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BIOTECNOLOGIAENGENHARIA GENÉTICA
PRESERVAÇÃODA INFORMAÇÃO GENÉTICA
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Dogma Central BM
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Engenharia GenéticaBiotecnologiaREPLICAÇÃO
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Replicação
(DUPLICAÇÃO DO DNA)UMA CÉLULA
1. Ordem para duplicar2. Abertura das cadeias3. Instalação do equipamento4. Síntese das novas cadeias5. Separação das cópias6. Separação das células
DUAS CÉLULAS
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O ciclo celular eucariótico
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Replicação do DNA
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Origem da replicação
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Topoisomerases
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Sentido da replicação
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Forquilha de replicação
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Cadeia atrasada
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Extremidade 5’
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Telomerase
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Enzimas na replicação
• Topoisomerases• ssDNA binding• Primase• Polimerases (III / I)
• Ligase• (Telomerase)
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Engenharia GenéticaBiotecnologiaMUTAÇÕES
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Mutações e aberrações
• Mutações• Pontuais• Não pontuais
• Espontâneas• Induzidas• Aleatórias• Dirigidas
• Aberrações cromossomais
Hereditárias
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Mutações pontuais
• Mismatch• Silent AGG (Arg)→CGG (Arg)• Neutral AAA (Lys) →AGA (Arg)• Missense UCC (Ser) →UGC (Cys)• Nonsense CAG (Gln)→UAG (stop)
• Frameshift• Inserção CA’T.CAT.CAT → CAA.TCA.TCA.T• Delecção CAT.CAT.CAT → CTC.ATC.AT
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Resultados de mutações
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Reversão / supressão• Reversão verdadeira
AAA (Lys) → GAA (Glu) → AAA (Lys)
• Reversão equivalente
UCC (Ser) → UGC (Cys) → AGC (Ser)
CGC (Arg) → CCC (Pro) → CAC (His) – aa básico
• Supressão intragénica (2ª. mutação)
CAT.CAT.CAT.CAT.CAT → CAT.XCA.TCA.^CAT.CAT
• Supressão extragénica
• tRNA supressor de nonsense UAG (stop) → UAG (tyr)
• Supressor fisiológico = via metabólica alternativa
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Taxas de mutação espontânea
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“Hotspots”