Testes Utilizados Em Diagnóstico Tecnicas Imunologicos e Métodos de Biologia Molecular

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     Testes utilizados em

    Diagnóstico: Técnicas Imunológicas

    e Métodos de BiologiaMolecular

    Profa Alessandra XavierPardini

    Disciplina: Imunologia Clnica

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    Introdu!"o:

    #esposta Imunológica $spec%ca

    & é mais ela'orada

    recon(ecimento clonagem )multiplica!"o decélulas defesa* ativa!"o celular & processocomple+o

    & células: l, T e B

    atacam especi%camente o antgeno& respostaimunológica de memória

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    -istema imune:

    & para a prote!"o e defesa

    & pro'lemas podem ocorrer

    Pro'lemas.Disfun!/es

    & A0T1IM02IDAD$

    & IM021D$3ICI42CIA-& 5IP$#-$2-IBI6IDAD$

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    5ipersensi'ilidade:

    & #ea!"o e+agerada7 alergia 8 envolve as Ig$7 (istamina7 mastócitos

    & Diferentes tipos de alergenos

    & Cuidados com o paciente7 acompan(amento7 afastar o alergeno )n"o

    contato*&  Testes: #A-T )radioimuno* $6I-A )enzim9tico.dosagem de Ig$*7

    testes cutneos

    Autoimunidade:

    & A rea!"o ocorre contra o próprio organismo7 é uma auto agress"o7& Diferentes fatores envolvidos )pré&disposi!"o genética7 rea!"o cruzada

    contra o ;self< )próprio*7 modi%ca!"o do antgeno= fal(a na dele!"o deantgenos

    & Testes: imuno>uoresc?ncia indireta )>uorocromos*7 $6I-A )enzim9tico*

    & Tratamento: imunossupressor7 diferentes drogas7 e+ames periódicos

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    Imunode%ci?ncias:

    & 3al(a da resposta imune7 l, T e B )s"o as mais graves*7 respostainata )menos fre@uente*

    & Diagnóstico la'oratorial com aplica!"o de diferentes técnicas imuno>uoresc?ncia )>uorocromos*7 $6I-A )enzim9ticos*

    & Tratamento: deve&se fazer o acompan(amento do paciente pore+ames periódicos7 transplante de medula 8 acompan(amento7reei!"o

    & Avalia!"o constante do paciente para determina!"o do tratamento$+emplos: 5I7 resposta B7 resposta T7 resposta B e T )com'inada*

     Tolerncia Imunológica:

    & -istema imune torna&se tolerante7 independente do estmulo

    & Tolerante a um determinado antgeno

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    Antgenos& De%ni!"o& Imunogenicidade

    & Antigenicidade& $ptopo

    Considerar: rea!"o cruzada7 rea!"o inespec%ca 8 apósativa!"o Ac de 'ai+a e de alta avidez

    Antgenos 2aturais& (erdados: eritrocit9rios e de Transplante& #ealizar a investiga!"o a %m de se evitar pro'lemas

    transfusionais e diminuir a c(ance de reei!"o

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    Antgenos 2aturais

    & $#IT#1CIT#I1-: tipagem de AB1(7 pela técnica de

    aglutina!"o direta

    &  T#A2-P6A2T$: pela técnica de $6I-A pes@uisa doanticorpo7 pela técnica de PC# pes@uisa do D2A)através de 'andas* )deve&se o'servar a

    compati'ilidade*

    & Cuidados: controle da de rea!"o7 preparo da amostra7da técnica 8 @ualidade na manipula!"o e coleta

    & Compati'ilidade )c(ega a EFG* em rela!"o aotransplante considerar o órg"o

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    A2TIC1#P1-

    Molécula de Ac Sítio de ligação do Agsímbolo

    Sítio de ligação do AgSítio de

    ligação

    do Ag

    antígeno Determinante

    antigênico

    (epítopo)

    C  

    a  d   e  i  a   l  e  v  e   

    C  a  d   e  i   a    p  e  s  a  d   a  

    Fab

    Fc egião dedobradiça

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    Anticorpos:

    Classe7 isótipo:

    6infócito B ativado plasmócitos Ig

    IgA pes@uisada nas secre!/es )IgA secretora*

    Ig$ aumento em alergias7 infec!/es parasit9rias

    IgM aumento em fase aguda

    IgH memória imunológica7 passa pela placenta

    IgD indica a matura!"o dos l, B

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    ANTICORPOS MONOCLONAIS

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    ANTICORPOS MONOCLONAIS -oro possui um grande nmero de anticorpos capazes de

    se ligarem a um antgeno espec%co 8 soro imune

    -"o mensur9veis )diferentes dilui!/es7 de acordo com atécnica*

    Tentativa de se produzir um anticorpo específcopara um determinado epítopo = tecnoo!ia dosanticorpos monoconais

    Anticorpos monoclonais: os anticorpos do preparadocont?m apenas anticorpos vindos de um mesmo clone delinófcito B7 isto é7 vindos de linfócitos com a mesmaespeci%cidade

    Aumento da especi%cidadeHrande aplica!"o pr9tica

    $+emplos: pes@uisa de antgenos (epatite B )Ag5Bs7Ag5Be7 Ag5Bc* )5I* )antgenos em tecidos 5C*7antgenos tumorais7 antgenos de 56A )transplantes*7lin(agem linfocit9ria )CDJK7 CDLK 8 acompan(amentopaciente 5IK técnica de Citometria de 3lu+o ou 3AC-*

     

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    APLICA"#O %A IM'NOLO)IA CL(NICA

    Considera!/es:& Con(ecer o Ag e o Ac 8 caracteriza!"o& Aplica!"o do teste sorológico limiar de reatividade

    )cut-of *&

    Parmetro sorológico 'anco de sangue7 la'oratóriode an9lises clnicas& -ensi'ilidade& $speci%cidade&

    3also&positivo . rea!"o cruzada& 3also&negativo .anela sorológica

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    A 6imiar de m9+ima sensi'ilidade & triagemB 6imiar com m9+imas sensi'ilidade e especi%cidade estudos epidemiológicos

    C 6imiar de m9+ima especi%cidade diagnóstico

     R&ATI*I%A%&

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    Introdu!"o

    & 1s testes sorológicos ou imunoensaios s"o técnicaspara a detec!"o de antgenos7 anticorpos ou

    su'stncias @ue desempen(em papel de antgenos& drogas7 (ormOnios7 9cidos nucléicos

    & 0tilizam reagentes n"o marcados )precipita!"o7aglutina!"o7 >ocula!"o e complemento* ou

    reagentes marcados )>uoresc?ncia7radioimunoensaio7 imunoenzim9ticos*

    & Cada técnica apresenta vantagens7 desvantagens7aplica!"o espec%ca

    & Podem ser manuais ou semi ou totalmenteautomatizadas

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    & Anticorpos monoclonais& Antgenos recom'inantes 8 maior desenvolvimento

     

    Métodos:

    & aperfei!oamento7 consolida!"o do @ue 9 e+iste7tecnologias emergentes7 mel(ora da sensi'ilidade7con%a'ilidade no resultado7 e+ecu!"o mais simples eadapt9veis a automa!"o

    & métodos multiparamétricos: desa%o de detec!"o desu'stncias diferentes simunltneamente

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    & 1s testes sorológicos t?m se tornado cada vez maisre%nados e de e+ecu!"o simples7 porém7 para segarantir a @ualidade dos resultados é necess9rio

    controle rigoroso&  Técnicas cuidadosamente padronizadas )estudo de

    popula!"o7 limiar de reatividade* 8 temperatura7p57 tempo de incu'a!"o7 ttulos7 conugados

    & As metas para o la'oratório clnico devemmel(orar a disponi'ilidade7 e+atid"o e precis"odos testes clnicos7 garantir a interpreta!"o correta

    dos resultados& Controe de +uaidade , testes de m-.ima

    sensi/iidade0 m-.ima especifcidade

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    T1CNICAS COM

    R&A)&NT&S MARCA%OS

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     Técnicas de #eagentes Marcados

    Alta sensi'ilidade

    Boa especi%cidade

    Direta detec!"o de Ag

    Indireta detec!"o de Ac

    Competi!"o amostra compete com reagente marcado

    Custo mais alto produ!"o dos reagentes

    Permitem automa!"o completa ou n"o

    Permite detectar Ac de uma classe espec%ca @ue seam

    espec%cos para um determinado Ag#eagente marcado & Ag ou Ac

    -istema (eterog?neo lavagem retira reagente n"oligado

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    #eagente Marcado

    Marca!"o n"o modi%ca intera!"o Ag&Ac

    Alto custoPermite detec!"o de classes espec%cas de Ac para um

    determinado Ag

     Tipo de marcador determina nome do teste

    MA#CAD1#

    #adioisótopo & #ADI1IM021$2-AI1

    3luorocromo & IM0213601#$-C42CIA$nzima & $6I-A7 IM021&D1T7 $-T$#2 B61T

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    #adioimunoensaio

    && Primeira técnica com reagente marcado& desenvolvido em QRS detec!"o de Ac anti&insulina em pacientes tratados com o (ormOnio

    - radioisótopos & IQUS

    ou IQEQ

    liga!"o a resduos detirosina em protenas

    - vantagens: @uantitativo7 rapidez7 precis"o7 limiarde detec!"o em nano ou picogramas

    -  desvantagens: alto custo do teste7 vida médiados reagentes e risco operacional radiosótopos

    & 0so: Ag e Ac7 marcadores tumorais7 (ormOnios

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    Princpio

    @uantidade de reagente marcado )radioativo* @uanti%ca oAg ou Ac n"o marcado presente na amostra através deliga!"o espec%ca

    medida da resposta & contagem radioativa & tipo deradia!"o emitida

    & radia!/es α e β - contador de cintila!"o

    & radia!"o γ  - contador gama de cristal sólido

    #ealizado em E est9gios

    $st9gio Q constru!"o da curva de cali'ra!"o dilui!"o seriadado padr"o

    $st9gio U interpola!"o dos resultados

    $st9gio E controle de @ualidade )amostras com V W con(ecida*

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    interferente: fra!"o n"o ligada

    Deve&se realizar a remo!"o da fra!"o n"o ligada ouadotar sistema com fase sólida

    & 3ase sólida matrizes particuladas )celulose eagarose* ou superfcie contnua )tu'os7 discos eplacas*

    Ac +traçador +

    Ag da

    amostra

    carbono

    PEG

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     Tipos de #adioimunoensaio

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    Contador de radia!"o gama

    cintiladores

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    #$AH$2T$- 2$C$--#I1-

    •  Ac marcados – alta especificidade – poli ou monoclonais•  Ag ou amostras fixas em lâmina de vidro

    • Glicerina alcalina – pH 8,5 – montagem da com lamínulas

     – meloram a intensidade da emiss!o de fluoresc"ncia

    •  A#ul de $vans ou vermelo %ongo – corantes de fundo –

    meloram a visuali#a&!o da fluoresc"ncia

    • 'âmina de sílica n!o fluorescente e de espessura mínima

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    Microscópio de imuno>uoresc?ncia

    com epilumina!"o

    (iltro de excita&!o

    lâmina

    (luoresc"nciaemitida

    (iltro de

    emiss!o

    (onte de lu#

    )ranca

    câmera

    (i)ra óptica(i)ra

    óptica

    4

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    IM0213601#$-C42CIADI#$TA

    %on*ugado - Ac marcado com fluorocromo• +antagens alta sensi)ilidade e especificidade, possi)ilidade

    de locali#ar componentes intracelulares com fluorocromos

    contrastantes

    • esvantagens um con*ugado para cada Ag

    • .so imunoisto/uímica – doen&as renais e de pele

    célula

    Conjugado

    fluorescente

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    IM0213601#$-C42CIA I2DI#$TAConugado Ac antiimunoglo'ulina espec%co classes

    Dilui!/es seriadas ttulo de Ac m9+ima dilui!"oonde (9 >uoresc?ncia

    antagens: sensvel7 espec%ca7 reprodutvel 7 f9cil7padronizada7 mesmo conugado determina Ac

    produzidos em diferentes doen!asDesvantagens: custo do microscópio7 su'etividade na

    leitura e di%culdade de automa!"o

    0so: detec!"o de Ac para Treponema pallidum )3TA&AB-*, Toxoplasma gondii, vrus da ru'éola7citomegalovrus7 vrus (erpes simples7 Trypanosomacruzi, Plasmodium alciparum7 auto&AcZ

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    Anticorp

    oAntígen

    o

    eação

    prim!ria

    eação

    secund!ria

    Con"ugado Anticorpo

    F#$C

    lavage

    m

    lavage

    m

    Microsc%pio de

    &luorescência

    I3I P$-[0I-A D$ A2TIC1#P1

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    CITOM&TRIA %& 4L'5OP#I2C\PI1: an9lise individual e simultnea de componentes

    celulares através da medi!"o do desvio de luz incidente so'reuma célula e de sinais >uorescentes emitidos pela mesma

    antagens: permite detec!"o do taman(o relativo da célula7 suagranula!"o e de U a Y emiss/es >uorescentes diferentes emmil(ares de células por segundo

    Desvantagens: alto custo7 necessidade de treinamento

    9rios >uorocromos

    0so: imunofenotipagem de linfócitos do sangue periférico de

    pacientes infectados pelo 5I7 diagnóstico e prognóstico deleucemias7 taman(o celular7 granulosidade

     Tam'ém c(amada de 3AC- )>uoresecent&activated cell sorter*

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    Suspensão

    de mistura

    de células

    Con"ugado

    &luorescente

    (eixe de laser etector 

    De&letor 

    Células não'

    &luorescentes

    Células

    &luorescentes

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    CITOM&TRIA 64ACS7 PARA 8I*

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    T9cnicas imunoenzim-ticas

    && Ac ou Ag marcados com enzimas conugado &&N:IMA

    & elevada especi%cidade

    & f9cil de ser o'tida na forma puri%cada

    & conuga!"o a Ag e Ac sem interfer?ncias

    & produto de rea!"o com su'strato f9cil de ser@uanti%cado7 mesmo com pe@uenas @uantidades deenzima

    & est9vel

    & custo acessvel

    & v9rios tipos fosfatase alcalina7 pero+idase

    & determina o tipo de su'strato

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    S';STRATO CROMO)

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    P&RO5I%AS&

    & su'strato 5U1U ligado a um cromógeno

      & cromógeno com produto solvel & 1PD ou TMB

      & cromógeno com produto insolvel & DAB ou J&cloro&Q&naftol

    4OS4ATAS& ALCALINA 

    & cromógeno com produto solvel & 2PP

      & cromógeno com produto insolvel BCIP ou 2BT

    051amarelo

    lil2s

    3-4((

    5--0-%-6-7(

    (osfatase

    alcalina

    09laran*a, a#ul

    marrom, violeta

    :3, ;

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    $nsaio (eterog?neo

    -  etapa de lavagem retira reagente marcado n"oligado a fase sólida

    3A-$ -]6IDA 

    & con(ecido como suporte& tu'os7 microplacas7 micropartculas ou tiras

    & partculas de agarose7 poliacrilamida7 de+tran7poliestireno

    & micropartculas lavagem decanta!"o7centrifuga!"o7 adsor!"o em %'ra de vidro ou captura

    & tipos: $6I-A7 dot $6I-A7 IM0221B61T

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     &LISA

    & capaz de detectar pe@uenas concentra!/es deAg e Ac

    - reagente ligado a uma enzima

    -  imo'iliza!"o em fase sólida & placa deploiestireno

    -  antagens: maior sensi'ilidade eespeci%cidade7 rapidez7 'ai+o custo e adapta!"o

    a diferentes graus de automa!"o-  tipos: direta7 indireta7 de captura e decompeti!"o

    -  0so: detec!"o de Ac para diversas doen!as eA como artculas virais (ormOnios rotenas

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    Resutado

    visual )@ualitativo*densidade óptica )D1*

    )@uanti%ca!"o . espectrofotOmetro*

    6imiar de reatividade );cut&o^

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    $6I-A indireto

    antagens: nico conugado para v9rios sistemas

    0so: detec!"o de Ac de classes determinadas de acordocom Ag @ue sensi'ilizou a placa

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    Lavadora de

    microplacas

    Leitora de

    microplacasacoplada a

    computador 

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    estern Blotting

     identi%ca!"o de protenas recon(ecidas por Ac

     separa!"o das protenas & PM & eletroforese em gelde poliacrilamida

     transfer?ncia eletroforética & nitroceluloseincu'a!"o com amostras & presen!a de Ac

    espec%cos & comple+o formado conugado

    isualiza!"o & cromógeno & precipitado colorido& teste con%rmatório

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    prepara!"o do gel )concentra!"o poliacrilamida.gradiente*-D- )detergente aniOnico.confere carga negativa*

    migra!"o: pólo & pólo K

    preparo da amostra )solu'iliza!"o das protenas*

    tamp"o corrida

    voltagem.amperagem

    transfer?ncia )semi&seco= ;over&nig(t

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    M9todos de ;ioo!ia Moecuar

    Considerar:

    Avan!os na 9rea de Biologia Molecular

    Identi%ca!"o de uma se@_encia espec%ca de D2A ou#2A para diagnóstico

    Método r9pido e e%ciente para ampli%ca!"o dese@_encias espec%cas a partir de uma misturacomple+a de se@_encias genOmicas ou cD2A

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    &strutura do %NA

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    &strutura do %NA

    & 1 material genético de toda a vida neste planeta é formado por apenas

    seis componentesZ

    Acido %eso.irri/onuceico 6A%N0 %NA7:& Contém as instru!/es genéticas& Constru!"o de protenas e #2A& Componentes s"o: uma molécula de a!car )deso+irri'ose*7 um grupamento no

    fosfato e @uatro 'ases nitrogenadas diferentes: adenina )A*7 guanina )H*7citosina )C* e timina )T*Z

    & Adenina e Huanina s"o purinas . Citosina e Timina s"o pirimidinas& Adenina liga&se com Timina )A com T* e Huanina liga&se com Citosina )H com C*& A unidade essencial @ue forma a molécula do D2A é c(amada nucleotdeo @ue

    mais precisamente7 deso+inucleotdeoZ&  Transmiss"o de caractersticas (eredit9rias

    No RNA - uma su/stitui>?o de Timina por 'racia 6'7

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    Importante@

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    & As instru!/es codi%cadas nas se@u?ncias de 'ases nitrogenadas do D2A constituinte dos geness"o transcritas para moléculas de #2A7 e destas7 traduzidas em se@u?ncias de amino9cidos dasprotenasZ

    & RNA ri/ossmico7 @ue constitue7 untamente com certas protenas7 minsculos grnuloscitoplasmaticos denominados ri'ossomos7 capazes de unir os amino9cidos entre si e formar as

    cadeias poipeptídicas Bue constituem as proteínas& RNA transportador0 t3m por Dun>?o capturar amino-cidos ivres nas c9ua0 levando&osaté os ri'ossomos7 onde eles se unem para formar a molécula polipeptdicaZ Cada #2Atapresenta7 em uma determinada regi"o de sua molécula7 uma trinca de 'ases denominadaanticódonZ 1 amino9cido transportado por um #2At depende do seu anticódonZ Por e+emplo7moléculas de #2At com anticódon AAA ou AAH transportam sempre o amino9cido fenilalanina=os #2At com anticódons CCA7 CCH7 CC0 ou CCC transportam somente glicinaZ

    & RNA mensa!eiro0 s?o cEpias dos !enes codifcadores de proteínas e cont?m7 em suase@u?ncia de 'ases nitrogenadas7 as instru!/es so're a ordem em @ue os amino9cidos devemser unidos para produzir determinado polipeptdeoZ

    &

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    CONCL'S#O0O +'& 1 O %NAF

    1 D2A carrega todas as informa!/es de suas caractersticasfsicas @ue7 essencialmente7 s"o determinadas pelas protenasZ

    Dessa forma7 o D2A contém as instru!/es para fazer umaprotenaZ

    2o D2A7 cada protena é codi%cada por um gene )uma se@_?nciaespec%ca de nucleotdeos do D2A @ue especi%cam como umanica protena ser9 feita*Z

    $speci%camente7 a ordem dos nucleotdeos dentro de um genedetermina a ordem e os tipos dos amino9cidos @ue devem sercolocados untos para formar uma protenaZ

    A se@_?ncia espec%ca dos amino9cidos na cadeia é o @uediferencia uma protena de outraZ $ssa se@_?ncia é codi%cada

    no D2A7 onde um gene se codi%ca para uma protenaZ

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    5i tó i

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    5istórico& QRLE& `ar, Mullis& Pr?mio 2o'el de [umica em QRREZ& D2A polimerase & ocorre naturalmente em

    organismosvivos7 onde tem a fun!"o de duplicar o D2A durante adivis"o celularZ A polimerase se liga a um D2A %ta

    simplesriando uma %ta de D2A complementarZ& 2a época ainda n"o (avia sido desco'erta uma D2Apolimerase termoest9velZ Processo inicial de Mullis eraine%ciente7 necessitava de muito tempo7 aten!"oconstante e grandes @uantidades de D2A polimeraseZ

    & 1 processo foi mel(orado

    PCR 6Rea>?o em

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    PCR 6Rea>?o emCadeia daPoimerase7 é uma técnica @ueampli%ca umase@u?ncia espec%cade D2A7 comoo'etivo de torn9&laa'undante edisponvel paradiversas técnicas de'iologia molecularZtécnica ;in vitro<

    replica!"o do D2A

    & [ual@uer se@_?ncia alvo de D2A

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    [ @ @pode ser ampli%cada por PC#

    & A localiza!"o da se@_?ncia alvo éfeita pelos primers

    & 1ligonucleotdeos com UF&UJ 'asess"o usualmente seletivos o su%cientepara localizar um stio nico em umgenoma de alta comple+idade

    & 1 pareamento dos primers com aseqüncia al!o se az peloestabelecimento de pontes de(idrog?nio7 o'edecendo opareamento convencional descritopor atson e Cric

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    AternGncia de temperatura

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    AternGncia de temperatura

    T9cnica

    H %esnatura>?o@

    JKC , KC

    -epara a dupla %ta do template

    em duas %tas simples

    Pareamento@

    KC , KC

    Primers ligam&se em locais

    espec%cos do D2A molde

    &.tens?o@

    KC

    D2A polimerase usa os d2TPs

    adicionando&os a nova %ta de

    acordo com a regra de

    pareamento polimeriza!"oZ

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    L&IT'RA &M )&L %& A)AROS& ,

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    L&IT'RA &M )&L %& A)AROS& ,AN$LIS& %& ;AN%AS , AN$LIS&%OS PRO%'TOS %& PCR

    L&IT'RA &M )&L %& A)AROS& ,

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    L&IT'RA &M )&L %& A)AROS& ,AN$LIS& %& ;AN%AS , AN$LIS&%OS PRO%'TOS %& PCR

    Aplica!/es da Biologia Molecular:

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    Aplica!/es da Biologia Molecular:

    Diagnóstico de doen!as cong?nitas

    Detec!"o de infec!/esMonitoriza!"o de terapia contra o cncer

    -e@uencia de D2A

    3orense

     Transplante resposta de 56A )antgenos naturais* triagem de doadores7 veri%car padr"o de 'andas

     

    Atualmente7

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    2AT Técnica de cido 2ucléico

    & Bio&Manguin(os: para a rede p'lica de sade como tam'émo próprio Ministério da -ade )M-*&QIT NAT 8I*8C*

    &2ome Comercial : `it 2AT 5I.5C Bio&Manguin(os&Apresenta!"o : Material fornecido para rea>es 

    &Descri!"o da %nalidade ou uso do produto: Teste paradetec!"o de cido 2ucléico de 5I )rus da Imunode%ci?nciaAd@uirida* e 5C )rus da (epatite C* em servi!os de(emoterapia7 visando diminuir o risco transfusional causadopor esses agentesZ

    )fonte: relatório U M-* )material 9 copiado aulas 5I.AID- e 5epatites*

    C612AH$M

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    A clonagem é a imita!"o perfeita de um mecanismo dereprodu!"o asse+uada ato multiplicador realizado pororganismos unicelulares ou portadores de poucas

    células7 sensveis a @ual@uer mudan!a no meioam'ienteZ

    $ste método reprodutor gera seres geneticamenteid?nticos b matriz utilizadaZ

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    0m clone é umacópia e+ata de umaplanta ou animal7com todas ascaractersticas dooriginal7 inclusive os

    defeitosZ

    CLONAGEM

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    QZ D2A molde para ampli%ca!"o

    taman(o da molécula

    UZ $scol(a da vetor replica!"o

      transcri!"o

      e+press"o

    Plasmdeo7 fago

    EZ $scol(a da célula (ospedeira

    Bactéria= 6evedura= Inseto= Plantas= Animal

    Teste de Paternidade %NA

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    Apica>?o: Investigar vnculo genético envolvendo %l(o7suposto pai e.ou suposta m"e de um indivduoZ 1 D2A)9cido deso+irri'onucléico* é uma su'stncia @uetransmite as caractersticas (eredit9rias dos pais paraos %l(osZ A maioria das informa!/es genéticas éid?ntica em todos os indivduos da mesma espécieZ$+istem7 entretanto7 regi/es repetitivas polimór%cas7 as

    -T#s );s(ort tandem repeat

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    PROT&(NAS & P&PT(%&OSR&COM;INANT&S

    1 processo de o'ten!"o destas su'stncias é t"o rgido

    @uanto @ual@uer outra molécula medicamentosaZ Alémdos 'ioensaios para veri%car sua atividade 'iológica7 s"otam'ém veri%cados seus padr/es de @ualidade fsico&

    @umicos e micro'iológicos garantindo seguran!a7e%c9cia e esta'ilidadeZ

     $m rela!"o aos efeitos tó+icos7 (9 uma grandepreocupa!"o em averiguar se estas 'iomoléculaspossuem a!/es imunotó+icas7 9 @ue podem ser

    recon(ecidas pelo sistema imunológico como invasoresZ

    Terapia )3nica

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    Terapia )3nica

    Porém a maior limita!"o desta técnica ainda est9 vinculadaao vetor @ue entrega o gene terap?uticoZ

    1 atual o'etivo das indstrias farmac?uticas é a procurapor novos vetores7 principalmente n"o viraisZ

     Alguns aspectos do ponto de vista farmac?utico como:'iodisponi'ilidade7 formas e formula!/es farmac?uticas

    ideais7 classi%ca!"o terap?utica7 farmacocinética efarmacodinmica7 ainda s"o @uest/es @ue nem se@uer

    foram mencionadas de forma concretaZ

    A possi'ilidade de su'stituir genes ausentes

    ou defeituosos7 por outra cópia normal dentrode uma célula som9tica do organismo7demonstra uma mano'ra fant9stica no

    sentido de eliminar as doen!as (umanasZ

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    Agradecimentos

    Profa Adelaide az pelo material gentilmente cedido

    Bi'liogra%a

    Pes@uisa na internet )maio UFQQ*

    ABBA- AZ ` et allZ7 Imunoo!ia ;-sica 4un>es e%istUr/ios do Sistema Imune0 ed revinter7 UFFEZ

    CA6IC5 A CZ7 Imunoo!ia0 ed #evinter7 UFFQZ

    Pes@uisa na internet em novem'ro UFQU

    Pes@uisa na internet em novem'ro UFQE