Cultura de fatias de Glândula Supra-Renal Avaliação da qualidade estrutural pelos efeitos de...
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Cultura de fatias de Glândula Supra-Renal
Avaliação da qualidade estrutural pelos efeitos de
condições externas
Filipa Silva
Helena Maia
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Objectivo do trabalho As GSR podem ser usadas em cultura
mas requerem condições muito particulares, uma das quais é a presença de soro.
Na ausência deste, as células perdem viabilidade o que se pode verificar pelas suas modificações estruturais.
Questão: Qual é o efeito da privação de soro acrescentado, na ultra-estrutura das GSR em
cultura?
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Material e métodos
Dia 1 : Rato Wistar sacrificado por decapitação
Colheita das GSR e sua descapsulação
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Material e métodos
Dia 1 :
Incubação de fragmentos da cápsula com parênquima subcapsular (CP) e de fatias da glândula restante (maioritariamente composta por ZF)
Meio: DMEM/HAM´S F-12 em estufa a 37 ºC com CO2
a 5 % durante 24h (acrescentado de antibiótico e soro bovino fetal)
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Dia 2: Colheita de fragmentos e processamento
para ME. Distribuição dos fragmentos restantes por
meio semelhante ao anterior com soro bovino fetal (B1) ou sem soro (B2).
ZF + meio + soro 10% ZF + meio + antibiótico 1% + antibiótico 1%
B1ZF B2 ZF
Material e métodos
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Dia 3
Colheita de fragmentos de B1 e B2 para ME;
Material e métodos
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Resultados
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Resultados
B1 ZF B2 ZF
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Comentários
Em experiências anteriormente efectuadas os meios tinham acidificado e estavam contaminados por fungos filamentares.
Nas experiências actuais, os estudos morfológicos mostraram acentuada destruição celular. Embora não se observassem as formas filamentares referidas, admitimos que a contaminação fúngica por formas mais primitivas tenha ocorrido e privado as células dos nutrientes.
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Comentários
É de admitir uma maior sensibilidade das células da ZF à variação das condições do meio.
Mais experiências serão necessárias para o confirmar.
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Comentários No futuro será necessário prosseguir
com práticas laboratoriais muito precisas, a saber:
Rapidez e rigor na execução de todos os procedimentos de preparação de material biológico;
Cuidados assépticos e higiénicos rigorosos;
Minimização da possível infestação fúngica.
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