Produção in vitro de embriões bovinos - disciplina · Roteiro I. Produção in vitro de...
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Produção in vitro de embriões bovinos com suplementação de modificadores do
metabolismo do triacilglicerol.
Orientado: Camila Gabriela Pereira VaqueroOrientador: Prof. Dr. Felipe Perecin
Laboratório de Morfofisiologia Molecular e Desenvolvimento da Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos da Universidade de São Paulo
Roteiro
I. Produção in vitro de embriões bovinos no BrasilII. Efeitos da suplementação no meio de cultivoIII. Biossíntese de triacilglicerolIV. ObjetivosV. Metodologia e Delineamento experimentalVI. Perspectivas da suplementação
PIV no Brasil•Rebanho nacional: 190 milhões de animais (IBGE, 2011)
•Avanço das biotécnicas de PIV
•Acelera o melhoramento genético
•Evita descarte precoce de fêmeas de alto valor genético com infertilidade adquirida
•Segundo IETS: 453.471 embriões produzidos in vitro em 2011
•Brasil: 86% do total dos embriões PIV
• Entrave: Criotolerância de embriões de PIV
Soro Fetal Bovino (SFB)
• Clivagem• Desenvolvimento• Morfologia• Síndrome do Feto Grande• Acúmulo de lipídeo
• Criotolerância
Fonte: Abe et al., 2002.
Cultivo in vitro
• Primeiras clivagens• Ativação genoma embrionário• Compactação da mórula• Diferenciação nos 2 tipos celulares
Suplementação com Ácido LinoléicoConjugado (CLA)
• Reduzir o acúmulo lipídico em embriões
Fonte: Rahme, L. S. T., 2012
Suplementação com CLA
• Aumenta a fluidez da membrana
incorporação do CLA
• Aumenta a taxa de sobrevivência após a vitrificação
Fonte: Pereira et al., 2007.
Objetivo Geral
• Avaliar os efeitos do CLA e do PES sobre o desenvolvimento embrionário e sobre o metabolismo dos triacilgliceróis.
Objetivos Específicos
• Taxa de clivagem e de blastocisto com CLA e PES (Experimento 1)
• Expressão gênica (Experimento 1):- estearoil coenzima A dessaturase (SCD) - fatores de transcrição SREBP-1c (sterol regulatory element-binding proteins)
• Taxa de gestação com 30 e 60 dias (Experimento 2)
Delineamento Experimental
ovários
oócitosCCOs
MIV/FIV
Cultivo in vitro
controle
Taxa de desenvolvimento
Expressão gênica
CLA
Taxa de desenvolvimento
Expressão gênica
PES
Taxa de desenvolvimento
Expressão gênica
CLA + PES
Taxa de desenvolvimento
Expressão gênica
Experimento 1:
Delineamento ExperimentalOPU
Vacas Holandesas
oócitosCOC's
MIV/FIV
Cultivo in vitro
controle
Taxa de desenvolvimento Vitrificação
Transferência dos embriões
Taxa de prenhez
Suplemento com melhor taxa de desenvolvimento e biossíntese de TAG
Taxa de desenvolvimento Vitrificação
Transferência dos embriões
Taxa de prenhez
Experimento 2:
Contribuição deste projeto para a área de conhecimento
• Melhorar as taxas de produção in vitro e a competência embrionária
• Compreender os efeitos dos sistemas in vitro sobre os mecanismos de acúmulo de lipídeos