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    UNIVERSIDADE COMUNITRIA DA REGIO DE CHAPEC

    Programa de Ps-Graduao em Cincias Ambientais

    Drys Angela Cordenunzzi

    AVALIAO TOXICOLGICA DO INSETICIDA METIL PARATION

    E EXTRATO DE CINAMOMO (Melia azedarach L.)

    EM UMA ESPCIE DE PEIXE

    Chapec SC, 2011

  • 2

    DRYS ANGELA CORDENUNZZI

    AVALIAO TOXICOLGICA DO INSETICIDA METIL PARATION

    E EXTRATO DE CINAMOMO (Melia azedarach L.)

    EM UMA ESPCIE DE PEIXE

    Dissertao apresentada ao Programa de

    Ps-Graduao em Cincias Ambientais

    da Universidade Comunitria da Regio de

    Chapec, como parte dos pr-requisitos

    para obteno do ttulo de Mestre em

    Cincias Ambientais.

    Orientador: Prof. Dr. Jacir Dal Magro

    Chapec - SC, set. 2011

  • 3

  • 4

    AGRADECIMENTOS

    Aos professores Luis Flvio de Souza Oliveira, Gilza Maria de Souza Franco e Jacir Dal

    Magro pela amizade e orientao.

    Universidade Comunitria da Regio de Chapec UNOCHAPEC, por disponibilizar os

    recursos que se fizeram necessrios para a realizao desta jornada.

    Secretria de Estado da Educao SED, do Estado de Santa Catarina pela concesso da

    bolsa de estudo do Programa FUMDES.

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    RESUMO

    A utilizao de metil paration, pesticida organofosforado, tem sido recomendada em

    pisciculturas para o controle de predadores aquticos em tanques de produo e recepo de

    larvas de peixe. Entre os produtos que podem apresentar grande eficcia no controle de

    predadores e resultar em menor impacto ao meio ambiente est o pesticida natural

    azadiractina, isolado de plantas da famlia Melia azedarach L., a qual pertence o cinamomo.

    O presente trabalho teve como objetivo analisar os efeitos do pesticida metil paration e do

    extrato de cinamomo sob a tica toxicolgica, pela avaliao da toxicidade aguda 96 horas em

    Pimelodus maculatus, pintado amarelo; desenvolver e validar metodologias em cromatografia

    lquida de alta eficincia (CLAE) avaliando os principais parmetros de validao:

    linearidade, especificidade, preciso, exatido, robustez, limites de deteco e quantificao,

    alm de estudar a bioacumulao, atravs da analise residual em amostras de tecido

    muscular e crebro. O experimento da bioacumulao foi conduzido durante 10 dias

    utilizando Pimelodus maculatus, pintado amarelo. A CL 50-96 h para o metil paration foi 10,87

    mg.L-1

    e 212,23 mg.L-1

    para o extrato de cinamomo. Sinais clnicos de intoxicao do pintado

    amarelo ao metil paration foram observados aps 24 horas de exposio, verificando

    espasmos musculares, natao irregular e perda de equilbrio. Durante as 96 horas de

    exposio ao extrato de cinamomo os animais permaneceram no fundo do aqurio. Os limites

    de deteco e quantificao variaram de 0,000341 a 0,000584 g.L-1

    (metil paration); 4,6 a

    14,18 g.L-1

    (azadiractina). O mtodo analtico desenvolvido mostrou-se rpido, sensvel,

    robusto, seletivo e eficiente. No foi detectado, por cromatografia lquida de alta eficincia

    (CLAE) o composto azadiractina no extrato de cinamomo. Na avaliao da concentrao de

    metil paration, nas amostras de tecido muscular por CLAE, para o experimento de

    bioacumulao, foi observado decrscimo para as concentraes testadas no decorrer dos

    cinco dias do experimento. Foi detectado a presena do pesticida nas amostras de crebro,

    porm o fator de bioacumulao no foi calculado devido a dificuldade de quantificar com

    preciso e exatido sua concentrao final. A excreo de substncias txicas pelos

    organismos obedece a uma cintica de primeira ordem, desta forma o fator de bioacumulao

    pode ser uma ferramenta no controle de qualidade para piscicultura, orientando quanto ao

    tempo de exposio, concentrao e o perodo de carncia para sua eliminao.

    Palavras-chave: Pimelodus maculatus. Toxicidade. Validao.

  • 6

    ABSTRACT

    The use of methyl parathion, organophosphate pesticides has been recommended in fish

    ponds to control aquatic predators in the production and reception of fish larvae. Among the

    products that may have greater efficacy in control and result in less impact on the

    environment Azadirachtin is isolated from plants of the family Melia azedarach L., which

    belongs the cinnamon. The objectives of this study were to evaluate the acute toxicity 96

    hours the pesticide methyl parathion and Melia azedarach L., of acute toxicity by in

    Pimelodus maculatus,; develop and validate methodologies in high performance liquid

    chromatography (HPLC) for evaluating the main validation parameters: linearity, specificity,

    precision, accuracy, robustness, limits of detection and quantification and experimental

    protocol for studying the process of bioaccumulation through the residual analysis in tissue

    muscle and brain. The study was conducted during 10 days using Pimelodus maculates.

    Estimated values of the C50 methyl parathion is 10,87 mg.L-1

    and 212,23 mg.L-1

    for the

    Melia azedarach L. Clinical signs of intoxication to Methyl parathion were observed after 24

    hours of exposure checking muscle spasms, erratic swimming and loss of balance. During 96

    hours of exposure to Melia azedarach L. extract the animals remained in the bottom of the

    aquarium. The method was validated and the intermediate precision (< 15 %) was shown to

    be satisfactory. The detection and quantification limits ranged from 0,000341 a 0,000584

    g.L-1

    (Methyl parathion); 4,6 a 14,18 g.L-1

    (Azadirachtin). The results obtained in the

    validation in showed that method is fast, simple and very sensitive. Was not detected by high

    performance liquid chromatography (HPLC) azadiractin in the compound. In assessing the

    concentration of methyl parathion, in the samples of muscle tissue by HPLC, tested in the

    course for bioaccumulation experiment was observed to decrease the concentrations tested in

    the course of the five days of the experiment bioaccumulation was observed to decrease the

    concentrations tested in the course of the five days of the experiment. Detected the presence

    of the pesticide in samples of brain, but the bioaccumulation factor was not calculated due to

    the difficulty to quantify with precision and accuracy its final concentration. The excretion of

    toxic bodies follows a first order kinetics, thus the bioaccumulation factor can be a tool in

    quality control for fish farming, advising as to the exposure time, concentration and grace

    period for its elimination.

    Keywords: Pimelodus maculatus. Toxicity. Validation.

  • 7

    LISTA DE FIGURAS

    Figura 1- Estrutura qumica do metil paration................................................................. 28

    Figura 2- Exemplares do cinamomo, Melia azedarach L., na propriedade do Sr. Andr

    Colombi............................................................................................................

    29

    Figura 3- Exemplar de Pimelodus maculatus................................................................... 30

    Figura 4- Aclimatao dos peixes nas condies dos bioensaios ................................... 31

    Figura 5- Curva de regresso linear estimada para a mortalidade em Pimelodus

    maculatus, exposto a diferentes concentraes de metil

    paration..............................................................................................................

    39

    Figura 6- Alteraes comportamentais de natao em Pimelodus maculatus, exposto a

    concentrao de 12 mg.L-1

    do inseticida metil paration. Observar perda de

    equilbrio (PE).....................................................................................

    40

    Figura 7- Curva de regresso linear estimada para a mortalidade em Pimelodus

    maculatus, exposto a diferentes concentraes de extrato de

    cinamomo..........................................................................................................

    42

    Figura 8- Perfil cromatogrfico do metil paration, contendo somente o pico do padro

    analtico, obtido nas condies otimizadas.......................................................

    43

    Figura 9- Perfil cromatogrfico da azadiractina, contendo somente o pico do padro

    analtico, obtido nas condies otimizadas.......................................................

    44

    Figura 10- Perfil cromatogrfico do metil paration para o ensaio d