prática 07 - Bioquímica
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IntroduçãoOs lipídeos se caracterizam por sua insolubilidade em
água e em presença solubilidade em solventes
orgânicos como clorofórmio, éter, benzeno, mistura de
Folch (clorofórmio:metanol). A grande maioria dos
lipídeos apresenta ácidos graxos esterificados em sua
estrutura, abrangendo os acilgliceróis ou glicerídeos, os
cerídeos, os fosfolipídeos e os glicolipídeos. Estes
compostos, mediante aquecimento em presença de
bases fortes como KOH e NaOH, produzem sais de
sódio ou potássio de ácidos graxos ou sabões
alcalinos. Devido a esta propriedade, estes lipídeos são
denominados de lipídeos saponificáveis já que podem
ser caracterizados pela saponificação.
Exemplo:
Os sabões são moléculas anfipáticas, apresentando
em sua estrutura uma longa cadeia hidrocarbonada
(cauda apolar) e um grupo carboxilato (cabeça polar).
Formam soluções coloidais estáveis em água, já que
as moléculas se associam por interações hidrofóbicas
entre as caudas apolares formando micelas,
apresentando grupos carboxilato carregados
negativamente na superfície das mesmas. Na
superfície da água, as moléculas de sabão se orientam
em uma camada onde as cabeças polares interagem
com a água e as caudas apolares permanecem fora do
líquido. Esta disposição provoca o abaixamento da
tensão superficial da água. Os ácidos graxos dos
sabões podem ser precipitados pela adição de ácidos
fracos (ácido acético).
SABÕES INSOLÚVEISOs sabões de metais alcalinos terrosos (Ca+2) são
insolúveis porque se encontram praticamente não
dissociados.
CAPACIDADE EMULSIFICANTEOs sabões também possuem poder emulsificante visto
que quando agitados com óleo ou gordura, em meio
aquoso, interagem com os mesmos através das caudas
apolares produzindo gotículas carregadas que se
mantêm em emulsão.
Objetivos- Caracterizar os triacilgliceróis através de hidrólise
alcalina (reação de saponificação);
- Analisar a composição desses lipídios através de
reações de saponificação e precipitação.
Materiais e Reagentes: - óleo vegetal (1 mL em cada tubo);
- 1 béquer;
- 3 tubos de ensaio;
- 1 Bastão de vidro;
- Solução de Hidróxido de potássio 40% em etanol
(1:1);
- Solução de cloreto de cálcio;
- Solução saturada de cloreto de sódio;
- Banho-maria;
Prática – 07 Pág. 1/2 Bioquímica – Nutrição bloco II
::. CARACTERIZAÇÃO DE TRIACILGLICERÓIS EM ÓLEO VEGETAL.::
- Ácido acético concentrado (CAPELA);
- 3 pipetas (p/ medir volumes).
ProcedimentosSaponificação:
Colocar 15 gotas do óleo em um tubo de
ensaio;
Colocar 5 mL de KOH 40%;
Aquecer o tubo a aproximadamente 90ºC por
30 minutos;
Registrar os dados.
Análise de características de sabões: Agitar o tubo e verificar a formação de
espuma;
Registrar o ocorrido.
Dividir o conteúdo em 3 tubos de ensaio;
Adicionar Ácido acético concentrado em
outro tubo de ensaio, gota a gota, até notar
a presença de precipitado branco insolúvel
que são ácidos graxos com baixo grau de
dissociação;
Registrar o ocorrido.
Adicionar gotas de CaCL2 e agitar até a
formação do precipitado branco, que são os
sabões de cálcio;
Registrar o ocorrido.
Ao último tubo adicionar solução de Cloreto
de sódio saturada e observar a formação de
um precipitado de sabão por excesso de
sais neutros (efeito do íon comum);
Registrar o ocorrido.
Explicar o processo de solubilização dos
lipídios.
Explicar o mecanismo da reação de
saponificação.
Discutir como poderiam ser analisados os
ácidos graxos.
REAGENTES TUBO 1 TUBO 2 TUBO 3solução de sabão* 2 ml 2 ml 2 mlsolução de NaCl 5 gotas - -
solução de H3CCOOH - 5 gotas -
solução de CaCl2 - - 5 gotas
Questionário1. Escrever a reação de hidrólise do triglicerídeo
Trinoleína.
2. Por que se utiliza etanol na reação de
saponificação?
3. Explicar a ação detergente dos sabões.
4. Explicar a precipitação de sabões por excesso de
eletrólitos.
BIBLIOGRAFIAALFENAS, A. C. Eletroforese de isoenzimas e proteínas afins: fundamentos e aplicações em plantas e microorganismos. Viçosa: U.F.V., 1998,
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Prática – 07 Pág. 2/2 Bioquímica – Nutrição bloco II