Materiais e Mtodos

Avaliao in vivo de efeitos citotxicos e protetores do extrato etanlico da casca de Spondias purpurea L. DANIEL MOREIRA NERISLORRANE DAVI BRITONATLIA DE MOURA FAGUNDESJOO AUGUSTO RIZZOIntroduoMutaes SubstituiesAdiesSeleesVariabilidade genticaMutaes malficas Doenas NeoplasiasAntimutagnicos e anticarinognicos naturais

ANTIMUTAGNESE E ANTICARCINOGNESE Desmutagnicos Atuam no agenteBioantimutagnicosReparo do DNAPreveno

QUIMIOPREVENO E O USO DE FITOQUMICOS Fitoqumicos atuam sobre a carcinogneseCarotenoidesCompostos fenlicosAlcaloidesCompostos contendo nitrognioCompostos organossulfurados Esses compostos podem ser poderosos aliados na preveno de doenas e devem ser testados clinicamente aps resultados laboratoriais.

O GNERO SpondiasOrigem asitica 14 a 20 espciesRicas em metablitos secundrios, principalmente fenis S. purpurea tem sido usada no tratamento de diarreia, ulceras, disenteria e inchaosExtratos da casca e folhas tem ao antibacterianaPoucos estudos com fitoqumicos da S. purpurea

Teste do microncleo da medula ssea e do sangue perifrico

ObjetivoAvaliar as possveis atividades mutagnicas e antimutagnicas do extrato etanlico da casca da Spondias purpurea L. atravs do teste do microncleo em sangue perifrico e medula ssea de camundongos.

Materiais e MtodosAnimaisSero utilizados camundongos Swiss albinos

Reagentes As cascas da Spondias purpureaControle Positivo:Ciclofosfamida (CPA)Benzopireno (B[a]P)

Tratamento dos animaisOs animais sero distribudos em grupos de 10 (5 machos e 5 fmeas) para cada tratamento

Extrato Vegetal Os extratos sero avaliados nas concentraes de 500, 1000 e 1500 mg/kg p. c., administrados via gavage

Ciclofosfamida Diluda em gua destilada e administrada via intraperitoneal

BenzopirenoDiludo em salina fisiolgica (NaCl 0,9%) e administrado subcutaneamente na regio dorsal

Mutagenicidade1. gua destilada via gavage;2. CPA via intraperitoneal;3. B[a]P via dorsal;4. Extrato 500 mg/kg via gavage;5. Extrato 1000 mg/kg via gavage;6. Extrato 1500 mg/kg via gavage

Antimutagenicidade1. gua destilada via gavage;2. CPA via intraperitoneal;3. B[a]P via dorsal;4. CPA + Extrato 500 mg/kg;5. CPA + Extrato 1000 mg/kg;6. CPA + Extrato 1500 mg/kg;7. B[a]P + Extrato 500 mg/kg;8. B[a]P + Extrato 1000 mg/kg;9. B[a]P + Extrato 1500 mg/kg

ANLISE DO MATERIAL Teste do Microncleo em Clulas da Medula sseaMedula ssea ser retirada e depositada em um tubo de centrfuga contendo 1 ml de soro bovino fetalSobrenadante ser descartado

Em lminas sero feitos esfregaos com uma gota da soluo das clulas obtidas24h depois sero fixadas com metanol por 10'Aps 24h ser feita a colorao com Giemsa 5% diluda em tampo fosfatoSero analisados 2000 eritrcitos

Teste do Microncleo em Clulas de Sangue PerifricoAs lminas sero limpas e aquecidas em uma placa aquecedora a aproximadamente 70 C e colocado soluo de laranja de acridinaSero guardadas em local escuro por no mnimo 24hSer retirado sangue da caudaMantido a 20C na ausncia de luz por no mnimo 24h

A anlise ser feita em microscpio de fluorescnciaSero contados 1000 reticulcitos por animal e anotadas as frequncias de clulas micronucleadas.

ANLISE DE REDUO DE DANOSOnde A o grupo de clulas tratadas com o controle positivo B o grupo de clulas tratadas com o extrato associado ao controle positivo C o grupo do controle negativo.

22 ANLISE DE CITOTOXICIDADE (PCE + NCE)Eritrcitos policromticos (PCE) Eritrcitos normocromticos (NCE) 23ANLISE ESTATSTICAPara a anlise estatstica dos dados, ser empregado o teste de anlise de varincia (ANOVA)24CronogramaFaseAG15SE15OU15NO15DE15JA16FE16MA16AB16MA16JU16JU16AG161X2XXXXX3X4XXXX5XXLegenda:1 - TRATAMENTOS DOS ANIMAIS2 - ANLISE DAS LMINAS3 - ESTATSTICA DAS ANLISES4 - PREPARO DO TRABALHO DE CONCLUSO DE CURSO E DO ARTIGO PARA PUBLICAO5 - TEMPO DE PUBLICAO DO ARTIGO

25Obrigado!26