Propriedades físico-químicas dos ácidos nucleicos

Desnaturação

• térmica

• variações da constante dielétrica

• variações extremas de pH

Desnaturação térmica

Conseqüencias

• perda da viscosidade

• aumento da absorbância da luz UV

• aumento dos coeficientes de sedimentação

Efeito hipercrômico

Composição em bases

Temperatura Média de Fusão

DNA bacteriano

DNA viral

Centrifugação em gradiente de densidade

• cloreto de césio – 8 M

• sacarose (gradientes pré-construídos)– 20 a 30 %– 25 a 35 %– etc

Eletroforese

• migração de partículas é dependente de:

– carga elétrica

– tamanho das partículas

– formato das partículas

Migração eletroforética

Hibridização molecular

• pareamento de bases entre cadeias

– DNA/DNA

– DNA/RNA

Hibridização Molecular

Decorrências:

• Análise genética visando o conhecimento do grau de homologia entre amostras de ácidos nucleicos

• Construção de sondas moleculares que permitam a identificação de regiões específicas do genoma

Aplicações práticas:

• determinação de paternidade

• estudos filogenia molecular

Teste do DNA