OBTENÇÃO E AVALIAÇÃO DE MUTANTES ESPONTÂNEOS DE

Rhizobium phaseoli RESISTENTES A ANTIBIÓTICOS E

FUNGICIDAS

OBTENÇÃO E AVALIAÇÃO DE MUTANTES ESPONTÂNEOS DE

Rhizobium phaseoli RESISTENTES A ANTIBIÓTICOS E

FUNGICIDAS

Autor: João Carlos PereiraOrientador: Prof. Caio Vidor

RESUMO

A utilização de mutantes de Rhizobium resistentes aantibióticos e fungicidas possibilita estudos ecológicos quando se utilizam estirpes com similaridade antigãnica. Entretanto, ã desejável que eles sejam mutagãnicas estáveis,eficientes e competitivos por sítios de nódulos. Em vistadisso, desenvolveu-se a presente pesquisa em areia e solocom o objetivo de avaliar estas características em mutantesresistentes a antibióticos e fungicidas.

Houve variações entre os mutantes em termos de infectividade e especificidade hospedeira com Phaseolusvulgaris nos experimentos realizados. Estirpes existentes no solo e pertencentes ao sorogrupo SEMIA 487 ocorreram emporcentuais elevados nos nódulos das cultivares utilizadassendo que a cultivar Turrialba-4 ainda apresentou uma altaporcentagem de nódulos que não reagiram com os antissorostestados. Os mutantes SEMIA 487-NOV e SEMIA 4002-S1 apre-sentaram-se mutagenicamente estáveis, sendo que o último ainda apresentou boa capacidade competitiva por sítios de nódulos.

Os resultados demonstram a viabilidade de utiliza-ção de mutantes em estudos ecológicos do Rhizobium, desdeque estes mantenham suas características mutagênicas e nãoapresentem resistência cruzada aos antibióticos.

OBTENTION AND EVALUATION OF Rhizobium phaseoli

SPONTANEOUS MUTANTS RESISTANT TO ANTIBIOTICS AND

FUNGICIDES

Author: João Carlos PereiraAdviser: Prof. Caio Vidor

SUMMARY

Resistance to antibiotics and fungicides can be usedas an useful tool for ecological studies of Rhizobium in soils bearing strains with similar antigenic structure. However, it is desirable that they should be mutagenically stable, effective, and competitive for nodule sites. With these in mind it was initiated the present study to evaluate the behavior of different mutants resistant to different antibiotics and fungicides.

There were variations among the mutants in terms of infectivity and host specificity on Phaseolus vulgaris in the different experiments. The established strains belonging to the same serogroup of SEMIA 487 occurred in high percentage of nodules from all cultivars. In addition, a high percentage of nodules from Turrialba-4 did not react with any of the tested antissera. Besides the mutagenic stability exhibited by the mutant strains DEMIA 487-NOV and SEMIA 4002-S1, the latter was more competitive for nodule sites.

The results support the idea about the possibilityof using spontaneous mutants in ecological studies of Rhizobium in cases where they have no cross-resistance to antibiotics and keep their mutagenic stability.

A inoculação do f e i j ã o ( P h a b e o l u ã v u l g a h i b ) com es-

t i r p e s e f i c i e n t e s de R h i z o b i u m p h a b e o l i pode apresentar con - s iderável importância no suprimento de n i t rogênio a t ravés

da fixação simbiótica. Entretanto, uma s é r i e de f a to re s r e -

lacionados com a p lanta , com o r izõbio , com o so lo e com a

in te ração dos t r ê s pode a f e t a r decisivamente a nodulação.

Devido a i s t o , tem-se in tens i f i cado o desenvolvimento de pes - quisas visando i d e n t i f i c a r e s t e s f a to r e s e quan t i f i c a r os

seus e f e i t o s , na t e n t a t i v a de melhorar a e f i c i ênc i a simbiõ-

t i c a e conseqiientemente aumentar a quantidade de N2 fixado

e a produtividade da cul tura .

A u t i l i z ação de t écn icas que diferenciem as e s t i r -

pes em estudos r e l a t i vos a e f i c i ê n c i a f ixadora, à capacida-

de competitiva por s í t i o s de infecção nodular, 5 e s p e c i f i c i -

dade hospedeira e à capacidade de sobreviver e colonizar o

so lo , p o s s i b i l i t a est imar a s in terações ex i s t en t e s e n t r e a s

e s t i r p e s de r izóbio com a população rnicrobiana e com fato-

r e s de natureza f í s i c a e química do solo.

O uso de mutantes r e s i s t en t e s a an t i b ió t i cos e fun-

g ic idas nes tes estudos torna-se importante, por permi t i r a

aná l i s e do comportamento da população sens íve l no so lo ,

a t ravés da aval iação q u a l i t a t i v a e quan t i t a t i va da popula-

ção mutante em meios s e l e t i v o s e pe las boas perspect ivas de

u t i l i z ação das e s t i r p e s mutantes na elaboração de inoculan-

t e s . A maiorocorrência dos mutantes nos nódulos ' poderia

s e r favorecida mediante a adoção de p rá t i ca s c u l t u r a i s que

proporcionassem um aumento da população de microrganismos

produtores de an t ib ió t i cos , bem como, o tratamento da semen - t e com fungicidas aos quais o mutante & r e s i s t en t e .

A presente pesquisa teve como obje t ivo a v a l i a r a e-

f i c i ê n c i a de fixação do N e a capacidade competitiva por 2

s í t i o s de infecção nodular de e s t i r p e s mutantes de R.

p h a b e o L i em f e i j ã o visando ~ t i l iS-1~~ em so los para estudos

ecológicos, bem como uma possível recomendaç50 posterior das

mesmas para fabricação de inoculantes.