PADRÕES DE DIFERENCIAÇÃO CELULAR EM MEDULA...

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PADRÕES DE DIFERENCIAÇÃO CELULAR EM MEDULA ÓSSEA NORMAL CARACTERIZAÇÃO IMUNOFENOTÍPICA POR CITOMETRIA DE FLUXO DRA MAURA R VALERIO IKOMA SERVIÇO DE TRANSPLANTE DE MEDULA ÓSSEA

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PADRÕES DE DIFERENCIAÇÃO CELULAR

EM MEDULA ÓSSEA NORMAL

CARACTERIZAÇÃO IMUNOFENOTÍPICA

POR CITOMETRIA DE FLUXO

DRA MAURA R VALERIO IKOMASERVIÇO DE TRANSPLANTE DE MEDULA ÓSSEA

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IMUNOFENOTIPAGEM DE MO

• A MO é um tecido complexo contendo múltiplas linhagens hematopoéticas com vários estágios de maturação por linhagem

• A análise por CF pode identificar, quantificar e caracterizar as várias subpopulações da MO

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DIFERENCIAL CELULAR NORMAL EM MEDULA ÓSSEA

CÉLULASCD34+ CD34+ ou CD117+EritroblastosGranulócitosMonócitosEosinófilosBasófilosMastócitosPlasmócitosPrecursoras B Linfócitos B madurosLinfócitos TCélulas Natural Killer

% DP (2DP)

1,1 ±0,6 0,3 –2,62,2 ±1,4 0,6 –6.0 4,7 ±2,1 2.0 –9.067 ±6,1 57 –804,3 ±1,4 2.0 –6.02,5 ±1.3 0,8 –5.00,4 ±0.4 <0.1 –2.40,02 ±0.02 <0.030,2 ±0.2 0.01 –0.50,9 ±0.8 0.1 –3.9

2,9 ±1.5 1.6 –6.39,2 ±4.5 2.6 -18.02,8 ±1.4 0.7 –5.0

Orfao et al. Comunicação pessoal 2009

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HEMATOPOESE POR CITOMETRIA DE FLUXO

• O estudo da Hematopoese recebeu impulso de desenvolvimenrto da CF com painéis de Ac monoclonais de 4 ou mais cores

• As combinações de Ac permitiram saber a distribuição relativa das células da MO nas maiores linhagens (linfóide e mielóide), as células mais imaturas e as em estágio mais maduro ou específico de diferenciação

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PARA QUE CONHECER O NORMAL?

Toda célula neoplásica é uma transformação da célula normal.

Conhecendo-se o que é normal, identifica-se o anormal

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Conhecendo-se o que é normal

identifica-se o anormal

Borowitz & Silberman. Cases in Flow Cytometry, 1999

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DIFERENCIAÇÃO LINHAGEM ERITRÓIDE

CD 34+

Borowitz & Silberman. Cases in Flow Cytometry, 1999

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MARCADORES DE MATURAÇÃO DE SÉRIE ERITRÓIDE EM MO NORMAL

ESTAGIO I ESTAGIO II ESTAGIO III ESTAGIO IV

CD 34+ CD 34+ CD 34 fr CD 34 neg CD 117+ CD 117+ CD 117+ CD 117 fr HLA-DR+ HLA-DR fr HLA-DR fc HLA-DR

neg CD 36 fc/+ CD 36+ CD 36+ CD 36+ CD 105 neg CD 105+ CD 105+ CD 105 fc/- CD 71 fc CD 71 fc CD 71 forte CD 71 forte CD 45 fc CD 45 fc CD 45 fc CD 45 neg

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MARCADORES DE MATURAÇÃO DE SÉRIE ERITRÓIDE EM MO NORMAL

ESTAGIO I ESTAGIO II ESTAGIO III ESTAGIO IV

CD 34+ CD 34+ CD 34 fr CD 34 neg CD 117+ CD 117+ CD 117+ CD 117 fr HLA-DR+ HLA-DR fr HLA-DR fc HLA-DR

neg CD 36 fc/+ CD 36+ CD 36+ CD 36+ CD 105 neg CD 105+ CD 105+ CD 105 fc/- CD 71 fc CD 71 fc CD 71 forte CD 71 forte CD 45 fc CD 45 fc CD 45 fc CD 45 neg

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MATURAÇÃO NORMAL DAS CÉLULAS ERITRÓIDES EM MEDULA

ÓSSEA

Orfao et al, 2009

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DIFERENCIAÇÃO LINHAGEM ERITRÓIDE

Pro eritroblastosEritroblastosEritrócitos

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DIFERENCIAÇÃO LINHAGEM GRANULOCÍTICA

CD 34+

Borowitz & Silberman. Cases in Flow Cytometry, 1999

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DIFERENCIAÇÃO LINHAGEM GRANULOCÍTICA

Van Lochem et al. Cytometry Part B (Clinical Cytometry) 60B:1–13 (2004)

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DIFERENCIAÇÃO LINHAGEM GRANULOCÍTICA

Van Lochem et al. Cytometry Part B (Clinical Cytometry) 60B:1–13 (2004)

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DISTRIBUIÇÃO DOS DIFERENTES ESTÁGIOS DE MATURAÇÃO DA

GRANULOCÍTICA EM MEDULA ÓSSEA

POPULAÇÃOMieloblastosPromielócitosMielócitos e Metamielócitos

CD 11b+ CD 13+

Neutrófilos CD 16+ CD 10+

Maduros CD 64 baixo

MÉDIA (%) ± DP0,8 ± 0,5

12 ± 434 ± 7

53 ± 9

50 ± 9

61 ± 10

Orfao et al. Comunicação pessoal 2010

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DIFERENCIAÇÃO LINHAGEM MONOCÍTICA

CD 34+

Borowitz & Silberman. Cases in Flow Cytometry, 1999

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DIFERENCIAÇÃO LINHAGEM MONOCÍTICA

Van Lochem et al. Cytometry Part B (Clinical Cytometry) 60B:1–13 (2004)

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MARCADORES DE DIFERENCIAÇÃO MONOCÍTICA

Orfao et al, 2009

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Van Lochem et al. Cytometry Part B (Clinical Cytometry) 60B:1–13 (2004)

DIFERENCIAÇÃO LINHAGEM LINFOCITÁRIA B

CD 38CD 138

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Van Lochem et al. Cytometry Part B (Clinical Cytometry) 60B:1–13 (2004)

DIFERENCIAÇÃO LINHAGEM LINFOCITÁRIA B

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DIFERENCIAÇÃO LINHAGEM LINFOCITÁRIA T

MOMO TIMOTIMO SPSP

SCSC

CORTEXCORTEX CORTEXCORTEX MEDULARMEDULAR

TIMÓCITO ITIMÓCITO I TIMÓCITO IITIMÓCITO II

TIMÓCITO IIITIMÓCITO IIIHELPER / INDUCERHELPER / INDUCER

MADURO ATIVADO

PRÉ-TPRÉ-T

TdTHLA-DRCD 34

TdTHLA-DRCD 7

TdTHLA-DRCD 7CD 2CD 5CD 6CD 38CD 71

CD 7CD 2CD 5CD 6CD38s CD3 TCRCD 4

CD 7CD 2CD 5CD 6s CD3 TCRCD 4

CD 7CD 2CD 5s CD3 TCRCD 4HLA-DRCD 25

SUPRESSOR / CITOTÓXICOSUPRESSOR / CITOTÓXICO

MADURO ATIVADO

CD 7CD 2CD 5CD 6s CD3 TCRCD 8

CD 7CD 2CD 5s CD3 TCRCD 8HLA-DRCD 25

CD 7CD 2CD 5CD 6CD 38s CD3TCRCD 8

TdTCD 7CD 2CD 5CD 1cCD 3CD 6CD 4 / CD 8CD 38

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DIFERENCIAÇÃO LINHAGEM LINFOCITÁRIA T

MOMO TIMOTIMO SPSP

SCSC

CORTEXCORTEX CORTEXCORTEX MEDULARMEDULAR

TIMÓCITO ITIMÓCITO I TIMÓCITO IITIMÓCITO II

TIMÓCITO IIITIMÓCITO IIIHELPER / INDUCERHELPER / INDUCER

MADURO ATIVADO

PRÉ-TPRÉ-T

TdTHLA-DRCD 34

TdTHLA-DRCD 7

TdTHLA-DRCD 7CD 2CD 5CD 6CD 38CD 71

TdTCD 7CD 2CD 5CD 1cCD 3CD 6CD 4 / CD 8CD 38

CD 7CD 2CD 5CD 6CD38s CD3CD 4

CD 7CD 2CD 5CD 6s CD3CD 4

CD 7CD 2CD 5s CD3CD 4HLA-DRCD 25

SUPRESSOR / CITOTÓXICOSUPRESSOR / CITOTÓXICO

MADURO ATIVADO

CD 7CD 2CD 5CD 6s CD3CD 8

CD 7CD 2CD 5s CD3CD 8HLA-DRCD 25

CD 7CD 2CD 5CD 6CD 38s CD3CD 8

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Não há nada mais colorido.....

...que o sorriso de uma criança!

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OBRIGADA