PADRÕES DE DIFERENCIAÇÃO CELULAR

EM MEDULA ÓSSEA NORMAL

CARACTERIZAÇÃO IMUNOFENOTÍPICA

POR CITOMETRIA DE FLUXO

DRA MAURA R VALERIO IKOMASERVIÇO DE TRANSPLANTE DE MEDULA ÓSSEA

IMUNOFENOTIPAGEM DE MO

• A MO é um tecido complexo contendo múltiplas linhagens hematopoéticas com vários estágios de maturação por linhagem

• A análise por CF pode identificar, quantificar e caracterizar as várias subpopulações da MO

DIFERENCIAL CELULAR NORMAL EM MEDULA ÓSSEA

CÉLULASCD34+ CD34+ ou CD117+EritroblastosGranulócitosMonócitosEosinófilosBasófilosMastócitosPlasmócitosPrecursoras B Linfócitos B madurosLinfócitos TCélulas Natural Killer

% DP (2DP)

1,1 ±0,6 0,3 –2,62,2 ±1,4 0,6 –6.0 4,7 ±2,1 2.0 –9.067 ±6,1 57 –804,3 ±1,4 2.0 –6.02,5 ±1.3 0,8 –5.00,4 ±0.4 <0.1 –2.40,02 ±0.02 <0.030,2 ±0.2 0.01 –0.50,9 ±0.8 0.1 –3.9

2,9 ±1.5 1.6 –6.39,2 ±4.5 2.6 -18.02,8 ±1.4 0.7 –5.0

Orfao et al. Comunicação pessoal 2009

HEMATOPOESE POR CITOMETRIA DE FLUXO

• O estudo da Hematopoese recebeu impulso de desenvolvimenrto da CF com painéis de Ac monoclonais de 4 ou mais cores

• As combinações de Ac permitiram saber a distribuição relativa das células da MO nas maiores linhagens (linfóide e mielóide), as células mais imaturas e as em estágio mais maduro ou específico de diferenciação

PARA QUE CONHECER O NORMAL?

Toda célula neoplásica é uma transformação da célula normal.

Conhecendo-se o que é normal, identifica-se o anormal

Conhecendo-se o que é normal

identifica-se o anormal

Borowitz & Silberman. Cases in Flow Cytometry, 1999

DIFERENCIAÇÃO LINHAGEM ERITRÓIDE

CD 34+

Borowitz & Silberman. Cases in Flow Cytometry, 1999

MARCADORES DE MATURAÇÃO DE SÉRIE ERITRÓIDE EM MO NORMAL

ESTAGIO I ESTAGIO II ESTAGIO III ESTAGIO IV

CD 34+ CD 34+ CD 34 fr CD 34 neg CD 117+ CD 117+ CD 117+ CD 117 fr HLA-DR+ HLA-DR fr HLA-DR fc HLA-DR

neg CD 36 fc/+ CD 36+ CD 36+ CD 36+ CD 105 neg CD 105+ CD 105+ CD 105 fc/- CD 71 fc CD 71 fc CD 71 forte CD 71 forte CD 45 fc CD 45 fc CD 45 fc CD 45 neg

MARCADORES DE MATURAÇÃO DE SÉRIE ERITRÓIDE EM MO NORMAL

ESTAGIO I ESTAGIO II ESTAGIO III ESTAGIO IV

CD 34+ CD 34+ CD 34 fr CD 34 neg CD 117+ CD 117+ CD 117+ CD 117 fr HLA-DR+ HLA-DR fr HLA-DR fc HLA-DR

neg CD 36 fc/+ CD 36+ CD 36+ CD 36+ CD 105 neg CD 105+ CD 105+ CD 105 fc/- CD 71 fc CD 71 fc CD 71 forte CD 71 forte CD 45 fc CD 45 fc CD 45 fc CD 45 neg

MATURAÇÃO NORMAL DAS CÉLULAS ERITRÓIDES EM MEDULA

ÓSSEA

Orfao et al, 2009

DIFERENCIAÇÃO LINHAGEM ERITRÓIDE

Pro eritroblastosEritroblastosEritrócitos

DIFERENCIAÇÃO LINHAGEM GRANULOCÍTICA

CD 34+

Borowitz & Silberman. Cases in Flow Cytometry, 1999

DIFERENCIAÇÃO LINHAGEM GRANULOCÍTICA

Van Lochem et al. Cytometry Part B (Clinical Cytometry) 60B:1–13 (2004)

DIFERENCIAÇÃO LINHAGEM GRANULOCÍTICA

Van Lochem et al. Cytometry Part B (Clinical Cytometry) 60B:1–13 (2004)

DISTRIBUIÇÃO DOS DIFERENTES ESTÁGIOS DE MATURAÇÃO DA

GRANULOCÍTICA EM MEDULA ÓSSEA

POPULAÇÃOMieloblastosPromielócitosMielócitos e Metamielócitos

CD 11b+ CD 13+

Neutrófilos CD 16+ CD 10+

Maduros CD 64 baixo

MÉDIA (%) ± DP0,8 ± 0,5

12 ± 434 ± 7

53 ± 9

50 ± 9

61 ± 10

Orfao et al. Comunicação pessoal 2010

DIFERENCIAÇÃO LINHAGEM MONOCÍTICA

CD 34+

Borowitz & Silberman. Cases in Flow Cytometry, 1999

DIFERENCIAÇÃO LINHAGEM MONOCÍTICA

Van Lochem et al. Cytometry Part B (Clinical Cytometry) 60B:1–13 (2004)

MARCADORES DE DIFERENCIAÇÃO MONOCÍTICA

Orfao et al, 2009

Van Lochem et al. Cytometry Part B (Clinical Cytometry) 60B:1–13 (2004)

DIFERENCIAÇÃO LINHAGEM LINFOCITÁRIA B

CD 38CD 138

Van Lochem et al. Cytometry Part B (Clinical Cytometry) 60B:1–13 (2004)

DIFERENCIAÇÃO LINHAGEM LINFOCITÁRIA B

DIFERENCIAÇÃO LINHAGEM LINFOCITÁRIA T

MOMO TIMOTIMO SPSP

SCSC

CORTEXCORTEX CORTEXCORTEX MEDULARMEDULAR

TIMÓCITO ITIMÓCITO I TIMÓCITO IITIMÓCITO II

TIMÓCITO IIITIMÓCITO IIIHELPER / INDUCERHELPER / INDUCER

MADURO ATIVADO

PRÉ-TPRÉ-T

TdTHLA-DRCD 34

TdTHLA-DRCD 7

TdTHLA-DRCD 7CD 2CD 5CD 6CD 38CD 71

CD 7CD 2CD 5CD 6CD38s CD3 TCRCD 4

CD 7CD 2CD 5CD 6s CD3 TCRCD 4

CD 7CD 2CD 5s CD3 TCRCD 4HLA-DRCD 25

SUPRESSOR / CITOTÓXICOSUPRESSOR / CITOTÓXICO

MADURO ATIVADO

CD 7CD 2CD 5CD 6s CD3 TCRCD 8

CD 7CD 2CD 5s CD3 TCRCD 8HLA-DRCD 25

CD 7CD 2CD 5CD 6CD 38s CD3TCRCD 8

TdTCD 7CD 2CD 5CD 1cCD 3CD 6CD 4 / CD 8CD 38

DIFERENCIAÇÃO LINHAGEM LINFOCITÁRIA T

MOMO TIMOTIMO SPSP

SCSC

CORTEXCORTEX CORTEXCORTEX MEDULARMEDULAR

TIMÓCITO ITIMÓCITO I TIMÓCITO IITIMÓCITO II

TIMÓCITO IIITIMÓCITO IIIHELPER / INDUCERHELPER / INDUCER

MADURO ATIVADO

PRÉ-TPRÉ-T

TdTHLA-DRCD 34

TdTHLA-DRCD 7

TdTHLA-DRCD 7CD 2CD 5CD 6CD 38CD 71

TdTCD 7CD 2CD 5CD 1cCD 3CD 6CD 4 / CD 8CD 38

CD 7CD 2CD 5CD 6CD38s CD3CD 4

CD 7CD 2CD 5CD 6s CD3CD 4

CD 7CD 2CD 5s CD3CD 4HLA-DRCD 25

SUPRESSOR / CITOTÓXICOSUPRESSOR / CITOTÓXICO

MADURO ATIVADO

CD 7CD 2CD 5CD 6s CD3CD 8

CD 7CD 2CD 5s CD3CD 8HLA-DRCD 25

CD 7CD 2CD 5CD 6CD 38s CD3CD 8

Não há nada mais colorido.....

...que o sorriso de uma criança!

OBRIGADA