Prática em citometria de fluxo com hemócitos de bivalves

Danielle Ferraz Mello

O que é citometria de fluxo?

Técnica utilizada para contar, examinar e classificar partículas microscópicas suspensas em um

meio líquido em fluxo;

Permite a análise de vários parâmetros simultaneamente.

Como funciona?Um feixe de luz

(normalmente laser) de um único comprimento de onda (cor) é direcionado a um meio líquido em fluxo;

Detectores vão receber a luz que atravessou (Forward scatter ou FSC) e a luz que foi desviada (Side scatter ou SSC) pela partícula ou célula.

Citômetro de fluxoInstrumento capaz de analisar várias

parâmetros de várias partículas por segundo;Alguns podem ainda ativamente separar e

isolar partículas com propriedades específicas.

Principais componentes: Laser ou fonte de luz; Fluxo de células; Detector e conversor de sistema analógico para

digital; Computador para análise dos sinais.

Citômetro de fluxo

Gráficos gerados: dot plot

Gráficos gerados: dot plot

Gráficos gerados: histogramas

AplicaçõesHematologia;

Cancerologia;

Imunologia; 

Ciclo celular;

Oceanografia;

Muitas e muitas outras!!

HemócitosSão as células

imunocompetentes que fazem parte do sistema imune dos invertebrados;

Granulares e hialinos.

10 µm

Hemócitos

Vamos à prática!!!

ResultadosGráfico hemolinfa Crassostrea gigas - DANI

ResultadosGráfico hemolinfa Crassostrea gigas -

PATRÍCIA

ResultadosGráfico hemolinfa Crassostrea gigas -

CILEIDE

ResultadosGráfico hemolinfa Crassostrea gigas - POOL