagitaninos possuem um ou dois resduos de hexa-hidrxi-difenoil-D-glicose (HHDP) de configurao (R) ou (S), os quais so obtidos pelo acoplamento oxidativo C-C entre dois resduos de cido glico espacialmente adjacentes. Aps hidrlise cida das ligaes ster, ocorre a liberao do cido difnico, que se rearranja espontaneamente para o cido elgico.

2.1. COMPLEXAAO ENTRE TANINOS E PROTENAS Os complexos formados entre taninos e protenas podem ser reversveis ou irreversveis. Os reversveis so estabelecidos via ponte de hidrognio e interaes hidrofbicas,enquanto que em irreversveis ocorrem em condies

oxidativas via ligaes covalentes. As pontes de hidrognio so provavelmente formadas entre as hidroxilas fenlicas dos taninos e os grupamentos amina das protenas. As interaes hidrofbicas ocorrem entre os ncleos aromticos dos taninos e as cadeias laterais alifticas ou aromticas dos aminocidos proticos .acredita-se que as interaes hidrofbicas atuam como foras de atrao inicial na complexaao em meio aquoso entre taninos e protenas .essa associao inicial reforada numa segunda etapa com a formao de uma rede polifuncional de ligaes de hidrognio,nas quais cada molcula de tanino pode fazer vrias ligaes com a protena,atuando, assim, como um albumina bovina srica(abc).molculas ligante polidentado.foi observado uma menos polares ,tais como 3-o-galoilcorrelao entre a polaridade a polaridade do polifenol e o tipo de interao com a epicatequina e penta-galoil-glicose ,interagem com abc predominantemente

atravs de foras hidrofbicas,enquanto que ,as molculas mais polares ,heptagaloil-glicose e dmeros de taninos condensados,interagem,principalmente,por pontes de hidrognio. Os complexos reversveis podem ser solveis ou insolveis, dependendo da proporo tanino/protena, do precipitado que dissolvido com ph da fora inica do meio .a adio de a uma soluo de tanino produz um pequenas quantidades de protenas

a adio de mais protena.o mximo de de stios ligantes como

precipitao ocorre quando existe uma proporo tima entre tanino e protena,que ,no entanto,dependente da quantidade grupos galoila e hidroxilas fenlicas,presentes nos taninos. Os complexos irreversveis entre taninos e protenas ocorrem na planta quando seus tecidos so danificados,por auto-oxidao ou oxidao catalisada por enzimas. Oxidaes similares tambm acontecem solues in vitro quando os complexos reversveis de tanino-protena so expostos ao ar ou so mantidos em de ph alto. Em ambos os casos, os fenis so transformados em quinonas que reagem com grupos nucleoflicos na protena formando, ento, ligaes covalentes.

Barbatimo (Stryphnodendron adstringens)

3 - BARBATIMO (Stryphnodendron adstringens)

Nome Cientfico: Stryphnodendron barbatiman Mart. Famlia: Fabaceae. Sinnimos botnicos: Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville; Mimosabarbadetimam Vell.; Mimosa virginalis Arruda; Acacia adstringens Mart.

Nomes populares: barbatimo-verdadeiro, barba-de-timan, barba-de-timo,casca-da-mocidade, casca-da-virgindade, iba-timo, ibatim, paricarana, uabatim, ubatima, ubatim, chorozinho roxo, paricana, verna, piarana (Par). Barbatimo alumbark (ingls), barbatimo (ingls, espanhol, francs, italiano, alemo). rvore caracterstica da regio do cerrado brasileiro, ocorrendo do sul do Par at So Paulo e Mato Grosso do Sul. Na medicina popular as cascas desta espcie so utilizadas nas leucorrias e diarrias, por sua atividade adstringente. As cascas possuem em torno de 20% em taninos totais, das cascas foram isolados, a partir de um extrato acetona: gua, diferentes taninos condensados, entre eles: flavan-3-is, prodelfinidinas e prorobinetinidinas. Santos et al . (2002) avaliaram comparativamente a composio de taninos ele trs espcies diferentes conhecidas por barbatimo. Os resultados mostraram diferenas marcantes entre os gneros Stryphnodendron e Dimarphandra e tambm diferenas qumicas entre as espcies do mesmo gnero, as quais podem ser detectadas pelos mtodos utilizados. O extrato liofilizado do barbatimo, bruto e em fraes de polaridade crescente, foi capaz de inibir o crescimento de Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa. A frao acetnica do extrato bruto do Stryphnodendron adstrtngens, em modelos de inflamao aguda e crnica, apresentou diminuio significativa no edema de pata de rato induzido por carragenna e dextrana, confirmando a diminuio da permeabilidade vascular. Constituintes qumicos: taninos condensados, substncias monomricas (flavan-3-is) e proantocianidinas (entre elas 8 tipos de prodelfinidinas e 8 prorobinetinidinas), substncias tnicas (20 a 30%), taninos (18 a 27%), alcalides no determinados, amido, matrias resinosas, mucilaginosas, matria corante vermelha, cido tnico, estrifno, acar solvel, flavonides, flobafenos. Propriedades medicinais: adstringente, anti-hemorrgica, anti-sptica, antibacteriana, antiblenorrgica, antidiabtica, antidiarrica, antiescorbtica, antileucorrica, cicatrizante, coagulante sangneo, depurativa, diurtica, emtica,

hipotensora, oftlmica, tnica. Indicaes: casca: lceras, feridas, impigens, doenas da pele, afeces da garganta, corrimento vaginal, leucorria, gonorria, catarro uretral e vaginal; colite, diarria, escorbuto, anemias, hemoptises, hemorragia uterina, gastrite, lcera gstrica, cncer, afeces hepticas, diabetes. Folhas: tnica, hrnia. Parte utilizada: casca do caule, folhas. Contra-indicaes/cuidados: h indcios de que as sementes sejam txicas. Modo de usar:-

Uso externo: cascas reduzidas a p e aplicadas no local ou decoco de1 colher

de sopa da casca em 1 litro de gua morna, para uso sob a forma de banhos, gargarejo, lavagens vaginais e uterinas, lceras, impingens, etc. Adstringente, tnico, hemosttico, antidiarrico, catarros uretrais e vaginais, leucorria, feridas, adstringente das gengivas. - Uso interno: Casca, folha por infuso. - Decoco: ferver 20 g da casca em 1L de gua. Dosagem normal (3 a 5 xcaras /dia). - Dosagem bem leve (1 xcara /dia), em casos de lcera do estmago e duodeno. - Tintura, tomada pela manh, diluda em um pouco de gua, alternando-se com a tintura de carqueja, noite, para casos de asma, bronquite asmtica. O tratamento poder se estender at 12 meses no caso de asma crnica. - Outros usos: Curtume para o tratamento de couro. No passado, foi usado pelos ndios na produo de tinta vermelha.

4 - MATERIAIS UTILIZADOS 1 ERLENMEYER 100 ML 1 BALO VOLUMETRICO 100 ML PROVETA 100 ML 1 PIPETA 10 ML 1 BECKER 250 ML

1 VIDRO RELOGIO 4 TUBO DE ENSAIOS 1 FUNIL 1 PISTILO 1 GRAU 1 GRADE 1 PAPEL FILTRO 1 PICETA 1 PRA 1 ESPTULA 1 PAR DE LUVAS DE PROCEDIMENTO 1 LUVA TERMICA 1 SUPORTE UNIVERSAL 1 GARRA

5 - REAGENTES HCL6N CIDO CLORIDRICO 6 N FECL3 CLORETO FRRICO DE CHUMBO PB(C2H3O2) ACETATO DE CHUMBO CH3COOH ACIDO ACTICO H2O AGUA 6 - EQUIPAMENTOS 1 MANTA AQUECEDORA 1 BALANA ANALITICA 1 CAPELA

7 - DESCRIO DO PROCEDIMENTO

Primeiramente pesou-se 5g do vegetal barbatimo (Stryphnodendron adstringens), na balana analitica, em seguida transferiu-se o vegetal para o grau, onde puverizou-se com o auxilio do pistilo, depois de pulverizado transferiu-se para o becker e adicionou-se 100ml de H2O destilada, colocou-se na manta aquecedora e deixou-se ferver por 15 minutos, retirou-se da manta aquecedora e filtrou-se ainda quente o extrato no funil com papel filtro direto para o elernmeyer, e deixou-se esfriar por alguns minutos. a seguir fez-se a identificao dos tubos de ensaio como tubo 1,2,3 e 4, com o auxilio de uma pipeta graduada de 10ml, adicionou-se 2ml de extrato no tubo 1, no tubo 2 adicionou-se 2 ml de extrato tambm,no tubo 3 adicionou-se 5ml de extrato e no tubo 4 adicionou-se 5 ml de extrato, em seguida levou-se os tubos de ensaios at a capela,e adicionou-se 2 gotas de HCL6N e mais 2,5% gota a gota de gelatina incolor no tubo 1, no tubo 2 adicionou-se 10ml de H2O destilada e mais 4 gotas de FeCL3 a 1%,em metanol, no tubo 3 adicionou-se 10 ml da soluo de acido actico a 10% e 5 ml da soluo de acetato de chumbo a 10% tambm, e o tubo 4 permaneceu-se apenas com o extrato do vegetal filtrado.

7- RESULTADOS No tubo 1- Aps adicionar-se os reagentes necessarios HCL e gelatina a 2,5% ocorreu-se a formao de preciptados, indicando reao positiva para taninos. No tubo 2- Aps adicionar-se os reagentes necessarios H2O destilada e mas a soluo de FeCL3 a 1% em metanol, ocorreu-se a formao da cor azul, indicando reao postiva para taninos hidrolisaveis ou glico. No tubo 3- Aps adicionar-se os reagentes acido actico a 10% e acetado de chumbo a 10% ocorreu-se a formao de um preciptado esbranquiado, indicando a presena de taninos hidrolisaveis. No tubo 4- permaneceu apenas com 5 ml do extrato do vegetal filtrado.

Extrato de Barbatimo (Stryphnodendron adstringens)

8 - CONCLUSO Vrios mtodos so conhecidos e tradicionais para o reconhecimento de taninos. Teste com soluo de gelatina a 1%, contendo 10% de cloreto de sdio (NaCl), fornece um precipitado ou mesmo turvao. Esse teste no especfico, sendo que alguns fenis apresentam reao positiva ao se encontrarem em altas concentraes. Outro teste baseia-se na propriedade dos taninos de precipitarem com alcalides. Na tentativa de diferenciar os tipos de taninos, podem ser empregados dois diferentes reativos: - Soluo de cloreto frrico: taninos hidrolisveis ou glico e - Acetato de Chumbo - formao de um preciptado esbranquiado, presena de taninos hidrolisaveis.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS SIMES,CLAUDIA [et al]> Farmacognosia da planta ao medicamento. Ed. Poto Alegre: Editora de UFRGS; EDitora da UFSC,2007http://www.scielo.br/scielo.php?pid=S0100-40422005000500029&script=sci_arttext >. Acesso em: 19 de Maio de 2011.