ESTRUCTURA DE PROTEINAS
ALFONSO BETTIN, B.Sc, M.Sc.
DOCENTE
UNIVERSIDAD DEL SINU
LOS AMINOÁCIDOS
LOS AMINOÁCIDOS
ISOMEROS
ESTRUCTURA TETRAÉDICA
AA PRESENTES
EN LAS PROTEINAS
AMINOACIDOS ALIFATICOS
aa mas pequeño flexibilidad estérica
HidrofobicidadInterior de la proteína
AMINOACIDOS AROMATICOS
HIDROFOBO
•PUENTES DE H+ •ACTIVIDAD ENZIMATICA
LIGERAMENTE POLARES
AMINOACIDOS POLARES NO CARGADOS
MODERADAMENTE POLARRIGIDES ESTERICA
HIDROFILICOS
PUENTES DISULFUROS
HIDROFOBOS
AMINOACIDOS BASICOS
EL MENOS BASICOCAT. ENZIMAT. (H+)
CARGA + A pH FISIOLOGICOMUY PLARES, SUPERFICE DE PROTEINAS
CARGA NETA (-) A pH FISIOLOGICOHIDRFILO S SUPERFICE DE PRTEIN
AMINOACIDOS ACIDOS
AMINOACIDOS MODIFICADOS
ELASTINA
COLAGENO MEMBRANA DE PLANTAS
ESTRUCTURA PRIMARIAPÉPTIDOS Y ENLACE PEPTÍDICO
Los péptidos se forman por al unión de los aminoácidos (aa) mediante enlaces covalentes de tipo amida llamados enlaces peptídico
OLIGOPEPTIDOS ≤ 20 aaPolipeptidos > 20 aa
CELULA: CELULA: HIDRÓLISIS DE ATP (Aminoacil-tRNA)
ESTRUCTURA DEL ENLACE PEPTIDICO
•CARÁCTER PARCIAL DE DOBLE ENLACE •RIGIDO (no hay rotación C – N )•PLANAR
CONFORMACIONES POSIBLES
ESTUDIO DE LA SECUENCIA PEPTIDICA
ESTUDIO DE LA SECUENCIA PEPTIDICA
ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL DE LAS PROTEINAS
PLEGAMIENTO LOCAL EN LA SECUCENCIA
PLEGAMIENTO DISTALEN LA SECUENCIA
ESTRUCTURAS SECUNDARIAS REGULARES
3,6 RESIDUOS / VUELTA
1,5 Å ENTRE VUELTA Y VUELTA
ESTABILIZACION DE LA HELICE α
ENLACES DE HIDROGENO PARALELOSENTRE EL O (C=O) Y EL H DE LA AMIDA DEL 4° RESIDUO DELANTE DE A HELICE
INTERACCIONES ENTRE CADENAS LATERALES
• aa aromáticos próximos (3-4)• aa pequeños o sin carga (Ala, Leu)
DISPOSICION EN LAMINA PLEGADA β U HOJA β
El esqueleto de la cadena polipeptídica se encuentra extendido Y dispuesto en zig - zag
LAMINA β ANTIPARALELA
GIROS β
FORMAN UN GIRO CERRADO (180°)SUPERFICIE DE LA PROTEINA
Función de proteínas
•Función estructural
•Funciones de transporte
•Función enzimática
•Fundón de protección
•Funciones de señalización
MODIFICACIONES DE PROTEINAS
•MODIFICACIONES POSTRADUCCIONALES
•MODIFICACIONES ANOMALAS
Enfermedad prionica
Enfermedad de Alzheimer (amieloide beta)
Anemia de células falciformes
PURIFICACION Y AISLAMIENTO DE PROTEINAS
Suspensión de cellUltrasonidos
Detergntes
Embolos rostorios
homogenado
Fraccionamiento del homogenado por centrifugación diferencial
SEPARACION DE PROTEINAS1. CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA
Las diferentes proteínas se retrasan según sus interacciones con la matriz de acuerdo a su carga, hidrofobicidad, tamaño u unión a grupos Químicos
CROMATOGRAFÍA DE INTERCAMBIO IONICOLas proteínas se separan de acuerdo a su carga a un pH determinado
CROMATOGRAFÍA DE FILTRACION O EXCLUSION MOLECULAR
Las proteínas se separan de acuerdo a su tamaño
CROMATOGRAFÍA DE AFINIDAD
Las proteínas se separan en función de la especificidad de unión a un ligando.Ligando: glucosa – proteína de unión. Se eluyen agregando exceso de ligando libre
SEPARACION DE PROTEINAS
2. MÉTODOS ELECTROFORÉTICOS
ELECTROFORESIS SDS - PAGE
Separación de proteínas por electroforesis en Geles de poliacrilamida - SDS
ISOELECTROENFOQUETipo de electroforesis en gel con anfolitos que crean un gradiente de ph.Cada proteína migra hasta su punto isoeléctrico.
ELECTROFORESIS BIDIMENSIONAL
Top Related