Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA,...

31
Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE GENES LIGADOS ÀS FUNÇÕES SEROTONINÉRGICA E DOPAMINÉRGICA DE ETILISTAS Ana Luiza Garcia Cunha Orientador: Prof. Humberto Corrêa

Transcript of Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA,...

Page 1: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Suicídio e etilismo

AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE GENES LIGADOS ÀS FUNÇÕES SEROTONINÉRGICA E DOPAMINÉRGICA DE ETILISTAS

Ana Luiza Garcia Cunha

Orientador: Prof. Humberto Corrêa

Page 2: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Introdução

Alcoolismo é uma doença crônica e progressiva caracterizada pela perda do controle sobre o uso de álcool, com conseqüências sociais, legais, psicológicas e físicas.

Alcoolismo tipo I

Alcoolismo tipo II início precoce, mais freqüentemente de outras drogas, mais alcoolismo e depressão entre seus parentes de

primeiro grau maior determinismo genético e associação à

impulsividade /agressividade e comportamento suicida.

Page 3: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Comportamento suicida refere-se à ocorrência de tentativas de suicídio, que são definidas como atos de agressão dirigidos a si mesmo com pelo menos alguma intenção de terminar com a própria vida.

Page 4: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Cerca de 15% dos alcoolistas vão se suicidar, enquanto 40% vão fazer pelo menos uma tentativa de suicídio.

Nos EUA, no ano de 2002 132.353 hospitalizados em decorrência de

tentativa de suicídio 116.639 tratados em departamentos de

emergência e liberados.

65% de todas as tentativas de suicídio estão associadas ao uso de álcool (Department of Health, 1993)

Page 5: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Estudos Genéticos

Estudos história familiar, de gêmeos e de adoção - envolvimento genético.

Candidatos: Sistema Serotoninérgico Sistema Dopaminérgico

Baixos níveis de 5-HIAA no CSF em tentativas violentas impulsivas além de uma alta prevalência de desordens de personalidade e abuso de álcool entre esse subgrupo de pacientes.

5-HIAA – ácido 5-HidroxiindoleacéticoCSF – Fluido Cérebro-espinhal

Page 6: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Mecanismos de produção, liberação e captação da Serotonina

Page 7: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Correlação entre os níveis de 5-HIAA no CSF e HVA (metabólito da via dopaminérgica) no CSF.

O etanol estimula a transmissão dopaminérgica no sistema mesolímbico, especialmente o núcleo accumbens, onde há grande expressão do receptor de dopamina D3, em relação ao receptor D2.

Lesão de terminais dopaminérgicos do núcleo accumbens pela neurotoxina 5-hidroxidopamina eliminam a auto-administração de cocaína papel significante na motivação para o uso de drogas, como cocaína, anfetamina e etanol.

HVA - ácido homovanílico

Page 8: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Neurônios dopaminérgicos projetando da área tegmental ventral para o núcleo accumbens, tubérculo olfatório e septo, amigdala e hipocampo. Esse sistema mesolímbico dopaminérgico está envolvido em comportamentos baseados em emoções, incluindo motivação e recompensa.

Page 9: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Mecanismos de produção, liberação e captação da Dopamina

Page 10: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Objetivos do Estudo

Avaliar diversos polimorfismos de genes envolvidos nas vias serotoninérgica e dopaminérgicas.

Os alvos dessa pesquisa são os genes triptofano hidroxilase (TPH) catecol-O-metiltransferase (COMT) monoamino oxidase A e B (MAO A e MAO B) transportador de serotonina (5-HTT) receptores de serotonina – 5-HT1A, 5-HT2A, 5-HT2C, 5-

HT1B receptor de dopamina D3.

Page 11: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Critérios de Seleção e Avaliação dos Pacientes

Em abstinência Admitidos para tratamento psiquiátrico ambulatorial,

na unidade de internação ou em hospital dia do IPSEMG,

Características clínicas Parâmetros de impulsividade/agressividade História de tentativas de suicídio (letalidade,

gravidade e tipo). Comparação dos escores de suicido, impulsividade / agressividade e outras características de personalidade.

100 pacientes e 100 controles

Page 12: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Transportador de Serotonina 5-HTT

Localizado no cromossomo 17q11.1-q12 Esse gene codifica uma proteína integral de

membrana que transporta o neurotransmissor serotonina da fenda sináptica para o neurônio pré-sináptico.

Essa proteína é alvo de estimuladores psicomotores – como cocaína e anfetaminas.

Page 13: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Um polimorfismo comum (5-HTTLPR) é devido a uma deleção/inserção de 44 pares de bases (SS)/(LL) na região promotora 5’

Esse polimorfismo afeta a taxa de recaptação de neurotransmissor.

Alguns, mas não todos, estudos in vitro demonstraram que o alelo S tem um efeito dominante e diminui a transcrição ou a tradução do mRNA do 5-HTT

Menor ligação de 5-HTT no córtex pré-frontal de vítimas de suicídio

Page 14: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Alelo S mais freqüentes entre pessoas que tentaram suicídio do que não dentro do mesmo diagnóstico psiquiátrico.

LS e SS associados com suicídio violento, mas não com suicídio não-violento.

Pacientes carregando o alelo S parecem ter pouco controle de características impulsivas e agressivas, e talvez tenham uma tendência a agir com métodos mais violentos no impulso para o suicídio ou violência.

Page 15: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Receptor D3 de Dopamina (DRD3)

Cromossomo 3q13.3

O subtipo D3 inibe a adenilato-ciclase através de proteína G inibitória.

DRD3 é expresso em regiões filogeneticamente antigas do cérebro, sugerindo um papel do receptor nas funções cognitivas e emocionais.

Autoreceptores de dopamina inibem a síntese de dopamina, a liberação de dopamina e atividade elétrica dos neurônios dopaminérgico, mecanismos que são presumivelmente envolvidos em respostas comportamentais (como a inibição da atividade locomotora), com pequenas doses de agonistas.

Page 16: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Pré-tratamento de ratos:

D3 agonistas o consumo de etanol.

D3 antagonistas o consumo de etanol.

Apesar disso, em um estudo com ratos nocaute para D3 e ratos C57 controle não achou-se diferença notável tanto no consumo quanto na preferência (3%/10%) de etanol.

Page 17: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Substituição de uma serina por uma glicina.

O estudo de Gorwood et al não confirmou a ligação desse polimorfismo à dependência de álcool.

Page 18: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Outros genes a serem avaliados

triptofano hidroxilase (TPH) catecol-O-metiltransferase (COMT) monoamino oxidase A e B (MAO A e MAO

B) receptores de serotonina – 5-HT1A, 5-HT2A,

5-HT2C, 5-HT1B

Page 19: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Materiais e Métodos

DNA genômico extraído à partir de sangue periférico dos participantes com base na técnica descrita por Boom et al, 1990.

Page 20: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

PCR

DRD3

primer F GCTCTATCTCCAACTCTCACA primer R AGGTCTACTCACCTCCAGGTA

5-HTTLPR

primer F CCGCTCTGAATGCCAGCACCTAAC

primer R AGAGGGACTGAGCTGGACAACCAC

http://employees.csbsju.edu/hjakubowski/classes/ch331/dna/pcr.gif

Page 21: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Reação – 5-HTTLPR

1Tubo 15,5 μL de água

demineralizada e autoclavada 2,5 μL de tampão IIC 2,5 μL de dNTP 0,5 μL de primer F 0,5 μL de primer R 0,5 μL de Taq 3,0 μL de amostra de DNA

http://www.gmd.de/images/divers/cover-eppendorf.jpg

Page 22: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

1- 95ºC por 5 minutos 2- 95ºC por 30 segundos 3- 64ºC por 1 minuto 4- 72º C por 1 minuto 5- Repetição do item 2 ao

item 4 por 35 vezes 6- Extensão final a 72°C por

7 minutos 7- Manter a 4º por tempo

indeterminado

Page 23: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Eletroforese – 5-HTTLPR

Page 24: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Reação – DRD3

1Tubo 19,168 μL de água 3,248 μL de dNTP 3,248 μL de buffer IB 0,652 μL do primer F 0,652 μL do primer R 0,652 μL Taq 1 μL de MgCl2 (25mM) 3,248 de DMSO 3,0 μL da amostra de DNA

http://www.renner-laborbedarf.de/images/12019.jpg

Page 25: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

95ºC por 5 minutos 95ºC por 30 segundos 60ºC por 1 minuto 72ºC por 1 minuto para

extensão das fitas Repetir, do ciclo 2 ao ciclo

5, por 35 vezes; Realizar uma última

extensão a 72ºC por 7 minutos

Resfriar a 4º C

Page 26: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Eletroforese

462bp

Page 27: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Digestão – DRD3

Enzima Msc 1 Sítios de corte

TGG▼CCA e ACC▲GGT

37ºC por 4 horas; 65ºC por 20 minutos; 4º C

111 304 304 206 304

47 206/98 98 206/98

Page 28: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Resultados

36 amostras 5- HTTLPR

Genótipo Fenótipo

LL 0,34

LS + SS 0,66

51 amostras DRD3

Genótipo Fenótipo

Hetero 0,53

Homo Ser 0,33

Homo Gly 0,13

Page 29: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

28 amostras combinadas para DRD3 e 5-HTTLPR

Genótipo FenótipoLL + Hetero 0,214

SS + Hetero 0,214

LS + Hetero 0,214

LL + Homo Serina 0,11

LS + Homo Serina 0,07

SS + Homo Serina 0,11

LL + Homo Glicina 0,035

LS + Homo Glicina 0

SS + Homo Glicina 0,035

Page 30: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Observações

Somente ao final do estudo serão consideradas as características de cada paciente e a sua correlação com o genótipo para que não haja indução na seleção dos pacientes por resultados preliminares.

Todos os genes deverão ser avaliados para que se tenha uma visão ampliada dos fatores que podem estar influenciando no comportamento suicida entre os alcoolistas.

Todas as amostras devem ser avaliadas para que se tenham um número estatisticamente mais válido para uma análise final.

Page 31: Suicídio e etilismo AVALIAÇÃO DAS CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS, COMPORTAMENTO SUICIDA, IMPULSIVIDADE / AGRESSIVIDADE E SUAS ASSOCIAÇÕES COM POLIMORFISMOS DE.

Conclusões

Uma influência genética é certa no comportamento suicida, mas as características ambientais e sociais não devem ser desconsideradas.

Os sistemas serotoninérgico e dopaminérgico aparecem como candidatos a tal influência genética, mas ainda são necessários mais estudos para que se comprove que alterações nesses sistemas aumentam a susceptibilidade ao comportamento suicida associado ao alcoolismo para que, a partir desses dados, estratégias possam ser desenvolvidas no sentido de prevenir uma parte das ações suicidas.