RNA : Transcrição e Processamento
Paula de Vasconcellos Golin
RNA
Transcrição“a arte de transformar”
Conceitos Gerais
DNA mRNA proteínas
tRNA acoplador transportador
rRNA estrutural ribossomos
Transcrição “a arte de transformar”
• Decisão de iniciar
- controle da situação
• Temporal / Momento
- estado fisiológico
• Específico / Seletivo
- privilégio de poucos
Transcrição “a arte de transformar”
• Complementaridade e antiparalelismo
( T = U)
• Síntese 5' 3'
• RNA Polimerase (RNAP)
Transcrição “a arte de transformar”
• RNAPs:
reconhecem e ligam-se
desnaturam DNA
mantém estável a dupla fita aberta
mantém estável DNA:RNA
terminam síntese
restauram DNA
Transcrição “a arte de transformar”
• RNAP IrRNAsnucléologenes um ao lado do outro
• RNAP IImRNA
• RNAP IIItRNA e outros
Transcrição “a arte de transformar”
• RNAPs : nunca sozinhas
proteínas acessórias = fatores de transcrição
sítio de início da transcrição
seqüências regulatórias (promotor e enhancer)
Transcrição “a arte de transformar”
• Iniciação – ligação do complexo RNAP II ao DNA
• Alongamento – adição de nt ao mRNA crescente
• Terminação – liberação de mRNA e RNAP II
Cascata de fatores
+ RNAP II
Complexo de iniciação
Promotor
promotor região transcrita
Transcrição “a arte de transformar”
Enhancers
em ação
Transcrição “a arte de transformar”
• Alongamento
CIT desfeito
Síntese do mRNA propriamente dita
Duplex híbrido DNA:RNA
Correção de erros
Transcrição “a arte de transformar”
5´ 3´
“bolha de transcrição”
Transcrição “a arte de transformar”
Transcrição “a arte de transformar”
• Terminação
regiões consenso no DNA molde – ricas em T
clivagem (corte)
CAT CAT BoxBox
unidade de transcrição
Transcrição “a arte de transformar”
Resumindo...
Transcrição “a arte de transformar”
• rRNA - RNAP I3 complexos protéicos acessórios
promotores:
-2 domínios semelhantes RNAPII
• tRNA - RNAP III
3 complexos protéicos acessórios
promotores: - 1 domínio semelhante RNAPII
- 2 regiões controladoras internas (ICRs)
RNA
Processamento“a arte de proteger e tornar útil”
Conceitos Gerais
mRNA Proteína
pré-mRNA mRNA
DNA
traduçãotranscrição
processamento
Processamento“a arte de proteger e tornar útil”
• Capping - cap 5'
• Polyadenylation - cauda poly A
• Splicing – excisão de introns
Processamento“a arte de proteger e tornar útil”
Capping – cap 5'• O que é:
– adição de grupo metil
• Local:– primeiro nucleotídeo 5'
• Funções:– proteção– facilitar transporte e splicing
• Quando:– assim que possível
Processamento“a arte de proteger e tornar útil”
O Cap
Processamento“a arte de proteger e tornar útil”
Capping
Processamento“a arte de proteger e tornar útil”
• Polyadenylation - cauda poly A• O que é:
– adição de aprox 200 As
• Local:– na extremidade 3'
• Funções:– facilitar transporte e tradução– estabilizar
• Quando:– após terminação
Processamento“a arte de proteger e tornar útil”
Polyadenylation
Processamento“a arte de proteger e tornar útil”
Estrutura protegida
Processamento“a arte de proteger e tornar útil”
• Tornar útil:
- Exons
porção codificadora
presente no mRNA
- Intronsporção não codificadora
não presente no mRNA
Processamento“a arte de proteger e tornar útil”
Splicing• O que é:
– retirada de introns, fusão de exons
• Local:– regra GU-AG, sinalizado por branch point A
• Função:– tornar útil
• Quando:– logo após cap e poli A
Processamento“a arte de proteger e tornar útil”
DNA molde
Pré-mRNA
Processamento“a arte de proteger e tornar útil”
• Splicing mediado por spliceossomo:
spliceossomo = vários snRNPs (U1, U2...) + ptns
- ajuda a clivar no sítio de splicing
- remove intron
- impede afastamento dos exons
- une os exons
Splicing por spliceossomo
Processamento“a arte de proteger e tornar útil”
Processamento“a arte de proteger e tornar útil”
• Auto-splicing
sem atuação de spliceossomos
Processamento“a arte de proteger e tornar útil”
Auto-splicing
Processamento“a arte de proteger e tornar útil”
Bases em comum
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