UBAIII Biologia Molecular 1º Ano 2014/2015. 10/out/2013MJC Sumário: Capítulo IV. Síntese e...
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UBAIII Biologia Molecular
1º Ano
2014/2015
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10/out/2013MJC
Sumário: Capítulo IV. Síntese e processamento do RNA
ribossomal e de transferência
a. Síntese e processamento dos percursores de rRNA
b. Síntese e processamento do 5S rRNA
c. RNA de transferência
2
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10/out/2013MJC3
O QUE É PRODUZIDO DURANTE A
TRANSCRIÇÃO?
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RNAs mRNA tRNA rRNA
Todos são processados antes da forma madura (funcional)
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• Unidade de Transcrição
RNA polimerase
• Transcripto primário• Associação
com proteínas
snoRNAsnoRNP
• RNA funcional
Rea-ções de
“cut & paste
”
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Transcrição do rRNA eucariota > 80% do RNA da célula. Unidades de transcrição aglomeradas em 5
“clusters” repetitivos em cromossomas diferentes.
Visíveis na interfase celular como nucléolos
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10/out/2013MJC
Transcrição de rRNA
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TandemZonas espaçadoras
Onde é o início da transcrição?
QUE RNA POLIMERASE?
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10/out/2013MJC
Constituição do ribossoma eucariota
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DE QUE COMPONENTES TEMOS
ESTADO A FALAR?
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10/out/2013MJC T03
8
Unidades Svedberg e rRNA
Subunidade Ribossómica
Coeficiente de Sedimentação
Nº de nucleótidos
Grande 28S 5 000
Pequena 18S 2 000
Grande 5.8S 160
Grande 5S 120
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10/out/2013MJC
Transcrição de rRNA
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FALTA ALGUM?
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10/out/2013MJC
Metilação e Alteração da uridina
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Os transcriptos 1ºs de rRNA são diferentes:
• Pseudouridina (cerca de 95)• Grupos metilo (mais de 100)
QUE FUNÇÃO TÊM ESTAS ALTERAÇÕES?
QUE MOLÉCULAS FAZEM ESTAS ALTERAÇÕES?
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10/out/2013MJC
Processamento do rRNA
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QUE MOLÉCULA FAZ OS CORTES?
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snoRNAs
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METILAÇÃO PSEUDO-URIDINAÇÃO
snoRNA
RNA alvo
snoRPs
(Box C/D) (Box A/H)
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snoRNAs Existem mais de 200 moléculas diferentes
específicas para cada alteração. De onde originam os snoRNAs?
São codificados nos intrões dos genes.
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10/out/2013MJC
Metilação e Box C/D snoRNAs
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10/out/2013MJC
Pseudouridinação e Box A/H snoRNAs
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10/out/2013MJC
Montagem das subunidades do Ribossoma
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No nucléolo
PROTEÍNAS:1 - RIBOSSOMAIS2 - PROCESSADORAS
HELICASES (ASSOCIAÇÃO E DISSOCIAÇÃO)
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10/out/2013MJC
Síntese e processamento do 5S rRNA Síntese fora do nucléolo Genes em repetições tandem mas fora do
nucléolo Transcrito pela RNA polimerase III Reconhecimento do promotor dentro da zona
transcrita Após transcrição é trazido para o nucléolo
para sofrer processamento e ser montado o ribossoma.
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10/out/2013MJC
RNA polimerase III
Transcreve tRNA e snoRNAs além do 5S RNA
No caso dos snoRNA o reconhecimanto é diferente - é a montante da zona transcrita
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II
Quais os efeitos de apagar 1?
Quais os efeitos de apagar II?
Quais os efeitos de alterar a posição de II?
I
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10/out/2013MJC
Genes de tRNA Há cerca de 50 genes de tRNAs em células
animais Repetidos cerca de 1300 vezes em humanos
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10/out/2013MJC
Processamento de tRNA1. Corte do transcripto primário
1. Ribonuclease P
2. Splicing de intrões3. Adição do tripleto CCA no terminal 3’4. Modificação de bases
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Bibliografia
10/out/2013MJC21
Capítulo 5 secção 5.3
Capítulo 30
Capítulo 13