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PAPELNEUROPROTETORDAADENOSINANAEPILEPSIA
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24HAPSSE 72DIASAPSSE
Figura6.HistoqumicaporFluoroJadeB(B,F,D,H)ecoloraocomcresilvioleta(A,E,C,G)emCA3ehilodogirodenteado24he7diasapsainduodoSEpelapilocarpinaemratosdogrupoPiloeRPia+Pilo.NotarneuroproteoemCA3ehilodogrupoRPia.Cortescoronaisde
tencfalocom40memvibr omo.Camundongos deficientes de adenosina cinase so mais resistentes ao processo
lesionalinduzidoporcrisesdoquecamundongostransgnicosquesuperexpressam
adenosinacinase(Lieta.,2008).Aastroglioseestpresentenocrebroepilpticoe
contribui para a gerao de crises pormeio de vriosmecanismos. A localizao
espaotemporal de astrogliose, aumento na expresso de adenosina cinase e
ocorrncia de crise eletrencefalografica em modelo experimental com crises
restritas a essa rea comprometida, foramasprincipais evidenciasque levaramo
autoraproportalhiptese.Almdesseestudo,abordagensinvitrotambmderam
suporte para indicar a participao de distrbios na adenosina cinase na gerao
dascrises(Etheringtonetal.,2009).Aaplicaodetcnicasdeterapiagnicacom
implante intracerebral de clulas capazesde liberar adenosina tem sido apontada
comonovaabordagemteraputicaparao tratamentodasepilepsias lesionaiscom
TPICOSDEACTUALIZACINENNEUROBIOLOGA
crises refratrias ao tratamento medicamentoso, mas os testes esto em fase
r
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expe imental.
Esta reviso mostra a complexidade do sistema adenosinrgico e que so
necessriosmuitosestudosparaelucidaropapeldaadenosinanaepileptognese.
R FE ERENCIAS
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319
22
INTERACCIONESFRMACODIANACOMOBASEPARAELDISEODENUEVOSFRMACOS
EscubedoE,CamarasaJ,PubillD.
UnitatdeFarmacologiaiFarmacognsia,FacultatdeFarmacia,InstitutdeBiomedicinadelaUniversitatdeBarcelona,Barcelona,Espaa.
Recientementehanaparecidoempresasdeserviciosqueofrecenlaexternalizacin
delanlisisinformticodedatosbiolgicostantoaempresasfarmacuticascomoa
centros de investigacin que no cuentan con los expertos necesarios para cubrir
todassusnecesidadesenbiologacomputacional.Dentrodeloscamposquepuede
cubrir el rea de Investigacin y Desarrollo de una empresa de servicios
informticos,destacaeldiseoracionaldefrmacos.
Eldiseodefrmacos,tambindenominadoavecesdiseoracionaldefrmacos,
es el proceso cientfico que tiene lugar para encontrar nuevos medicamentos
basadosenelconocimientodeladianabiolgica.Elobjetivoodestinodeunfrmaco
tpicamente es una molcula clave; o una va metablica particular, la cual es
especfica de una enfermedad o patologa; o apunta a la contagiosidad o a la
supervivencia de un microbio patgeno. Algunas estrategias procuran detener el
funcionamientode una rutametablica alteradahaciendoqueunamolcula clave
dejedefuncionar.Losfrmacospuedenserdiseadosparaunirsealareginactiva
deunamolculaespecficaeinhibirla.Pero,adems,estosfrmacostambintienen
queserdiseadosdetalmaneraquenoafectenningunaotramolculaimportante
quepuedatenerunaaparienciasimilaralamolculaclave(especificidad).
A diferencia de los mtodos tradicionales de descubrimiento de frmacos que se
basan en las pruebas de ensayo y error de las sustancias qumicas en las clulas
cultivadasolosanimales,eldiseoracionaldemedicamentospartedelahiptesis
quelamodulacindeunadianabiolgicaespecficapuedetenervalorteraputico.
TPICOSDEACTUALIZACINENNEUROBIOLOGA
Paraqueunaprotenaseaseleccionadacomodianafarmacolgicaserequierendos
piezas esenciales: la evidencia de que la modulacin de la misma tiene valor
teraputicoyquedichadianaes"drugable".Estosignificaqueescapazdeunirsea
una molcula pequea y que su actividad puede ser modulada por la molcula
320
pequea.
Enelsentidomsestrictopues,lafrase"diseodefrmacos"eshastaciertopunto
equivocada. Lo que realmente se entiende por diseo de frmacos es diseo de
ligandos.stesebasaentcnicasdemodeladoparalaprediccindelaafinidaddela
unin del ligando a la diana. As lo que se disea son pequeas molculas
complementariasenformaycargaaladianafarmacolgicaconlaqueinteractan,
por lo que se unirn a ella con elevada afinidad. Sin embargo, haymuchas otras
propiedades tales como la biodisponibilidad, la vidamediametablica, los efectos
secundarios, etc., que primero deben optimizarse antes de que un ligando puede
convertirseenunfrmacoseguroyeficaz.Estasotrascaractersticassondifcilesde
optimizarutilizandolascitadastcnicas.
Sonejemplosdediseoracionaldefrmacoselimatinib,uninhibidordelatirosin
kinasadiseadoespecficamenteparalaprotenadefusinbcrablcaractersticade
las leucemias cromosoma Filadelfia positivas (leucemia mieloide crnica y
ocasionalmentelaleucemialinfocticaaguda).ElImatinibdifierefundamentalmente
de otrosmedicamentos anticancerosos anteriores en que la mayor parte de esos
agentes quimioteraputicos simplemente apunta hacia las clulas de rpida
multiplicacin, y no diferencian entre clulas cancerosas y clulas sanas de otros
tejidos.Porelcontrario,elimatinibpresentaunanotableselectividadensusefectos.
Otrosfrmacosdiseadosbajounconocimientoespecficodeladianafarmacolgica
han sido: Cimetidina, el prototipode agonistadel receptorH2a partir del cual se
desarrollaronlosmiembrosposterioresdeestaclase,losinhibidoresselectivosdela
COX2(AINE),losinhibidoresselectivosdelarecapturadeserotonina,elZanamivir
(antiviral)ylaEnfuvirtide(inhibidordelaentradadelVIH)
DISEO(RACIONAL)DEFRMACOS
Enlaltimadcada,elnmerodemolculascandidatascomonuevosfrmacosha
descendido con respecto a dcadas anteriores. Para paliar este problema, la
INTERACCIONESFRMACODIANACOMOBASEPARAELDISEODENUEVOSFRMACOS
estrategia de las empresas farmacuticas pasa necesariamente por aumentar la
capacidad de descubrimiento de compuestos. Esto se puede realizar in vitro
mediante tcnicas de bsqueda de alto rendimiento (HighThroughput Screening,
HTS) o bien in silico utilizando tcnicas computacionales de simulacin de
interaccionesentreposiblesfrmacosylaprotenadiana.
321
1. TSinvitro
El cribado de alto rendimiento es un mtodo de investigacin sistemtica
indiscriminada de molculas para la bsqueda y descubrimiento de nuevos
frmacos.Lacombinacindelarobticaactual,losavancesenelprocesamientode
datos y la sensibilidad de los detectores, as como la mejora de los aparatos
automticoshapermitidoa los investigadoresusarel cribadodealto rendimiento
comounaherramientarutinariaparahacermillonesdetestsbioqumicos,genticos
o farmacolgicos en un breve periodo de tiempo. La utilizacin de este proceso
permite identificar rpidamente compuestos activos, anticuerpos o genes que
modulan una va bioqumica de inters. Los resultados de estos experimentos
proporcionanunpuntodepartidaparaeldiseodefrmacosyparalacomprensin
H
delpapelquedesarrollanciertosprocesosbioqumicos.
Unapiezaclaveypresenteentodoensayodecribadodealtorendimientoeslaplaca
donde se realizan los experimentos. Esta placa es un pequeo contenedor,
normalmente de plstico, dividida en varios pozos en los que se adicionan en el
orden correspondiente los diferentes reactivos utilizados en el ensayo. Para
preparar cualquier ensayo de cribado de alta eficacia se llenan los pocillos de la
placa con la entidad biolgica que se desea estudiar, ya sean protenas, clulas,
embriones, etc. A continuacin se adicionan los reactivos y se deja reaccionar
durante el tiempo necesario y, pasado este intervalo, se hacen las medidas
correspondientesa travsdecadaunode lospocillosde laplaca,yaseade forma
manual(cuandolamedidasebasaenlaobservacinmicroscpica)oautomatizada.
En este ltimo caso la toma de datos se puede automatizar y existen mquinas
especializadas que miden fluorescencia, absorbancia u otros parmetros
fisicoqumicos relevantespara el ensayo.Unamquina conunaelevada capacidad
de anlisis puede medir decenas de placas en pocos minutos, generando
rpidamente miles de datos experimentales. Los resultados obtenidos permiten
TPICOSDEACTUALIZACINENNEUROBIOLOGA
hacer una primera seleccin de los compuestos que presentan el efecto deseado
(llamados hits) y separarlos de aquellos que no presentan estas propiedades. A
continuacin, con esta coleccin de compuestos seleccionados se realizan
experimentos adicionales para confirmar y refinar las observaciones. As este
procedimiento sirve para identificar nuevos "cabezas de serie", o molculas
prototipopertenecientesaunaclaseestructuraldeterminadayconpotencialenuna
rea teraputica concreta. Modificaciones qumicas subsiguientes (optimizacin)
tienden a producir "anlogos" de esas estructuras con unamayor actividad o una
menor incidenciadeefectoscolaterales(leads).Estemtododedescubrimientode
nuevosagentesconactividadbiolgicaesinteresantedesdeelpuntodevistadeque
puede convertir a nuevas clases estructurales de compuestos en frmacos
potencialespero,alestarbasadofundamentalmenteentcnicasdeensayoyerror,
consumemucho tiempoy requieregrandes recursoseconmicos.Elporcentajede
xitossehaestimadoinferiora1porcada10.000compuestossintetizados[16].
322
2.Ins lico
Todo un arsenal de nuevas metodologas, con un importante componente
matemtico y computacional, hacen uso de la informacin sobre la estructura de
macromolculas diana para crear modelos tridimensionales de receptores y
ligandos, estudiar sus preferencias conformacionales, dilucidar la naturaleza y
magnitud de las fuerzas interatmicas que gobiernan su interaccin, y analizar el
comportamiento dinmico de cada molcula por separado y de sus respectivos
complejos.Estosprocedimientosayudanacomprendermejorelcomportamientode
estos sistemas a nivel submolecular, permiten establecer comparaciones entre
teora y datos experimentales, e incluso permiten realizar predicciones
cuantitativas, por lo que constituyen herramientas muy poderosas para disear
i
nuevasmolculasconafinidadporundeterminadoreceptor[18].
La principal rea de conocimiento que se dedica a este estudio es la qumica
computacional cuyo objetivo se ha extendido al diseo de compuestos que
presenten no slo una elevada afinidad por su receptor, sino tambin una
optimizacin de sus propiedades farmacocinticas, que aseguranun balance en la
absorcin,distribucinymetabolismodelfrmaco,juntoasuexcrecinytoxicidad.
INTERACCIONESFRMACODIANACOMOBASEPARAELDISEODENUEVOSFRMACOS
Sabemosquelaaccinfarmacolgicadeuncompuestosebasaenlainteraccinyel
reconocimientoentreesteligandoysureceptor.Laafinidadentreligandoyreceptor
refleja el balance existente entre bsicamente cuatro factores. En primer lugar, la
afinidad depende del conjunto de interacciones establecidas entre los grupos
qumicospresentesenelligandoconlosresiduosdelreceptor.Dichasinteracciones
comprenden una gama de contribuciones diversa tanto en su contribucin
energtica como en su direccionalidad, incluyendo entre otras puentes salinos,
puentesdehidrgeno,interaccionesdipolodipoloodevanderWaals.Ensegundo
lugar, la afinidad est afectada por la desolvatacin de ligando y receptor en el
procesode formacindelcomplejo.En tercer lugar, la interaccinpuedeconllevar
cambios estructurales tanto en el ligando como en el receptor. Finalmente, otro
factoraconsiderareselcambioentrpicoasociadoalaformacindelcomplejo,as
comoalaprdidadeflexibilidadconformacionalintramolecular.Estosltimostres
factorestienenunimpactonegativosobrelaafinidad,quedebesercompensadocon
nt
323
lacontribucinpositivadebidaalaenergadeinteraccine religandoyreceptor.
Elxitodeldiseode frmacos resideen laoptimizacindelbalanceentredichos
factores.Elloconllevalaconcepcindeunaestructuraqumicaconunadistribucin
espacialdegruposfuncionalesquemaximicelacomplementariedadentreligandoy
receptor. As, pues, cabe establecer una relacin subyacente entre la actividad
biolgicadeuncompuestodadoconelgradodecomplementariedadexistenteentre
su estructura qumica y el receptor. Es lo que denominamos comnmente
reconocimientoafinidad[14].
2.1Cribadovirtual
Eldesarrolloylanzamientodeunnuevofrmacoalmercadorequierealaindustria
farmacutica unamedia de 12 a 20 aos y unos costes de aproximadamente 850
millones de euros. Las tcnicas de cribado virtual resultan baratas (ahorran en
comprade reactivos y robotizacin), rpidas, y permiten tener en cuenta un gran
nmero de compuestos in silico del orden de billones, cifra impensable
experimentalmente.Tpicamente,enunacascadadecribado,unaquimiotecavirtual
quecontieneunas1061012estructurasessucesivamente filtradayreducidaauna
coleccin de unos 1001000 candidatos. Por ello, se puede considerar un buen
complementopara las tcnicasdeHTScomo fuentedeobtencindenuevos leads.
TPICOSDEACTUALIZACINENNEUROBIOLOGA
Ahora bien, si no se aplican restricciones, el cribado virtual puede sugerir
potencialeshitsnoaccesiblessintticamente.Sinembargo,proporcionainformacin
acerca del modo de interaccin frmacodiana y es un buen criterio para la
c n
324
prioriza indemolculasasi tetizar[7].
Existen dos aproximaciones al cribado de compuestos. Cuando se dispone de la
estructura tridimensional de la diana teraputica, bien obtenida por mtodos
experimentales(cristalografaderayosXoRMN)obienatravsdelaconstruccin
demodelosmoleculares,sesiguelametodologadediseodeligandosbasadoen
su estructura de la diana o structurebased. Se incluyen aqu las tcnicas de
docking o acoplamiento (intento de encontrar el mejor acoplamiento entre dos
molculas: un receptor y un ligando). En caso contrario o en caso de que se
prescinda, el cribado virtual de ligandos se puede realizar mediante bsquedas
ligandbased,basadasenel anlisisy comparacindepropiedadesmolecularesy
datos de afinidad por el receptor para ligandos conocidos, sin tener en cuenta la
estructuradedichoreceptor[15,17].Se incluyenaqu las tcnicasdebsquedade
similitud mediante descriptores 2D/3D, QSAR (Quantitative StructureActivity
Relationshiporelacincuantitativadeloscambiosestructuralesdeunconjuntode
compuestos con los cambios en actividad), desarrollo de modelos farmacofricos
(identificacin del conjunto de caractersticas estructurales de un ligando
directamente relacionadas con los sitios claves de interaccin de un receptor), y
tcnicasdeshapematching(superposicindelaformadedosligandos).Porlotanto,
las herramientas de cribado virtual requieren inevitablemente conocer o bien la
actividaddealgunoscompuestosolaestructuradeladianabiolgica.
Una cascada tpica de cribado virtual contiene diferentes pasos de filtrado que
conllevanaunareduccindelnmerodecompuestoscandidatosaserexaminados
experimentalmente, como mnimo en nueve rdenes de magnitud, acabando con
unos 1000 compuestos para su ensayo clnico. Dichos filtros se aplican de forma
secuencial de acuerdo con el nivel de requerimientos computacionales que utiliza
cadaunadelastcnicas(demenoramayorcostedeclculo)ylacomplejidaddela
informacin necesaria para cada una de ellas. Para la identificacin de hits es
necesario partir del anlisis conformacional de las estructuras de la quimioteca
generada. A partir de ellas se realiza un cribado basado en la estructura o en el
INTERACCIONESFRMACODIANACOMOBASEPARAELDISEODENUEVOSFRMACOS
ligando. A partir de ah se seleccionan las molculas que poseen estructura y
propiedadesde frmaco(drug likeness),as comopropiedadesADMET(Absorcin,
Distribucin, Metabolismo, Eliminacin y Toxicidad) de inters con el fin de
optimizarsimultneamentelapotenciaylafarmacocintica.Labsquedasepuede
refinar, aplicando filtros de similitud 2D/3D y tambin mediante modelos
farmacofricosparaseleccionarcompuestosfocalizadoshaciauntipodeestructura
concreta necesaria para la interaccin con la diana de estudio. Una vez se ha
focalizado suficiente la quimioteca se procede con la fase de descubrimiento y
325
optimizacindeleads[19].
2.1.1.Diseobasadoenligando
Los primeros intentos dirigidos a incrementar la probabilidad de sintetizar un
anlogo activo o de encontrar un nuevo cabeza de serie se basaron en encontrar
correlacionesentrelaestructuraqumicadeunaseriedecompuestosysuactividad
biolgica. De ah surgieron las famosas siglas QSAR, acrnimo de Quantitative
StructureActivityRelationships.Seutilizaelconceptodefarmacforoparadesignar
elconjuntoderequisitosgeomtricosyqumicosesencialesquedebepresentarun
compuesto para poder interaccionar de forma efectiva con su diana
macromolecular. Es un hecho bien conocido que ante un receptor de estructura
desconocida (el problema ms frecuente hasta hace pocos aos), la variacin
sistemtica de la estructura qumica de sus ligandos lleva rpidamente a la
conclusin de que algunas partes de la molcula son crticas para la actividad,
mientras que otras pueden modificarse y su alteracin slo conlleva pequeas
variaciones de afinidad. Estas diferencias, que semanifiestan con facilidad en los
resultados de los ensayos de fijacin de ligandos marcados (binding) o de otras
pruebas farmacolgicas, llevaronapostularelconceptode farmacforo,entendido
como el conjunto de grupos qumicos que todas las molculas activas tienen en
comn y que son esenciales para el reconocimiento por parte del receptor. Esta
formulacin es semejante a la analoga entre llave y cerradura que sirvi
inicialmenteparacomprender lacomplementariedadentre lossitiosactivosde las
enzimasysussustratos.
Centrado el concepto de farmacforo podemos ya abordar losmtodos QSAR. La
premisa fundamental de los mtodos QSAR es que una propiedadmacroscpica
TPICOSDEACTUALIZACINENNEUROBIOLOGA
como la afinidad entre ligando y receptor est asociada en ltimo trmino a la
naturaleza, distribucin espacial y caractersticas qumicas presentes en la
estructuramoleculardel ligando,quedebenmaximizar la complementariedadcon
los residuos que definen el centro de unin del receptor. Por ello, el objetivo
principal consiste en establecer una hiptesis de farmacforo en base a la com
paracinentre lasdiferenciasdeactividadbiolgicaparaunaseriedecompuestos
que actan sobre la misma diana y las diferencias estructurales entre dichos
326
ligandos[5].
As,lasrelacionesQSARpersiguenidentificarlarelacinexistenteentrelaactividad
biolgica y las caractersticas qumicas especficas presentes en la estructura de
ligandos que interaccionan en el mismo centro de unin del receptor.
Tradicionalmente,losmtodosQSARutilizanunacombinacindedescriptoresque
reflejan laspropiedadeselectrostticas,estricasehidrofbicasde losgruposqu
micos presenten en el ligando. De esta forma, dos compuestos cuya estructura
qumica sea altamente similar, y por tanto su forma y volumen, as como su
r rpola idadylipofilia,debenda lugararespuestasbiolgicasparecidas.
Los mtodos QSAR pueden dividirse en dos grandes categoras [16]: mtodos
topolgicos/estadsticos y mtodos de modelado molecular. En la aproximacin
topolgicaslosetieneencuentalaestructuraqumica"plana"delamolculayse
utilizan tcnicas estadsticas o de reconocimiento de patrones para encontrar las
QSAR.Enlosmtodosdemodeladoseconsideranlaspropiedadesdelasmolculas
en tres dimensiones y son importantes, entre otros, el anlisis conformacional, la
mecnica cuntica, los campos de fuerzas, la termodinmica estadstica, y los
grficos moleculares interactivos. Estos ltimos permiten la representacin y
manipulacin de las molculas en tres dimensiones, lo que proporciona una
informacin espacial que es esencial para comparar molculas y para estudiar la
interaccinentre ligandosyreceptoresmacromoleculares [8].Es loqueseconoce
como tcnicas 3DQSAR, que utilizan como propiedades las medidas directas de
camposmolecularesenregionesconcretasdelespaciotridimensionalquerodeaal
ligando con objeto de explicar la actividad biolgica. Adems, mientras que las
tcnicasQSAR estn limitadas a series estructuralmente similares de ligandos, las
INTERACCIONESFRMACODIANACOMOBASEPARAELDISEODENUEVOSFRMACOS
tcnicas3DQSARpermitenlacomparacindecompuestosconestructurasqumicas
327
diversas[5].
2.1.2.Diseobasadoenladianaproteica
Cuando la estructura de la diana es conocida, usualmente a partir de estudios de
cristalografa de rayos X, por resonancia magntica nuclear (RMN) o bien por
tcnicas bioinformticas como prediccin de estructura basada en homologa de
secuencia, la informacin acerca de la estructura atmica del centro de unin
permiteplantearnuevasaproximacionesaldiseodefrmacos.As,enprimerlugar
cabeplantearse laposibilidadde identificar compuestos (hits) que aunque tengan
una actividadmoderada (por ejemplo, una concentracinpara inhibicindel 50%
delorden105M),aportenunaestructuraqumicanovedosanoexplorada.Porotra
parte, el conocimiento estructural del receptor abre la posibilidad de examinar la
introduccin de cambios estructurales en el ligando con objeto de optimizar su
afinidad,hastaalcanzarvaloresenelrangonM(leads).
Paraobtenerunbuensistemadediseoracionaldefrmacosmediantetcnicasde
simulacincomputacionalbasadasenladianaesnecesariodisponerdeunaseriede
subsistemasbiendefinidos:
A)Unprocedimientodegeneracindevariabilidad(qumicacombinatoriainsilico)
que permita partir de un conjunto inicial de miles o millones de compuestos
iniciales.
B)Unmodelocomputacionalestructuraldemuyaltacalidaddelcentroactivodelas
protenasdiana,parapodersimularlasinteraccionesconlosfrmacosdeunaforma
fiable,congarantasdexito.
C)Unmtododeanlisisyfiltradodelasinteraccionesentrelasmolculasiniciales
ylaprotenadiana(mtodosconocidoscomodeacoplamientooencajeodocking).
D) Una tcnica que permita el refinamiento final de aquellas molculas
seleccionadas mediante el anlisis fino de las interacciones a nivel atmico
(dinmicamolecular).
a.Generacindevariabilidad
Como punto de partida se necesita una base de datos de grupos funcionales
qumicos que puede obtenerse, bien de repositorios privados de empresas
farmacuticas,biendebasesdedatospblicas.Unbuenejemplodeestoltimoes
TPICOSDEACTUALIZACINENNEUROBIOLOGA
ChEBI (Chemical Entities of Biological Interest; http:// www.ebi.ac.uk/chebi), con
casi550.000compuestosaccesibles.Acontinuacinesnecesarioconvertircadauno
deestoscompuestosaunformatotridimensionalenelqueparacadaestructurase
calculenunaseriedeconfrmeros(variantesestructuralesen3D)dependiendode
lalibertaddegirodecadaenlacedelamolcula.Enestemomento,acadamolcula
seleasignanparmetrosdepropiedadesfisicoqumicasquepermitirnsuusoenlos
pasosdefiltradoposteriores.Decadaunadeestasmolculassegenerarnvariantes
medianteunsistemadecombinatoriaqumicavirtual.Enesquema,separtedeuna
libreradesustituyentesdevarioscientosdepequeasmolculas(talescomoCH3,
COOH,etc.)quepuedenserutilizadosendiferentes repeticionesy combinaciones.
La librera est ordenada en funcin de las caractersticas fisicoqumicas de los
gruposfuncionalesrepresentados(aminas,aldehdos,isocianatos,tioles,etc.)yper
mitelasustitucinsistemticadecualquiergrupofuncionaldelamolculaoriginal
porunoounacombinacinde lospresentesen labasededatos.Deesta forma,y
comoresultadofinaldeestepaso,seobtieneunalibrerademillonesdecompuestos
artidaparalabsquedadefrmacos.
328
queseutilizarcomopuntodep
b.Modeladodecentrosactivos.
Unpuntocrucialparapoderdisearfrmacosenelordenadorestenerunaimagen
precisade las caractersticas fisicoqumicasdel centroactivode laprotenadiana.
Esto incluye la posicin espacial de los diferentes tomos que lo constituyen as
comounclculodelaspropiedadesdelasuperficie:electrostticas,deaccesibilidad
b calsolvente,hidrofo icidad,et .
La situacin ideal pasa por obtener una estructura experimental de la protena
(mejor an si sta se obtiene en presencia de un ligando o inhibidor) mediante
tcnicas de Cristalografa de Rayos X o de Resonancia Magntica Nuclear. Las
estructurasconocidasquehansidoresueltassepuedenobtenerdelabasededatos
pblicaProteinDataBank(PDB;http://www.pdb.org)quecuentaenlaactualidad
con64.500entradas.Sinembargo,el tamaodelProteinDataBankesapenasuna
nfima fraccin de todas las protenas conocidas; por ejemplo, la base de datos
Uniprot (Universal protein resource; http://www.uniprot.org), cuenta en la
actualidad con ms de 11.160.000 secuencias de protena. Por esta razn, en
ausenciadeunaestructurareal,sesuelenutilizarmtodosdeaproximacinterica
INTERACCIONESFRMACODIANACOMOBASEPARAELDISEODENUEVOSFRMACOS
329
alaconformacindelcentroactivo.EstosmtodossedenominandeModeladopor
Homologa, el cual puede llevarse a cabo si la protena problema cuenta con un
homlogoyaincluidoenPDB(esdecir,otraprotenaconunmismoorigenevolutivo
yportantoconlamismaosimilardisposicinespacial).Sinoexistetalhomlogode
estructuraconocidaesnecesariorealizaraproximacionesmsarriesgadasbasadas
encompatibilidadsecuenciaestructuraomediantetcnicasdereconocimientode
plegamiento(othreading).Enlaactualidadexistetodaunavariedaddemtodos
de prediccin que utilizan bien Modelado por Homologa (MODELLER, SWISS
MODEL) [2, 4, 15] o tcnicas hbridas de Modelado por Homologa y threading
(PHYRE,SAMT08,FUGUE,etc.)[1],disponiblesendiferentesservidorespblicosy
conunosnivelesrazonablementeelevadosdefiabilidad.
MediantetcnicasquecombinanestosmtodosyotrosdeDinmicaMolecular(ver
ms adelante) se pueden llegar a modelar interacciones protenaprotena y
localizarinhibidoresysustratosencentrosactivosdeprotenasdianadeestructura
desconocida[10].
c.Anlisisdeinteracciones
Es evidente que para que la unin entre un ligando y su centro activo sea
energticamenterentableelcomplejoformadoporamboshadesermsestableque
cadaunadelaspartesporseparado;esteeselllamadoprincipiodemnimaenerga.
Enotraspalabras,unaasociacinserrentablesilossociosgananmsactuandode
formaconjuntaqueloquegananporseparado.Elsabercmoocurreestaunin,as
comolacaracterizacinycuantificacindelosdistintoseventosquetienenlugaren
tal proceso, es un rea de investigacin en creciente desarrollo y tiene lugar
Docking.primordialmentemediantelosdenominadosmtodosde
Un protocolo de acoplamiento/encaje molecular o docking se caracteriza
tradicionalmentepordosaspectos:elencajeensmismo,esdecir,elmtodosegui
doparamuestrearelespacioconformacionaldelcomplejoligandoprotenadiana,y
lafuncindepuntuacin(score)utilizadaparaevaluarlaafinidaddelainteraccin
entre ambos. Aunque existen diferentes implementaciones de algoritmos para
encontrar configuraciones protenaligando de calidad ptima, actualmente todos
los algoritmosmodernos de encaje modelan el ligando como flexible, dejando de
ladolasaproximacionesmsprimitivasenlasqueelligandoseconsiderabargido.
TPICOSDEACTUALIZACINENNEUROBIOLOGA
As,porejemplo,elprogramadeDockingdelibredisposicinAutoDock4.2usatres
tipos distintos de algoritmos: La simulacin de calentamientoenfriamiento de
Montecarlo,eltradicionalalgoritmogenticoyunhbridodelmismo(Lamarckian
genetic algorithm) cuyo fundamento puede consultarse en
://es.w
330
http://es.wikipedia.org/wiki/Simulated_annealingyhttp ikipedia.org/wiki/
Algoritmo_gen%C3%A9tico. En cuanto a la funcin de scoring deAutoDock 4.2 se
basaenunanlisisderegresinlineal,elcampodefuerzasAMBERylainformacin
disponible de toda una serie de complejos protenaligando con contantes de
afinidadconocidas[12].
micamoleculard.Refinamientomediantedin
La Dinmica Molecular (MD; Molecular Dynamics) es una tcnica de simulacin
computacional en la que las interacciones entre tomos y molculas se analizan
duranteperiodosdiscretosdetiempo,permitiendosumovimientodeacuerdoalas
fuerzas fsicasquegobiernandichas interacciones.Enel casodequesedeseeuna
imagenmuchoms fina, se utiliza una variante conocida como InterfazMecnica
Cuntica/MecnicaMolecular(QM/MM;QuantumMechanics/MolecularMechanics),
muchomscostosacomputacionalmenteperoqueproporcionauntratamientoms
realista de los enlaces entre tomos, permitiendo la rotura y formacin de com
puestos qumicos, imitando as el proceso enzimtico que tiene lugar en el centro
activodelaprotenadeinters.ElusodelastcnicasdeMDyQM/MMarrojacomo
resultadounavisualizacindelmovimientodelossustratosnaturalesylosfrmacos
permitiendoelredelineadodelosmismosamododeretroalimentacindelsistema
de diseo y filtrado de compuestos. Asimismo, la tcnica de QM/MM permite la
obtencin de modelos de las estructuras intermedias que se forman durante los
procesos enzimticos. stas, generalmente poseedoras de una cierta estabilidad
energtica,suelenserunpuntodepartidaexcelenteparaeldiseodefrmacos,ya
queencajandeformaparticularmenteadecuadaenelcentroactivo.
Comoresultadoglobaldelprocesodediseodefrmacosmediantefiltradovirtual,
seobtieneidealmenteunacoleccindeunasdecenasocentenasdecompuestos(a
partirdelosmillonesdemolculasiniciales)ordenadosenfuncindesupotencial
actividad y para cada uno de los cuales se ofrece un posiblemodelo dinmico de
interaccin.Unavezsepruebaenellaboratoriolaactividadrealdelosmismosenel
INTERACCIONESFRMACODIANACOMOBASEPARAELDISEODENUEVOSFRMACOS
tubodeensayo, los resultadosexperimentales sona suvez fuentede informacin
que se utiliza para el rediseo del protocolo virtual, permitiendo su refinamiento
continuo[6].
331
2.2.Prediccinde propiedadesADMET
Antes de seguir en el proceso de desarrollo de un nuevo frmaco es necesario
evaluar a priori las propiedades farmacocinticas, con el fin de excluir aquellos
compuestos que puedan tener problemade biodisponibilidad, unametabolizacin
inadecuadaobiendarlugaraproblemasdetoxicidad.Enestesentido,laposibilidad
dedisponerdefiltrosadecuadosquepermitanfocalizarelesfuerzoexclusivamente
encompuestosconbuenascualidadesdefrmacoesdevitalimportanciaafindere
ducirelenormecosteasociadoaldesarrollodeunnuevomedicamento.Granparte
deestapreocupacincabeatribuirlaalosestudiosdeLipinski[9],quiensugiriun
conjuntodereglasempricasquedebareuniruncompuestoparaserconsiderado
como druglike, tales comounamasamolecular inferior a500,un coeficientede
particinaguainferiora5,unnmerodegruposdadoresinferiora5,yunnmero
de grupos aceptores de puente de hidrgeno inferior a 10. El impacto de estos
estudioshasidotangrandequehamotivadosuextensinaotraspropiedades,como
la capacidad de frmacos que deben actuar en el sistema nervioso central para
atravesar la barrera sangrecerebro. La identificacin de las posibles
biotransformacionesmetablicasquepuedesufrirunfrmacoesrelevantedecara
comprender su eficacia farmacolgica. Por ello, se est dedicando un notable
esfuerzoenlaprediccindelosprocesosmetablicosquepuedesufriruncandidato
a frmaco en la fase de descubrimiento, y en base a dicha informacin decidir si
dichocompuestodebesereliminadoobiensiesnecesariomodificarsuestructura
para incrementar su estabilidad qumica. Un ejemplo de dicho esfuerzo es el
programaMetasite[3],quepermiteexplorarenbasealaestructuradelligandoposi
blesmodificacionesmetablicasasociadasasuinteraccinconcitocromos.
Laprediccindelatoxicidaddeuncompuestoesparticularmentedelicada,pueslos
efectos txicos dependen en gran medida de diversos factores, como el rgano
dondeseencuentraladianateraputicaydeltiempoconsiderado[11].Noobstante,
entre las reas exploradas cabemencionar la posible aparicin de efectos txicos
debidoa lafaltadeselectividaddel ligando,porcuantoellopermitesuinteraccin
TPICOSDEACTUALIZACINENNEUROBIOLOGA
con dianas diferentes de aqulla para la cual fue diseado. Ello es especialmente
relevanteendianasquepertenecena familiasdeprotenasrelativamentegrandes,
tales como quinasas, proteasas o receptores nucleares. En estos casos, es posible
plantearunscreening inversoconobjetodedeterminarlacapacidaddeunligando
einteractuarcondiversosposiblesreceptores[13].
332
d
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1
23
BIODISPONIBILIDADYBIOEQUIVALENCIADEMEDICAMENTOS
FagiolinoP,VzquezM,IbarraM.
DepartamentodeFarmacologayBiofarmacutica FacultaddeQumica,UniversidaddelaRepblicadeUruguay,Mon evideo,Uruguay.
,t
INTRODUCCIN
La sociedad necesita medicamentos eficaces y seguros, los cuales requieren ser
investigados con aceptable rigurosidad. La inversin y el riesgo que esta tarea
requiere,hanllevadoaotorgarlealaempresacreadoradelmedicamentounperodo
de comercializacin protegida (patente de invencin). Pasado ese lapso, y
comprobadas las virtudes teraputicasdel producto, se generannuevos intereses:
1)de empresas farmacuticas para comercializar similares al original; y 2)de la
propia sociedadpara reducir los costosde tratamientos conelmismo ingrediente
activo.Paraquelalibrecompetenciasatisfagaelinterssocial,deabaratamientode
costos y mayor accesibilidad para la poblacin, se ha establecido subrogar la
investigacin clnica a la precomercializacin por un nico ensayo llamado de
333
Bioequivalencia.
El estudio de bioequivalencia tiene por objetivo demostrar que el medicamento
competidor (Test) posee un aceptable grado de similitud con el medicamento
original (Referencia). Si bien antiguamente se requeraque elproductoTest fuera
idntico, en ingrediente activo, en forma farmacutica, y en dosis nominal, al
productoReferencia(equivalentefarmacutico),laOrganizacinMundialdelaSalud
(OMS)ensuinformeN40,dejunio2006[1],aceptaqueproductosconteniendola
mismaparteactiva,aunquepresentadaendiferenteingredienteyhastaendiferente
forma farmacutica (alternativa farmacutica), puedan aspirar a ser competidores
similaresaloriginal.
TPICOSDEACTUALIZACINENNEUROBIOLOGA
Importaprecisaradecuadamenteel alcanceque tiene la frase gradoaceptablede
similitud, a los efectos de evitar expectativas desmedidas con el medicamento
similar que demostr ser bioequivalente al producto Referencia. Lo que primero
asomacomosignificado,esprecisamenteelconceptoquedionacimientoalensayo
clnicodebioequivalencia:equivalenciateraputica.Esdecir,queelaceptablegrado
de similitud refiereaqueelTest comparteelmismoperfilde seguridadyeficacia
que la Referencia. Sin embargo, veremos ms adelante, que sera imposible
segurarlo.
334
a
EQUIVALENTES ERAPUTICOS
Es inapropiado determinar la actividad farmacolgica similar entre Test y
Referencia,envirtuddeloinsuficientementeprecisoyexactoqueresultamedirlos
efectos producidos por la parte activa de ambos preparados. Incluso midiendo
alguno de los conocidos efectos que posee el frmaco y registrando similares
intensidadesdelosmismosentreTestyReferencia,seraincorrectoaseverarqueen
pacientes se lograr evitar los riesgos de toxicidad y tratar eficazmente la
enfermedad en similares magnitudes, cuando sean llevados a cabo idnticos
tratamientos con ambos productos. La compleja transduccin de las acciones
farmacolgicas,enefectosprimeramente,yenrespuestasclnicasfinalmente,llevaa
que la subrogacin por ensayos farmacodinmicos no sea la ms evidente
p
T
demostracindeequivalenciatera utica.
Lo que realmente se evala en los ensayos de bioequivalencia es la similitud
farmacocintica de ambos productos. Es decir, el aceptable apartamiento de
concentraciones sanguneas o de exposiciones sistmicas al frmaco tras la
administracin de Test y de Referencia. La condicin para que el Similar sea
considerado bioequivalente al Original es que logre demostrar, con una confianza
del90%,queelcocienteT/R(Test/Referencia)demediaspoblacionalesenalgunas
salientes caractersticas de exposicin (concentracinmxima [Cmax], rea bajo la
curva concentracintiempo [AUC]) se ubique entre 0,8 y 1,25. El Test debe
asimismo registrar similar tiempo de mxima concentracin [Tmax] que la
Referencia.
BIODISPONIBILIDADYBIOEQUIVALENCIADEMEDICAMENTOS
Transportando esta definicin al escenario clnico puede fcilmente demostrarse
quesielpacienteubicarasusconcentracionesenlascercanasdelosbordesdesu
franjateraputicamientrasrecibeReferencia,alcambiarporunTestquedifirieraen
hasta 20%, experimentar necesariamente ineficacia o toxicidad (Figura 1). Si
agregamos que la definicin establece apartamientos mximos de las respectivas
medias poblacionales, la variabilidad interindividual del cociente T/R augurams
casosdefallateraputicaalintercambiarTestporReferenciaenalgunospacientes.
En resumen, la satisfaccin de bioequivalencia no asegura la equivalencia
teraputicaen todos los individuos.La teraputicaesunconceptoeminentemente
individual,nosiendoadmisibleconsignar laequivalencia teraputicaenbaseaun
resultadomedioquenorepresentaaun individuosinoalpromediode individuos,
lmentenoexistecomosujetodetratamientofarmacolgico.queesencia
Figura1.AdministracincrnicadeunmedicamentoReferenciayperfilesbioequivalentesdemedicamentosSimilares.Notar comoenestepacientepueden registrarseniveles txicosdefrmaco cuando es tratado con un Similar, siguiendo el mismo plan posolgico que venarecibiendocon laReferencia.Enel casodeubicarniveles cercade la concentracinmnimaeficaz, el otro medicamento bioequivalente hubiese conducido a un tratamiento
335
subteraputico.
Lamentablemente se ha insistido demasiado sobre este alcance de la
bioequivalencia, haciendo pesar el resultado del ensayo en una cualidad que no
TPICOSDEACTUALIZACINENNEUROBIOLOGA
pertenece a los productos sinoque reposa en los requerimientos teraputicos del
paciente. De aqu surge la dramtica insatisfaccin que pudiera significar la
asimilacin de esta realidad. En este contexto, sera adems injusto decir que un
producto Test, bioinequivalente a la Referencia, fuese mejor o peor que ella.
Simplemente no seran intercambiables en tratamientos con idnticas posologas.
Peor an, siendo bioequivalentes podran no ser intercambiables en algunos
336
pacientes.
Demaneraconstantesehatransitadoentredosaguasalolargodelosaosconel
concepto de la bioequivalencia. Si bien se insisti en mantener como meta la
equivalencia teraputica entre Test y Referencia, se asumi que necesariamente
deban tambin ambos productos ser similares en biodisponibilidad para lograr
dichoobjetivo.Sobreesteejederazonamientoanalizaremosacontinuacinlams
apropiada razn de estudiar la bioequivalencia como mtodo para aprobar la
comercializacindeunmedicamentosimilaralaReferencia.
Elconceptodebiodisponibilidadcomprendetantolacantidaddeingredienteactivo
(perseocomoprecursordelverdaderofrmaco)disponiblesistmicamente,como
la velocidad a la cual se presenta en la circulacin sangunea una vez cumplida la
etapa de absorcin desde la forma farmacutica que lo contena. Un protocolo
experimentalcorrectamentediseadopermitirdesligardelperfildeexposicinlas
caractersticas de distribucin y de eliminacin del frmaco, y as estimar la
biodisponibilidaddeambasformulacionesconlamayorfiabilidad.
Nuestra regulacin sobre Intercambiabilidad de Medicamentos [2], establece
claramente esta meta como finalidad de los ensayos de bioequivalencia,
mencionando que con la equivalencia biofarmacutica se esperar satisfacer la
equivalenciateraputicaenlamayoradelospacientes.
TambindesdeestapticaseestaranteunresultadomediodecocientesT/Rque
dar cuenta del rendimiento en biodisponibilidad que ambos productos, Test y
Referencia,desplieganenelconjuntodelapoblacin,ynoentodosycadaunodelos
individuos. Pero a diferencia de la equivalencia teraputica, la equivalencia
biofarmacuticanodescansasupesoenlasexpectativasdelospacientessinoenlas
objetivascualidadestecnolgicasde losproductos,evaluadasporelconjuntode la
poblacin.No importa aqu que el resultadodel cociente demedias poblacionales
BIODISPONIBILIDADYBIOEQUIVALENCIADEMEDICAMENTOS
informeunatributoquequizsnoseverifiqueenningnsujetopromedio,yaque
la consecuenciadel ensayono tienenecesidaddemostrarse individualmente, sino
que el veredicto poblacional se centra en la verdadera cualidad que expresan las
337
respectivastecnologasyprocesosdefabricacindelosmedicamentosevaluados.
La equivalencia biofarmacutica promedio no pretende asegurarle a ningn
individuoqueTestyReferenciatendrnsimilaresbiodisponibilidadesenl,sinole
informaqueenelconjuntodeindividuoslabiodisponibilidaddelTestnoseapart
ms de lo aceptable de la biodisponibilidad de la Referencia. Con esta meta
cumplida, la poblacin tendr certezas de que la empresa productora del
medicamento Similar aplic a su fabricacin mtodos y tecnologas de similar
rendimientoqueelmedicamentooriginal,oReferencia.Estoesmsquesuficiente
para autorizar la comercializacin de un producto competidor. La equivalencia
teraputica en cada paciente resultar de la capacidad individual para lograrlo,
siendo garantizada la intercambiabilidad a travs del correcto seguimiento
teraputicoquerealiceelmdicoyeleventualajusteposolgicoqueaplique.
Bajoestecontextodecomparacindebiodisponibilidadesnoseraincorrectodecir
queunproductoesms,menos,oigualaotro.Dichosjuiciossernemitidostrasla
evaluacinquerealizalamayoradelapoblacin,centrandoelcocienteT/Renun
alorporencimade1,25,pordebajode0,8,oentre0,8y1,25,respectivamente.v
ENSAYOMUESTRALEINFERENCIAPOBLACIONAL
Eljuiciodebioequivalenciaseaplicaaunapoblacinqueenrealidadnosesometia
losproductosTestyReferencia,sinoqueresultdeunainferenciarealizadaapartir
de los resultados obtenidos en una muestra de esa poblacin. De aqu surge la
importanciaquetienelacorrectaseleccindelosvoluntariosquesernsujetosde
.investigacin
En primera instancia corresponde considerar los aspectos ticos que estn
involucradosenlosensayosconsereshumanos.Sehaentendidoquelautilizacin
depacientesafectams laticadeestosestudiosque lautilizacindevoluntarios
sanos. Individuos en tratamiento con el medicamento Referencia, u otro Similar,
podransufrirseriosdesajustesteraputicosaladministrarleelmedicamentoTest,
cuya biodisponibilidad se desconoce. Adems, el control de las variables
TPICOSDEACTUALIZACINENNEUROBIOLOGA
338
introducidas en ensayos con pacientes resulta ms complejo que con voluntarios
sanos,aspectoqueserreferidoseguidamente.
El cociente T/R de medias poblacionales se infiere a partir del cociente T/R de
mediasmuestrales, alrededor del cual se construye un intervalo de confianzaque
proporciona una probabilidad superior o igual al noventa por ciento (IC90%) de
encontrarelverdaderovalor.LabioequivalenciasedemuestraincluyendoelIC90%
entre0,8y1,25(Figura2).LaamplituddelIC90%sereducirenlamedidaquese
reduzca la variabilidad aleatoria asociada al ensayo experimental (s2), y en la
medidaqueseaumenteelnmerodesujetosenlamuestra(n).
Figura 2. Distribucin de probabilidad para encontrar el verdadero cociente de mediaspoblacionales de biodisponibilidad. La curva encierra por debajo un rea que representa el100%deprobabilidad.Elintervaloconprobabilidadde90%seconstruyeapartirdelcocientede medias muestrales, ms la amplitud que rinde la varianza residual del ANOVA [s2], elestadsticodelafuncindeStudent[t(..)],yelnmerodesujetos[n].Lafigurailustraelcasoe Testnque yReferenciasonbioequivalentes.
La variabilidad aleatoria del ensayo es una de las mayores preocupaciones en la
investigacindebioequivalencia.Enellanoslocuentanloserroresdeestimacin
de los parmetros de exposicin sangunea al frmaco (sean analticos o
metodolgicos), sino tambin las naturales y variables caractersticas de los
voluntarios (inter e intraindividual), adems de los variables rendimientos que
caracterizan a cada uno de los productos. Losmayores esfuerzos se aplican para
reducir aquellas fuentes de variabilidad que no dependen de los medicamentos,
BIODISPONIBILIDADYBIOEQUIVALENCIADEMEDICAMENTOS
entre ellos los que aportan los sujetos de la muestra. De aqu se entiende la
339
convenienciadeutilizarvoluntariossanos.
En el subttulo previo semencion la importancia de asignarle a lamayora de la
poblacinlafuerzaparasentenciarlasimilarbiodisponibilidadentrelosproductos.
Este concepto asume como hiptesis que el conjunto de individuos distribuye la
caracterstica de biodisponibilidad relativa T/R segn un patrn normal. Sin
embargo es sabido que una determinada poblacin puede presentar una
distribucinpolimodalrespectoaalgunacaractersticarelacionadaconel frmaco.
Porlotantohabraqueconsiderarparalabioequivalenciaalgrupoquecontuviesela
mayoradeindividuos.
Existen diferentes maneras de subclasificar a los individuos: 1) por el sexo
(masculino, femenino); 2) por la edad (ej.: joven, intermedio y anciano); 3) por el
genotipo(deenzimas,detransportadoresdemembrana,etc.);4)porelfenotipoque
realmenteexpresaelsujetoalmomentodelensayo.Sindudaqueelcortesegnel
gnerodelosvoluntariosdividelapoblacinen2grandesgruposconcapacidades
de decisin muy importantes [3, 4], que contienen a su vez elementos
subclasificablesporcualquieradelosrestantescriterios.Noexistenandefiniciones
respectoa laconformacinde lasmuestrasdesujetos,peroresultaclaroquepara
armonizar este aspecto con el concepto de bioequivalencia promedio debera
garantizarse un juicio con el mayor respaldo posible, sin ocultar el resultado
producidoporlasminoras.Lainclusindeestasminorasenlamuestranodebera
fectarimproductivamentelapotenciadelensayo.a
CENTRADOYVARIABILIDADDELASBIODISPONIBILIDADES
Lasbiodisponibilidadesde cadaproductoen lapoblacinpresentan las siguientes
dos cualidades: 1) centrado de valores (media), y 2) dispersin de valores
(varianza). La bioequivalencia promedio se logra cuando el cociente de medias
(T/R)estentre[0,801,25],noexistiendomencinalgunaenladefinicinrespecto
delasvarianzasdeTestydeReferencia.
El subttulo previo abordaba la varianza muestral como dramtico insumo para
construirlosintervalosdeconfianzadelcocientedemedias,peronoprofundizen
el intrnseco valor de las varianzas de cada producto como decisor en
TPICOSDEACTUALIZACINENNEUROBIOLOGA
bioequivalencia.Conceptosmsmodernosdebioequivalenciaapuntanajerarquizar
este aspecto: bioequivalencia poblacional y bioequivalencia individual [5]. No los
desarrollaremos aqu, porque an no es exigencia internacional y porque tanto el
diseo experimental como el criterio de decisin son an controversiales. No
obstante,lavarianzaqueintroduceelmedicamentoTestdeberaconsiderarsecomo
factordecisoriodesimilarjerarquaalvalormedioqueproduce.
EsimportantemencionarqueelcocienteT/Rdemediasaritmticas(promedios)no
coincideconlamediadeloscocientesT/Robservadosencadaindividuo,seadela
muestracomodelapoblacin.Sinembargo,cuandosemanejanmediasgeomtricas
to evaloresindivid(razensimadelproduc d uales)lacoincidenciaesreal.
Mediaaritmtica: [ ] (ecuacin1)
Mediageomtrica: [ ]1/n (ecuacin2)
Dividirdosfrmulasexpresadassegnlaecuacin1,aplicadasaTyR,norindeel
mismoresultadoqueaplicardichaecuacinal cociente individual (Xi)deT/R.Sin
embargo, el cociente T/R de dos frmulas segn la ecuacin 2, origina el mismo
resultadoqueaplicandodichaecuacinalcocienteT/Rindividual.
Esasqueen laactualidadseprocesan losdatos individualesdebiodisponibilidad
aplicndoles la transformacin logartmica(naturalodecimal).Nosloseprocede
deestamaneraparasolaparlosconceptosantesmencionados,sinotambinporque,
entre otras razones, los valores individuales de biodisponibilidad naturalmente
presentan distribucin logaritmonormal [5]. El resultado lleva a una media
aritmticadeloslogaritmos,paraTyR,quenoesotracosaqueel logaritmodela
mediageomtrica.
Enresumen,labioequivalenciapromedioenrealidadevalasielcocientedemedias
geomtricaspoblacionales seubica en el intervalo [0,801,25].Dicha inferencia se
haceconstruyendoIC90%conelcocienteT/Rdemediasgeomtricasmuestrales,y
con la varianza aleatoria del ensayo calculada a partir de datos logartmicamente
ransformados.t
340
DISEOEXPERIMENTALDELENSAYODEBIOEQUIVALENCIA
En primer trmino corresponde remarcar que el diseo de estos estudios debe
evitar sesgos que puedan perjudicar u ocultar la verdadera biodisponibilidad
BIODISPONIBILIDADYBIOEQUIVALENCIADEMEDICAMENTOS
relativa de los productos comparados, es decir el cociente T/R de medias
poblacionales.Ensegundolugar,losdatosquesurjandelestudiodebenpermitirla
estimacinmscerteradelavariabilidadaleatoria,yaslocalizarconaltaprecisin
341
elcocienteT/Rdemediaspoblacionales.
El tratamiento de datos ms apropiado para los fines de bioequivalencia es el
anlisis de la varianza (ANOVA), el cual requiere para su mejor provecho que la
mitaddelossujetosrecibanlosproductosTestyReferenciaendosinstanciassegn
lasecuenciaTR,entantolaotramitadlosrecibaenlasmismasdosinstanciassegn
la secuenciaRT.Estediseoexperimental recibeelnombredeensayocruzadoen
bloquedecuadradolatino2x2(2productosx2perodos).
Pordisposicionesreglamentarias,quesesustentanestadsticamente,elnmerode
voluntarios no debe ser inferior a 12, en cuyo caso se producirn 24 datos de
biodisponibilidad.ElANOVAloquehaceesreducirlavarianzatotal,queseestima
travs de la suma de 24 diferencias cuadrticas respecto a la media global,
descontando la correspondiente suma de 24 diferencias que aportaron los 12
sujetos, cada uno con 2 valores idnticos (promedio entre T y R de cada sujeto),
descontandolasumadelas24diferenciasqueaportaronlos2perodosdelensayo,
cadaunocon12valores idnticos(promediode6Tms6Rdecada instancia),y
descontandofinalmentelasumadelas24diferenciasqueaportaronlos2productos,
cada uno con 12 valores idnticos (promedio de 12 T, o promedio de 12 R). La
varianzaqueas resulta recibeelnombredeVarianzaResidualdelANOVA(s2), la
cualestimalavarianzapoblacional(2)oerroraleatorio.
Como podr advertirse, s2 no logra estimar la verdadera variabilidad aleatoria de
cadaunodelossistemas:individuoTestoindividuoReferencia.Paralograrlohabra
queadministrarTestyReferencia,en2ensayosindependientes1x2(1productox2
perodos), utilizando los mismos voluntarios. Mejor an en 2 ensayos
independientes1xJ,esdecircadaproductoadministradoalsujetoenJinstancias,a
los efectos de realizar ms correctamente el descuento de la variabilidad
interindividual a la variabilidad total. Descontando a su turno la variabilidad
interperodo, se arriba a una varianza residual que estimara correctamente la
variabilidad intraindividual que produce cadamedicamento,Test y Referencia. En
estosconceptossebasantantolabioequivalenciapoblacionalcomoindividual.
TPICOSDEACTUALIZACINENNEUROBIOLOGA
El estudio debe proveer datos que permitan extraer informacin de absorcin
relativa T/R con la menor contaminacin de otras fases farmacocinticas
(distribucineliminacin), de manera que la inferencia sea circunscrita a la
biodisponibilidad, y as establecer fehacientemente el juicio de equivalencia
biofarmacutica.Entalsentido,lasadministracionesdelosmedicamentosendosis
nicas evitaran alcanzar concentraciones elevadas que pudieran modificar la
distribucin y eliminacin del frmaco. Es decir, se evitara con este modo de
administracinquediferenciasenconcentraciones(TversusR)pudieranafectarel
clearance dedisposicinde ladrogademaneradiferente, ypor tantoexacerbaro
.
342
enmascararlaverdaderadiferenciaenbiodisponibilidad
Laadministracindedosismltiples,ycomparacindeTestcontraReferenciaenel
estado estacionario, tiene la muy pregonada ventaja de hacer el ensayo en las
condiciones normales de uso paramuchosmedicamentos. No obstante lo cual se
prefiere evitar este diseo experimental por razones de seguridad de los
voluntarios,aexcepcindequeeldaoquepudieraocasionaruninadecuadojuicio
debioequivalenciafrutodeunensayoendosisnicasfueramsimportantequeel
riesgocorridoporlosindividuosdelensayotrasdosismltiples.EnEstadosUnidos
seexigeunestudioendosismltipleparalaevaluacindeproductosdeliberacin
prolongada.
Ennuestraopinin,dadoquelasconcentracionessistmicas,olocalesenlapropia
ruta de ingreso al organismo, podran amplificar o atenuar la propia
biodisponibilidadde losproductos,espocointeresanteeldiseoendosismltiple
para concluir sobre la equivalencia biofarmacutica. La razn que gua esta
definicin estratgica es la siguiente: las diferencias de biodisponibilidades deben
ser consecuencia de las diferencias tecnolgicas de losmedicamentos y no de las
diferentesconcentracionesalcanzadas.Ampliaremosesteconceptoenlassiguientes
secciones.
El protocolo experimental de la investigacin en bioequivalencia debe tener otros
recaudos importantes: a) volumen de agua con que se ingiere la dosis; b)
programacin de bebidas y comidas a lo largo del ensayo; c) programacin de
actividadesfsicasparaelvoluntarioduranteelensayo;d)programacindetomas
demuestras sanguneas u otro fluido biolgico que se haya justificado utilizar; e)
BIODISPONIBILIDADYBIOEQUIVALENCIADEMEDICAMENTOS
preparacin previa que deba seguir el voluntario antes de ingerir la dosis de
medicamento; f) tcnicaanalticademedicindeconcentracionesde frmaco, con
su correspondiente validacin; g) forma de tratamiento farmacocintico y
estadsticodelosdatosconcentracintiempoobtenidos;etc.Esdecir,todasaquellas
condiciones que permitan asegurar lamenor variabilidad aleatoria al procesar la
informacin experimental. Tambin se requiere describir los procedimientos de
reclutamiento de voluntarios sanos, y aquellas precauciones relacionadas con su
eguridadduranteelestudio.
343
s
PARMETROSRELEVANTESENLADETERMINACINDEBIODISPONIBILIDAD
Si bien hemos desaconsejado realizar el estudio de bioequivalencia en dosis
mltiple,laeventualnecesidaddellevarloacaboendichascondicionesrequierela
mencindelossiguientesparmetrosdeexposicin,comoaquellosmsrelevantes
paracuantificarlabiodisponibilidadrelativaentreTestyReferencia:
Concentracinmediadeestadoestacionario,lacualseobtienedividiendoel
reabajolacurvadeconcentracionesdentrodelintervalodeadministracin,
porlaamplituddedichointervalo(Css).
Concentracinmximaobtenidaenelintervalodeadministracin(Cssmax).
).Concentracinmnimaobtenidaenelintervalodeadministracin(Cssmin
Oscilacinpicovalle,elcualseobtienedividiendoladiferenciaentreCssmaxy
Cssmin,porCss.
Tiempodemximaconcentracin(Tmaxss).
El ensayo en dosis nica muestra perfiles de concentracin (plasmtica)
cara ect rizadosportresprincipalesparmetros(Figura3):
1) reabajolacurvadeconcentraciones(AUC),seadesdecerohastaelltimo
tiempo experimental demuestreo (AUC0T) o hasta tiempo infinito (AUC0).
En ambos casos se procede a sumar los trapecios generados con los datos
tiempoconcentracin (tC), desde cero hasta el tiempo T, agregando en el
casoAUC0laextrapolacinhastainfinito.Paralaextrapolacinsecalculala
pendiente (z) obtenida con los ltimos datos tC, que se suponen en
decaimientomonoexponencial,previatransformacindeCasusrespectivos
logaritmosnaturales.Ensuma,AUC0resultadeadicionaraAUC0Tel factor
TPICOSDEACTUALIZACINENNEUROBIOLOGA
344
C(T)/z, siendo C(T) la concentracin al ltimo tiempo del protocolo de
muestreo,T.
2) Concentracin mxima (Cmax), la cual se extrae de entre los valores
experimentalmente obtenidos, sin realizar interpolacin con funciones
matemticasdemejorajuste.
3) Tiempodemximaconcentracin(Tmax),elcualescomputadoenasociacin
conCmax.
Figura3. Perfil de niveles sistmicos de frmaco tras dosis nica deTest o de Referencia,obtenidomediantemuestreosanguneoa lo largodel tiempoymedicindeconcentracionesplasmticas. El rea bajo la curva se obtiene sumando los trapecios definidos por la uninentrelasconcentracionesexperimentalesconelejedetiempo,ylaextrapolacinhastainfinitodesdeelltimodatoexperimental[C(T),T].Otroparmetrorelevanteeselcocienteentrelamximaconcentracinyelreabajolacurva.
LavelocidaddeabsorcindeterminaelresultadodeTmaxydeCmax,adicionandoeste
ltimoparmetro lacontribucinen formamultiplicativade lacantidadabsorbida
de frmaco. En tantoAUC0 solamente es determinada por la cantidad absorbida.
Ambasafirmacionesslosonciertassi ladisposicinenelsujeto fueconstanteen
lasdosadministraciones(TestyReferencia).Porelloestanimportanteasegurarla
constancia del sistema frmacoindividuo, para concluir sobre la equivalencia
biofarmacutica.
BIODISPONIBILIDADYBIOEQUIVALENCIADEMEDICAMENTOS
Resultaapropiadoenestemomentoindicarquelavariabilidadresidualdelensayo
es mayor en Cmax que en AUC0, no solo porque el primero tiene la carga de la
incertidumbre analtica depositada en un nico dato, y la eventual carga de
incertidumbre que ocasionara un protocolo de muestreo inadecuado para su
estimacin,sinoporqueenlcontribuyenlavariabilidadenlafraccindedosisque
se absorbe y la variabilidad en la velocidad de absorcin. Por ello ha sido
considerado de inters el anlisis de la informacin que brinda el parmetro
Cmax/AUC0,elcualdesligalacontribucindelacantidad.Suinclusinparalatoma
dedecisionesenbioequivalenciaestcontempladaenlaregulacinuruguaya[2]en
345
loscasosenquelavelocidaddeabsorcineseltemadeterminante.
Tambincomienzaatenerimportantepesolaconsideracindereasbajolacurva
parciales, desde cero hasta tiempos intermedios del protocolo experimental, a los
efectos de cuantificar la velocidad relativa de ingreso de frmaco entre Test y
Referencia. Este parmetro de exposicin no ser profundizado en virtud de su
aplicacinespecficaadeterminadoscasos.
Para cerrar esta seccin importa remarcar que AUC0T subroga eficientemente a
AUC0 cuando elmuestreo se prolongapor tiempo suficiente, demodo tal que se
cubramsdel80%delreatotal.Porlotanto,alosefectosdeevitarelincremento
delavariabilidadquepudieraocasionarlaextrapolacinainfinito,escomnquela
cantidad absorbida sea evaluada a travs de AUC0T con suficiente precisin y
exactitud, principalmente en formulaciones de liberacin inmediata, de liberacin
retardada,ydeliberacinacelerada.Noasenproductosdeliberacinprolongadao
rogramadaalolargodeltiempo.p
FARMACOCINTICANOLINEALDOSIS TIEMPODEPENDIENTE
Los sistemas medicamentoindividuo responden ante cada dosis originando
concentracionesenlosdistintosespacioscorporales(respuestasfarmacocinticas)y
Y
produciendoconsecuentementeefectos(respuestafarmacodinmicas).
Lanolinealidadrespectoa lasdosissignificaqueunaumentoenlamisma(seaen
administracin nica o mltiple) lleva a un aumento mayor o menor en la
concentracindefrmaco(AUC0oCss).UngrficoquerelacionaAUC0,oCss,conla
dosis (D), o con la velocidad de administracin (dosis dividido intervalo de
TPICOSDEACTUALIZACINENNEUROBIOLOGA
346
administracin: D/ muestra una curva cuya pendiente est compuesta por la
fraccindedosisqueseabsorbedivididoelclearancesistmicodelfrmaco(F/CL)
(Figura 4). La respuesta lineal est caracterizada por F/CL constante, an cuando
pudieranmodificarsetantoFcomoCLdemanerainversa.Larespuestanolinealse
caracterizaporF/CLcreciente(curvaconconcavidadpositiva)odecreciente(curva
conconcavidadnegativa).
AUC
D
Pendiente=F/CL
Figura4.Relacinentreelreabajo lacurva(AUC)y lacantidadadministrada(D)endosisnica.Sistemarespondelinealmente(lnearoja)cuandolapendientesemantieneconstante.Sistemarespondeenformanolineal(lneasazules)cuandolapendientemodificasuvalorconelaumentodeladosis:a)creciendolabiodisponibilidad(F)odisminuyendoelclearance(CL),o ambas cosas simultneamente, en el caso de la curva superior; b) disminuyendo F oaumentandoCL,oambascosassimultneamente,enelcasodelacurvainferior.
Importaprecisar lacausaque llevaamodificarFy/oCL.As como losefectosson
causados por concentraciones de frmaco, tambin la accin quemodifica dichos
parmetros farmacocinticos tiene su causa en las concentraciones que se logran
sistmicamente (modificando el CL) o en el trayecto de ingreso al organismo
(modificandoelclearancepresistmicoyporlotantolabiodisponibilidad).
Por talmotivo se prefiere trabajar con bajas dosis, evitando as que la diferencia
intrnseca entre cada producto no se amplifique o se atene por modificaciones
concentracindependientedelosclearancepresistmicosy/osistmicos.
BIODISPONIBILIDADYBIOEQUIVALENCIADEMEDICAMENTOS
LanolinealidadtiempodependienterefiereaqueFy/oCLsemodificaalolargode
unaadministracincrnica.Estollevaaquelacinticadelfrmaconosealamisma
entre la primera dosis administrada y la dosis que est manteniendo
concentraciones de estado estacionario. Nuevamente es la concentracin de
frmaco, en los sitios involucrados con el clearance presistmico y sistmico, la
esponsable de tal fenmeno. La nica particularidad de este caso lo constituye el
347
tiempoquedemandobservarelefectodetalaccin.
Por estemotivo se prefiere trabajar en dosis nica, evitando as que la diferencia
intrnseca entre cada producto no se amplifique o se atene por modificaciones
concentracindependiente que se evidencian con el transcurso del tiempo y la
reiterada exposicin al frmaco, agente causante de lamodificacin del clearance
resistmicoysistmico.p
LIBERACIN DEFRMACOETAPAPREVIAALAABSORCIN
Este aspecto fundamenta buena parte de la tendencia actual que busca evitar los
ensayosclnicosdebioequivalencia(bioexencin).Endeterminadoscasosseacepta
quelaequivalenciabiofarmacuticaseadirimidaatravsdeestudiosdedisolucin
invitrocomparativosentreTestyReferencia[1].
El concepto de bioexencin principalmente tuvo su desarrollo en medicamentos
destinadosalavadeadministracinoral.Sesuponequesiladisolucineselpaso
previo y determinante de la absorcin, las diferencias que all se constaten entre
Test y Referencia tendrn directa consecuencia sobre la bioequivalencia. Se
requieren importantes estudios de correlacin in vitro in vivo, a los efectos de
pautar correctamente el traslado de los lmites de la equivalencia in vivo a la
equivalencia in vitro. La mayor dificultad que plantea este procedimiento es
reproducirinvitrolacomplejafisiologagastrointestinal.
No desarrollaremos en este texto el contenido de esta importante faceta de la
equivalenciabiofarmacutica,noporirrelevante,sinoporquesenecesitaacumular
ms experiencia con esta estrategia. Sin duda que esta metodologa permitir
reducir fuertemente los costoseconmicosyticosde lapuestaenelmercadode
edicamentossimilares.m
TPICOSDEACTUALIZACINENNEUROBIOLOGA
348
CONCLUSIONES
La intercambiabilidad de medicamentos tiene sustento en la similar
biodisponibilidadpromedioquemostrarondosproductossegnmedicinquehizo
lapoblacindepotenciales consumidores. Cuandoexista altaprobabilidaddeque
las biodisponibilidades relativas,Test vs. Referencia, no puedan ser afectadasms
que por la disolucin que se llevar a cabo en el tracto digestivo, ser posible
subrogar el ensayo clnico de bioequivalencia por estudios comparativos de
disolucin in vitro. La intercambiabilidad entonces refiere a una equivalencia
biofarmacutica entre dos productos lograda gracias a similares tecnologas de
fabricacin, sin con ello asegurar en cada individuo la intercambiabilidad durante
sususosclnicos.
Enlamedidadequelospacientesreproduzcanlasbiodisponibilidadesmediasque
mostraron ambosmedicamentos en el ensayo in vivo, o en el estudio in vitro, se
estar frenteaunamuyprobableequivalencia teraputica cuandose sustituyaun
producto por el otro siguiendo el mismo plan posolgico. El riesgo de no
intercambiabilidad clnica est siempre presente entre medicamentos
bioequivalentes, y por ello necesariamente deben evaluarse los resultados
teraputicos tras el cambio de producto. Pese a este eventual inconveniente, el
estudio de bioequivalencia ser siempre un avance para la sociedad, dado que
permite la libre competencia entre Empresas con similar capacidad productiva, y
permitealosconsumidoresejercerlalibreeleccinentremedicamentossimilares,
inlosriesgosquesiempreocultalaignorancia.s
R FE CEREN IAS
1. Fortieth Report of the World Health Organization. Technical Report Series N 937, Annex 7:Multisource(generic)pharmaceuticalproducts:guidelineonregistrationrequirementstoestablishinterchangeability.Geneva,2006,pp34790.
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349
24
INFLUENCIADELGNERO,DELENVEJECIMIENTO,YDELOSRITMOSCIRCADIANOSENLAFARMACOCINTICADELASDROGAS
VzquezM,FagiolinoP,EiraldiR,MaldonadoC.
DepartamentodeFarmacologayBiofarmacutica FacultaddeQumica,UniversidaddelaRepblicadeUruguay,Mon evideo,Uruguay.
,t
INTRODUCCIN
El objetivo de un tratamiento farmacolgico es conseguir el efecto deseado sin
provocar toxicidad al paciente. La respuesta que se espera al administrar una
determinada dosis va a depender de numerosos factores, muchos de ellos
inherentesacadapersona,comoelgnero,raza,factoresgenticosqueexplicanla
variabilidadfarmacodinmicayfarmacocintica.Otrasveces,eselestadoclnicodel
propio paciente el que produce modificaciones farmacodinmicas y
farmacocinticas, posesionndonos frente a sistemas altamente variables por la
dinmicaevolucindelapatologadelindividuoyporlapresenciadelfrmacodel
que sepretendeque incidaen la clnicadelpaciente revirtindola (Vzquezetal.,
2008). La hora del da, as como la variedad de interacciones frmacofrmaco,
frmacoalimento,frmacoplantamedicinaldebenserconsideradascomovariables
adicionalesqueinfluencianlacinticadeunfrmaco.
Las razones para una respuesta alterada a los frmacos en el anciano pueden ser
farmacocinticas o farmacodinmicas y en resumidas cuentas la absorcin y
disposicindefrmacospuedeversemodificadaoelindividuopuedereaccionaren
forma diferente a una concentracin dada. La influencia de las patologas en el
accionar de los frmacos no ser tratada en este captulo, en donde prestaremos
especial atencin adems de la influencia del gnero y de los ritmos circadianos
sobre la respuesta farmacocintica,acambiosduranteelenvejecimiento normal,
TPICOSDEACTUALIZACINENNEUROBIOLOGA
pudiendoresultarenmuchoscasosdifcilladistincinentreelenvejecimientoperse
lossntomasdelapropiapatologa.
350
y
FISIOLOGADELENVEJECIMIENTO
Apesardequesonvariosloscambiosqueexperimentaelorganismohumanoconel
pasodeltiempo,slonosenfocaremosenestecaptuloaaquellosdegranimpacto
enlabiodisponibilidadydisposicindefrmacos
Una de las caractersticas del envejecimiento es un declive progresivo de los
mecanismos homeostticos y autorreguladores que mantienen la temperatura
corporal,elpHsanguneo,lapresinarterial,laperfusinsanguneadelosdistintos
rganos o la frecuencia cardiaca. Por lo tanto,muchos de los efectos que pueden
producir los frmacos no son mitigados y la intensidad de los efectos adversos
resulta mayor (hipotensin postural, hipovolemia, cambios electrolticos en
a ) repuest a diurticos,etc. queenelindividuo joven.
Quizs la caracterstica ms sobresaliente en la edad avanzada es la rigidez
progresivade los tejidos. Se observaunaprdida importante de la distensibilidad
vascularconlaedad, loqueconjuntamenteconelaumentodelgrosordela ntima
de los vasos y disfuncin endotelial parece ser responsable de un aumento de la
presin arterial sistlica y de la carga del ventrculo izquierdo (Turnheim, 1998).
Esto conlleva a un enlentecimiento del llenado diastlico y a una disminucin del
gasto cardiacoenun1%cadaaodespusde la edadde25aos (McElnayetal.,
1996). Sin embargo, la distribucin del gasto cardiaco no permanece constante.
Mientras que la contribucin del flujo sanguneo total a los riones y al tracto
gastrointestinal(rganosesplcnicosexceptoelhgado)estreducidaenelanciano,
elcerebroyelmiocardiorecibenunafraccindegastocardiacomayor(McElnayet
al.,1996).
Pero a su vez este gasto cardiaco disminuido en forma constante pone en
funcionamientomecanismoscompensatorioscomoelsistemanerviososimpticoy
el sistema reninaangiostensinaaldosteronavasopresina. Como resultado, se
produceunaelevacinde lascatecolaminascirculantes(Cheitlin,2003) llevandoa
unaregulacindescendentedereceptoresbetaadrenrgicos.
GNERO,ENVEJECIMIENTOYRITMOSCIRCADIANOSENLAFARMACOCINTICADELASDROGAS
El flujo sanguneo heptico disminuye en forma similar al gasto cardiaco, pero la
fraccin de flujo sanguneo permanece constante, ya que una fraccin de flujo
sanguneoarterialmsaltasecompensaporunafraccinreducidadelavenaporta
351
(LeCouteretal.,1998).
La funcionalidadrenaldeclinacon laedadenconcordanciaconunflujosanguneo
renaldisminuidoyporestemotivoesquelosancianosdeberansertratadoscomo
pacientesinsuficientesrenales.Lafuncionalidadrenalpromediodeunindividuode
80 aos de edad es slo 50 a 60% de la de un individuo de 20 aos (Turnheim,
1998). El nivel de creatinina sricapermanece comparativamente constantehasta
edadavanzadadebidoareduccionesparalelasen lamasamuscularesqueltica(la
principalfuentedecreatininaendgena)ylafuncinexcretoriarenal,porlotantola
medidadelamismapuedecarecerdesignificadoclnicoenelanciano.
En loque refiere al contenidoy actividaddeenzimasdel sistemacitocromoP450
(CYP)enelanciano,laliteraturaescontroversial.ElcontenidodelasenzimasCYP
parecepermanecerinalteradoenedadavanzada(Turnheim,1998).Variosautores
handemostradoquelaactividaddelaisoenzimaCYP3A4permanecesincambiocon
laedad,apesardequelosclearancesdeciertosfrmacosmetabolizadospordicha
enzimaestndisminuidosenelanciano(Huntetal.,1992;Schmucker,2001).
Tambinesescasalainformacinacercadelaexpresindelostransportadoresde
eflujo (Pglucoprotena [Pgp], protena asociada a resistencia demltiples drogas
[MRP2])enel anciano.Brennery colaboradores, encontraronque la funcinde la
Pgp estaba bien preservada en pacientes de edad avanzada mientras que otros
autores (Bartels et al., 2009) demostraron un descenso en la funcin de la Pgp a
nivelcerebrovascularenelancianolocualpodraserunmecanismoqueexplicara
porqu lavejezeselprincipal factorde riesgoeneldesarrollodeenfermedades
neurodegenerativas.
La incidencia de aclorhidria aumenta con la edad as como se observa un
enlentecimiento del vaciamiento gstrico, una disminucin de las secreciones
gastrointestinalesydelperistaltismointestinal(Turnheim,2003).
Aparte de la concentracin en el sitio de accin, la magnitud del efecto de un
frmaco depende del nmero de receptores en el rgano blanco. Por lo tanto,
ademsdelafarmacocintica,lafarmacodinamiapuedeestaralteradaenelanciano.
TPICOSDEACTUALIZACINENNEUROBIOLOGA
Ya se mencion anteriormente la disminucin en el nmero de receptores
adrenrgicos.Laedadpareceno tenerefectoen la respuestadeadrenoreceptores
1,mientrasquelosefectosdelosreceptores2y laactividaddelosmuscarnicos
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estndisminuidos.
Elcontenidodeneurotransmisoresenelcerebrovaraentrediferentesregionesdel
cerebroyasuvezseconstataunadisminucinenelnmerodesinapsis.Lafuncin
cognitiva se relaciona con transmisin colinrgica en el sistema nervioso central
(Tumer et al., 1992). Una reduccin de la enzima colina acetiltransferasa se
encontrenlaneocortezadepersonasancianasloquellevaaunadisminucindel
contenidodeacetilcolina.Tambinotrosneurotransmisoresestnreducidoscomo
eselcasodeladopamina.
Biodisponibilidaddefrmacosyenvejecimiento
La disolucin representa la primera fase del proceso de absorcin cuando se
administraunfrmacoporvaoral.
Lamismapuedeestarcomprometidaparaalgunosfrmacosenelancianodebidoa
lamenor secrecindecido clorhdricoydepepsinah