UNIVERSIDADE ESTADUAL DA PARABA UEPBCENTRO DE CIENCIAS E TECNOLOGIA CCTCURSO DE ENGENHARIA SANITRIA E AMBIENTALCOMPONENTE C.: MICROBIOLOGIA EXPERIMENTAL

ALUNO: KENNY ROGERS DA SILVA HENRIQUESMAT.: 08101034-6

DETECO DE COLIFORMES TOTAIS E ESCHERICHIA COLI EM GUA DE CONSUMO HUMANO PELO MTODO COLILERT

Trabalho referente ao 1 experimento, da segunda unidade 2010.2 do componente de microbiologia experimental, ministrado pela professora Weruska Brasileiro Ferreira.

Campina Grande PBOutubro de 2010INTRODUO

Durante milnios as guas insalubres propagaram epidemias que dizimaram populaes. A cada dia 6 mil pessoas morrem por doenas diarricas, a maioria sendo criana de at cinco anos. As doenas de veiculao hdrica so causadas, principalmente, por microrganismos patognicos de origem entrica, animal ou humana, transmitidos basicamente pela rota fecal-oral, ou seja, so excretados nas fezes de indivduos infectados e ingeridos na forma de gua ou alimento contaminado por gua poluda com fezes (Nikaido et al., 2004).A deteco de agentes patognicos na gua extremamente difcil em razo de suas baixas concentraes e para verificar essa possvel contaminao, considera-se a presena de organismos indicadores como as bactrias do grupo coliformes.A determinao de coliformes totais inclui as bactrias na forma de bastonetes Gram negativos, no esporognicos anaerbios facultativos, capazes de fermentar a lactose com produo de gs, em 24 48 horas a 35C. J a determinao de coliformes fecais a mesma de coliformes totais, porm, restringindo-se aos membros capazes de fermentar a lactose com produo de gs, em 24 horas 44,5 - 45,5C. Esta definio objetivou, em princpio, selecionar apenas os coliformes originrios do trato gastrintestinal. Atualmente sabe-se, entretanto, que o grupo dos coliformes fecais inclui pelo menos trs gneros, Escherichia, Enterobacter e Klebsiela, dos quais dois incluem apenas de origem no fecal. Por esse motivo, a presena de coliformes fecais em gua e alimentos menos representativa, como indicao de contaminao fecal, do que a enumerao direta de E. coli, porm, muito mais significativa do que a presena de coliformes totais, dada a alta incidncia de E. coli dentro do grupo fecal.Com a E. coli a determinao cerca de 95% dos coliformes existentes nas fezes humanas e de outros animais, dentre as bactrias de habitat reconhecidamente fecal, dentro do grupo os coliformes fecais, E. coli a mais conhecida e a mais facilmente diferenciada dos membros no fecais. Todos os demais membros do grupo tm uma associao duvidosa com a contaminao fecal e E. coli, embora tambm possa ser introduzida a partir de fontes no fecais, o melhor indicador de contaminao fecal conhecido at o momento. Por esse motivo, as tendncias atuais se direcionam no sentindo de deteco especfica de E. coli, com o desenvolvimento de diversos mtodos que permitem a enumerao rpida dessa espcie diretamente.

OBJETIVOS

O objetivo desse experimento foi analisar a presena de Coliformes totais e E. Coli, na gua para consumo do Centro de Cincias e Tecnologia CCT UEPB, a partir de duas amostras de fontes distintas.

MATERIAIS E MTODOS

Os alunos e funcionrios do CCT UEPB, desfrutam duas opes para dessedentamento. Uma delas utilizar os vrios bebedouros distribudos pelos corredores do prdio e outra comprar gua mineral vendida em copos descartveis na cantina do Centro. Assim, foram analisadas duas amostras, uma de um bebedouro escolhido aleatoriamente, e outra comprada na citada cantina.Para a quantificao dos indicadores microbiolgicos foi utilizado o sistema Colilert (sistema patenteado por IDEXX Laboratories) que utilizado para deteces simultneas, identificaes especficas e confirmativas de coliformes totais e E. coli em gua continental natural ou tratada. O Colilert utiliza nutrientes (acares ligados a radicais orgnicos cromognicos) que fazem com que os microrganismos de interesse presentes na amostra produzam uma mudana de cor (ou fluorescncia) no sistema inoculado. O meio Colilert contm os nutrientes ONPG (o-nitrofenil- Beta -D-galactopiranosdeo) e MUG (4-metil-umbeliferil- Beta -D-glucorondeo). As enzimas especficas e portanto caractersticas dos coliformes totais (Beta-Galactosidade) e da E. coli (Beta-Glucoronidase) ao metabolizarem os nutrientes, causam a liberao do radical orgnico cromognico, e como conseqncia, a amostra passa a apresentar uma colorao especfica amarela para coliformes totais (ONPG) e fluorescncia (na presena de luz ultravioleta a 365 nm) para E. coli (MUG).O critrio para que as bactrias sejam consideradas ideais indicadoras de poluio de origem fecal, que estejam presentes em grande nmero nas fezes humanas e de animais, em efluentes residuais e ausentes em guas limpas. A E. coli o nico bitipo da famlia Enterobacteriaceae que pode ser considerado exclusivamente de origem fecal.Cada amostra de gua com 100ml, recebeu o meio Colilert e foram posteriormente seladas e incubadas a uma temperatura de 35C por 24 horas fornecendo desse modo os resultados por colorao e fluorescncia.

RESULTADOS

Aps incubao por 24 horas a 35C, foi verificada a colorao das amostras. Uma colorao amarela foi detectada, evidenciando coliformes totais em ambas as amostras. Assim, devido este primeiro resultado, foi conveniente realizar o teste para a deteco de E. coli, submetendo as amostras a presena de luz ultravioleta a 365nm. Aps o teste, as amostras apresentaram caractersticas de fluorescncia, logo, o resultado foi positivo para presena de E. coli.

CONCLUSO

Segundo a portaria 518 do Ministrio da Sade, a presena de coliformes na gua indica contamio, com o risco potencial da presena de organismos patognicos, e uma vez que so mais resistentes na gua do que as bactrias patognicas de origem intestinal. A presena de coliformes totais em alimentos no indica, necessariamente, contaminao fecal ou ocorrncia de enteropatgenos, j em gua para consumo humano tem que estar totalmente ausente de qualquer tipo de coliforme, tanto os totais como os termotolerantes. Pode-se constatar ento que a gua analisada est imprpria para consumo humano.

REFERNCIAS

Nikaido M, Oliveira AS, Trevilato TMB & Segura-Muoz SI. 2004. Anlise da qualidade da gua do crrego Monte Alegre e afluentes, Ribeiro Preto, SP: enfoque para coliformes fecais e metais pesados. O mundo da Sade, 28: 414-420

MORAIS, Eduardo Beraldo de. Qualidade microbiolgica das guas do rio Cabea um afluente na bacia do rio Corumbata, SP. Arquivos da Universidade Estadual Paulista, Av. 24-A, 1515, Rio Claro, Brasil.