Imunologia Aplicada

Sorologia

1. Elucidar processos patológicos

2. Diferenciar a fase da doença

3. Diagnosticar doença congênita

4. Selecionar doadores de sangue

5. Selecionar doadores e receptores de órgãos

6. Auxiliar no prognóstico da doença

7. Avaliar a eficácia da terapêutica

8. Verificar o agravamento da patologia

9. Avaliar a imunidade específica naturalmente adquirida ou

artificialmente induzida

Importância da pesquisa de Anticorpos

no diagnóstico individual

1. Estabelecer a prevalência da doença

2. Verificar a Incidência da doença

3. Verificar a erradicação da doença

4. Verificar a reintrodução de novos casos em áreas

consolidadas

Importância da pesquisa de anticorpos

em Inquéritos soroepidemiológicos

1. Como critério de Cura

2. Na definição da etiologia da doença

3. Na seleção de doadores de sangue

4. Em inquéritos epidemiológicos

Importância dos Testes sorológicos na

pesquisa de antígenos

Parâmetros para a validação de

um teste sorológico

Define a presença ou a ausência da doença no

paciente

“GOLD STANDARD TEST”

Mais próximo do verdadeiro estado clínico do

paciente

Testes sorológicos

Parâmetros para a validação de um

teste sorológico

Validade Intrínseca : desempenho de um teste quando

comparado com o teste de referência

Sensibilidade

Especificidade

Eficiência

Validade Extrínseca : real situação da população +

desempenho do teste

Precisão

Acurácia ou Exatidão

Reprodutibilidade

TESTE DOENÇA - Diagnóstico verdadeiro

PRESENTE AUSENTE

POSITIVO Verdadeiros positivos

(VP)

Falsos positivos

(FP)

NEGATIVO Falsos negativos

(FN)

Verdadeiros

negativos

(VN)

TOTAL VP+FN FP + VN

Combinação binária entre resultados prováveis

em um determinado teste e o diagnóstico verdadeiro

da doença

Sensibilidade Especificidade

Eficiência = VP + VP

VP + VN + FP + FN

Porcentagem correta de resultados dos

testes verdadeiros positivos e negativos

Parâmetros para a validação de um

teste sorológico

Validade Intrínseca : desempenho de um teste quando

comparado com o teste de referência

Sensibilidade

Especificidade

Eficiência

Validade Extrínseca : real situação da população +

desempenho do teste

Precisão

Acurácia ou Exatidão

Reprodutibilidade

Validade Extrínseca

Precisão: Concordância dos resultados obtidos quando um

mesmo teste é feito várias vezes (Erro acidental)

Exatidão ou Acurácia: Capacidade do teste em fornecer

resultados muito próximos ao verdadeiro valor do que se esta

medindo.

EXATO E PRECISO

PRECISONÃO EXATO E NÃO PRECISO

EXATO E NÃO PRECISO

Validade Extrínseca

Validade Extrínseca

Precisão: Concordância dos resultados obtidos quando um

mesmo teste é feito várias vezes (Erro acidental)

Exatidão ou Acurácia: Capacidade do teste em fornecer

resultados muito próximos ao verdadeiro valor do que se esta

medindo ("Gold Standard").

Reprodutibilidade: Capacidade de se obter resultados iguais em

testes realizados com a mesma amostra biológica mas realizadas

por pessoas diferentes em locais diferentes

Intrateste : replicatas do mesmo material

Interteste: Dias diferentes e em laboratórios diferentes

Parâmetros para a validação de um

teste sorológico

Validade Intrínseca : desempenho de um teste quando

comparado com o teste de referência

Sensibilidade

Especificidade

Eficiência

Validade Extrínseca : real situação da população +

desempenho do teste

Precisão

Acurácia ou Exatidão

Reprodutibilidade

Aplicação de Testes Diagnósticos

Limiar de Reatividade ou “ cut off ” - Região de

Corte

Valor acima do qual os resultados são considerados positivos e indicam os

doentes

Valor abaixo do qual os resultados são considerados negativos e indicam os

não doentes

Para cada “cut off “ estabelecido teremos uma sensibilidade e uma

especificidade diferentes

CURVA DE DISTRIBUIÇÃO DA FREQUÊNCIA DE

TÍTULOS NORMALMENTE OBSERVADA NA

POPULAÇÃO

Banco de sangue teste para detectar ....

Ponto de máxima sensibilidade (FP)

Laboratório de análises:Teste para detectar...

Doença de alta prevalência

Ponto de máxima especificidade (FN)

Sensibilidade: “verdadeiros positivos".

Testes com alta sensibilidade ( 99%) podem, ao se obter resultado negativo, excluir a

presença da condição ou doença.

Especificidade

"verdadeiros negativos".

Testes com alta especificidade ( 99%) e que são negativos em indivíduos sadios ou

que apresentam sintomas similares mas não apresentam a condição/doença, são

muito úteis para confirmar o diagnóstico.

1

8

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0

1

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9

7

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0

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4

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1

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6

6

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1

1

9

7

9

Testes Sorológicos

Produção de Anticorpos

Testes sorológicos

Resposta Imune

Anticorpos

Proteína Imunização

Síntese de Anticorpos Policlonais

Baço

B B BB

B

BB

B

Cesar Milstein

1927-2002

Georges Khöler

1946-1995

Nobel Medicina

1984

1975

Síntese de Anticorpos Monoclonais

http://www.accessexcellence.org/RC/VL/GG/monoclonal.html

Síntese de Anticorpos Monoclonais

B

M M M

H

B

M

Fusão

polietilenoglicolB B BB

H

HH

B B B

M

H

H

H

HAT

Policlonal x Monoclonal

Monoclonal

Anticorpos Homogêneos

Respondem a um único epítopo do Ag

Maior afinidade

Pertencem a uma única Classe

Hibridoma – Prolifera em Cultura

Policlonal

Anticorpos heterogêneos

Responde a epítoposdiferentes do Ag

Diferentes afinidades

Podem ser de Classes diferentes

Célula B – Não Prolifera emCultura

MAB

Identificação de marcadores fenotípicos

Imunodiagnóstico

Diagnóstico e terapia de tumores

Análise funcional de moléculas de superfície e secretadas