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Biotecnologia / Engenharia Genética Carlos Sinogas 2019/20 BIOTECNOLOGIA ENGENHARIA GENÉTICA PRESERVAÇÃO DA INFORMAÇÃO GENÉTICA

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BIOTECNOLOGIAENGENHARIA GENÉTICA

PRESERVAÇÃODA INFORMAÇÃO GENÉTICA

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Dogma Central BM

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Engenharia GenéticaBiotecnologiaREPLICAÇÃO

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Replicação

(DUPLICAÇÃO DO DNA)UMA CÉLULA

1. Ordem para duplicar2. Abertura das cadeias3. Instalação do equipamento4. Síntese das novas cadeias5. Separação das cópias6. Separação das células

DUAS CÉLULAS

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O ciclo celular eucariótico

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Replicação do DNA

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Origem da replicação

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Topoisomerases

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Sentido da replicação

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Forquilha de replicação

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Cadeia atrasada

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Extremidade 5’

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Telomerase

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Enzimas na replicação

• Topoisomerases• ssDNA binding• Primase• Polimerases (III / I)

• Ligase• (Telomerase)

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Engenharia GenéticaBiotecnologiaMUTAÇÕES

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Mutações e aberrações

• Mutações• Pontuais• Não pontuais

• Espontâneas• Induzidas• Aleatórias• Dirigidas

• Aberrações cromossomais

Hereditárias

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Mutações pontuais

• Mismatch• Silent AGG (Arg)→CGG (Arg)• Neutral AAA (Lys) →AGA (Arg)• Missense UCC (Ser) →UGC (Cys)• Nonsense CAG (Gln)→UAG (stop)

• Frameshift• Inserção CA’T.CAT.CAT → CAA.TCA.TCA.T• Delecção CAT.CAT.CAT → CTC.ATC.AT

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Resultados de mutações

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Reversão / supressão• Reversão verdadeira

AAA (Lys) → GAA (Glu) → AAA (Lys)

• Reversão equivalente

UCC (Ser) → UGC (Cys) → AGC (Ser)

CGC (Arg) → CCC (Pro) → CAC (His) – aa básico

• Supressão intragénica (2ª. mutação)

CAT.CAT.CAT.CAT.CAT → CAT.XCA.TCA.^CAT.CAT

• Supressão extragénica

• tRNA supressor de nonsense UAG (stop) → UAG (tyr)

• Supressor fisiológico = via metabólica alternativa

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Taxas de mutação espontânea

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“Hotspots”