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Detergência
Tratamento de instrumentos sujos
Química/Bioquímica
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Directrizes diferentes
• Directrizes europeias: ESGE* / ESGENA*
• Directrizes britânicas: BSG*
• Directrizes alemãs: RKI*
• Directrizes francesas: Ministério da Saúde
*Sociedade Europeia de Endoscopia Gastrointestinal
*Sociedade Europeia de Enfermeiros de Gastrenterologia e Endoscopia e Associados
*Sociedade Britânica de Gastrenterologia
*Robert Koch Institute
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ESGE/ESGENA
Directrizes de limpeza e desinfecção (actualizado em 2008)
“ …o passo mais importante da limpeza/desinfecção é a limpeza. … » (Nota técnica – 2003)
– Biofilme
– Prião/procedimento de escovagem dupla
– Progresso técnico em âmbito e acessório
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ESGE/ESGENA
Directrizes de limpeza e desinfecção (actualizado em 2008)
• Procedimentos para o reprocessamento de endoscópios– Processo pré-limpeza
– Limpeza manual
– Enxaguamento
– Desinfecção
– Enxaguamento
– Secagem
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ESGE/ESGENA
• Passo de limpeza: utilização de detergentes
– Detergente simples
• Classe I CE
• com ou sem enzimas
– Detergente com propriedades desinfectantes
• Classe IIa CE
• EN 14885
• Sem aldeídos/fixação de proteínas
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RKI
• Detergentes
– Produto de limpeza enzimático com pouca formação de espuma
– Soluções com agentes de limpeza e desinfectantes• Sem GTA
– Detergentes alcalinos para limpeza• Compatibilidade de material
*Sociedade Alemã para a Higiene e Microbiologia**Robert Koch Institute
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Ministério da Saúde francês
Circular n.° 591 de 2003.12.17 e circular n.° 138 de 2001.03.14
•Procedimentos para o reprocessamento de endoscópios– Processo pré-limpeza
– Primeira limpeza (10 min.)
– Primeiro enxaguamento
– Segunda limpeza (5 min.)
– Enxaguamento intermédio
– Desinfecção
– Enxaguamento final
– Secagem correcta (ar comprimido)
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Ministério da Saúde francês• Detergentes
– Produto com acção detergente comprovada • Com ou sem enzimas
• pH alcalino já não é necessário
– Detergente desinfectante• Sem aldeído
Solução renovada depois de cada utilização e para cada endoscópio
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Protocolos para reprocessamento
• Tratamento de instrumentos sujos
– Passo de limpeza• Melhora o poder detergente dos produtos
• Comprova a acção do detergente
– Conceito pré-desinfecção• Produto detergente com propriedades desinfectantes
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Tratamento de dispositivos médicos sujos
Passo de limpeza
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Parâmetros para a detergência e optimização do passo de limpeza
Círculo de Sinner
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detergência (química dos tensioactivos)
1. Tensioactivos fixos no solo
2. Tensioactivos dispersos no solo
3. Tensioactivos mantêm-se em suspensão em solo disperso
1 2 3
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detergência (química dos tensioactivos)
Tensioactivos Hidrofílico P. Lipofílico P.
solo
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detergência (química dos tensioactivos)
Hidrofílico P. Cadeia carbonada hidrófoba
Hidrofílico P. Cadeia carbonada
hidrófoba
D1
D2
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detergência (química dos tensioactivos)
H.L.B.1 10 50
HidrofílicosLipofílicos
Solúvel
Em óleo Dispersível
em
óleo água
Solúvel
Em água
D1
D2
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detergência (enzimologia)
Enzima + Substrato Enzima + Substrato hidrolisado ou degradação de
produtos
• a enzima não é consumida durante a reacção.
• a sua acção continua no substrato desde que as condições ambientais sejam respeitadas (temperatura, pH…)
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detergência (enzimologia)
Reconhecimento do substrato e, em seguida, da actividade enzim ática
EnzimaSubstrato
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detergência (enzimologia)
Sem reconhecimento do substrato e, em seguida, sem actividade enzim ática
EnzimaSubstrato
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substrates enzymes result of reaction
proteins pprrootteeaassee peptides … AA
lipids lliippaassee TG, DG, MG, …Glycerol
polysaccharides ccaarrbboohhyyddrraassee polyosides… simple sugar
Enzimas - classificação
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Slide 24
sujidade
• sangue
– Proteínas de albumina humana: 3% a 3,5%
– Lípidos Triglicéridos: 0,05% a 0,15%
• Tecidos– Polissacarídeos Glicogénio: 0.1%
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Slide 25
substrates enzymes result of reaction
proteins (3 to 3.5% of human albumin in blood)
pprrootteeaassee peptides … AA
lipids (0.05 to 0.15% of triglycerides in blood)
lliippaassee TG, DG, MG, …Glycerol
polysaccharides (0.1% of glycogen in human tissue)
aammyyllaassee polyosides…Glucose
Enzimas - selecção
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hum Alb T0 T4h T8h USSansenz
Depósito de albúmina humana
Albúmina humana+
ANIOSYME DD1
T0 : + 15 min
Albúmina humana+
ANIOSYME DD1
T0 : + 4 horas
Albúmina humana+
ANIOSYME DD1
T0 : + 8 horas
Albúmina humana+
ANIOSYME DD1
Ultrasonidos: 5 x 15 min
Albúmina humana+
ANIOSYME DD1sin proteasa
A B C D E F
Sin hidrólisis de la albúmina
Productos de hidrólisis de la albúmina por la
proteasa
Dire
cció
n de
mig
raci
ón
Actividad proteásica del ANIOSYME DD1 respecto a la albúmina humana
(Electroforesis sobre gel de acrilamida)
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Detergência
Métodos de análise
Ensaio estático/Ensaio dinâmico
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Slide 27
DCP ou medição do poder do detergente
100 %
40 %
D.C.P. = 40 %: poder médio
D.C.P. = 80 %: poder elevado
D.C.P. = 15 %: poder baixo
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Slide 28
Técnica DCP
DCP
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Slide 29
O solo não removido é recuperado
O solo não removido é
recuperado com ultra-sons: um
período de duas horas!
Determinação de proteína em soluções
de recuperação
Determinação de proteína por espectrometria em
U.V.
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Slide 30
EFFECTS OF SYNERGY
0
20
40
60
80
100
TO89 0,1 160CKPC 0,1 mélange A=TO890,023+ 160CKPC
0,045
ENZYMES SEULES mélangeA+ENZYMES
trempage 5'
trempage 15'
CP + 20% MG
DCP ou medição do poder do detergente
5 minutosde imersão
15minutos de imersão
TA 1 TA 2 misturar TA1 + TA2 enzimas TA1 +
TA2 + enzimas
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Slide 32
Acção em biofilme
• O biofilme é constituído por uma matriz, denominada de glicocálise, constituindo uma carapaça protectora para os microrganismos contra os ataques do ambiente externo.
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Slide 33
Biofilme observado em S.E.M.* estado da superfície
Silicone novo Tubo
Tubo de silicone novo + Biofilme
Detalhe
Biofilme antigo* Microscopia electrónica de transmissão
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Slide 34
•Formação de biofilme
P1: Bomba de alimentação em substrato (2,5 à 3 ml/mi n)
Evacuação
P1
P2A
B
Banho-maria a 30 °CReserva de substratoProveta …frasco
P2: A bomba agita o circuito (40 voltas/min)
A-B: Zona de recolha de amostra de tubo (90 cm)
B: Inoculação da ansa
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Slide 35
•Método biofilme
Solução detergenteConcentração e temperatura fixa
Após cada duração de
contacto
Tubo Tygon® + biofilme
P
Contagem de bactérias viáveis soltas
Contagem de bactérias viáveis presas
Determinação do nível de exopolissacarídeos
Determinação de proteínas residuais
S.E.M. (Microscopia electrónica de transmissão)
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Slide 36
Ensaio com biofilme
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0 5Contact time (min)
Log fixed bacteria / cm ²
0,00
5,00
10,00
15,00
20,00
25,00
30,00
35,00Protein and
exopolysaccharide concentration
(µg/cm²)
Distilled water control Log fixed bacteria /cm2
Log fixed bactéria / cm2
Exopolysaccharide concentration µg/ cm2
Protein concentration µg/ cm2
Duração de contacto
ÁGUA DESTILADA (controlo)
ANIOSYME DD1
Registo das bactérias fixas/cm2
Registo das bactérias fixas/cm2
Concentração de exopolissacarídeos
µg/cm2
Concentração de proteínas µg/cm2
0 7.60 7.70 31.00 20.85 min 7.50 2.50 3.10 14.7
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Detergência
Influência da química
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Influência da “química” num procedimento igual à limpeza e desinfecção de endoscópios
(detergente + PAA)
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
A B C D E
redu
ctio
n lo
g 10
• Detergentes– A: líquido
– B: Líquido enzimático
• Detergentes-desinfectantes– pH neutro
• C: líquido
• E: Líquido enzimático
– pH alcalino
• D: pó enzimático
6,7 registos
8,8 registos
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Slide 39
Actividade em biofilme
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0 0,5 1,5 3 5 10 15
contact time in minutes
log Bact.
predisinfectant detergent
6,3 registosredução
3,6 registosredução
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Slide 75
Conclusão
Por causa de
– existência de directrizes
– contexto regulamentar
– controlo químico
continuam a ser relevantes os processos de reprocessamento manuais e semi-automáticos para dispositivos médicos, como os endoscópios
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OBRIGADO!