prática 07 - Bioquímica

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Introdução Os lipídeos se caracterizam por sua insolubilidade em água e em presença solubilidade em solventes orgânicos como clorofórmio, éter, benzeno, mistura de Folch (clorofórmio:metanol). A grande maioria dos lipídeos apresenta ácidos graxos esterificados em sua estrutura, abrangendo os acilgliceróis ou glicerídeos, os cerídeos, os fosfolipídeos e os glicolipídeos. Estes compostos, mediante aquecimento em presença de bases fortes como KOH e NaOH, produzem sais de sódio ou potássio de ácidos graxos ou sabões alcalinos. Devido a esta propriedade, estes lipídeos são denominados de lipídeos saponificáveis já que podem ser caracterizados pela saponificação. Exemplo: Os sabões são moléculas anfipáticas, apresentando em sua estrutura uma longa cadeia hidrocarbonada (cauda apolar) e um grupo carboxilato (cabeça polar). Formam soluções coloidais estáveis em água, já que as moléculas se associam por interações hidrofóbicas entre as caudas apolares formando micelas, apresentando grupos carboxilato carregados negativamente na superfície das mesmas. Na superfície da água, as moléculas de sabão se orientam em uma camada onde as cabeças polares interagem com a água e as caudas apolares permanecem fora do líquido. Esta disposição provoca o abaixamento da tensão superficial da água. Os ácidos graxos dos sabões podem ser precipitados pela adição de ácidos fracos (ácido acético). SABÕES INSOLÚVEIS Os sabões de metais alcalinos terrosos (Ca +2 ) são insolúveis porque se encontram praticamente não dissociados. Prática – 07 Pág. 1/2 Bioquímica – Nutrição bloco II ::. CARACTERIZAÇÃO DE TRIACILGLICERÓIS EM ÓLEO VEGETAL.::

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Page 1: prática 07 - Bioquímica

IntroduçãoOs lipídeos se caracterizam por sua insolubilidade em

água e em presença solubilidade em solventes

orgânicos como clorofórmio, éter, benzeno, mistura de

Folch (clorofórmio:metanol). A grande maioria dos

lipídeos apresenta ácidos graxos esterificados em sua

estrutura, abrangendo os acilgliceróis ou glicerídeos, os

cerídeos, os fosfolipídeos e os glicolipídeos. Estes

compostos, mediante aquecimento em presença de

bases fortes como KOH e NaOH, produzem sais de

sódio ou potássio de ácidos graxos ou sabões

alcalinos. Devido a esta propriedade, estes lipídeos são

denominados de lipídeos saponificáveis já que podem

ser caracterizados pela saponificação.

Exemplo:

Os sabões são moléculas anfipáticas, apresentando

em sua estrutura uma longa cadeia hidrocarbonada

(cauda apolar) e um grupo carboxilato (cabeça polar).

Formam soluções coloidais estáveis em água, já que

as moléculas se associam por interações hidrofóbicas

entre as caudas apolares formando micelas,

apresentando grupos carboxilato carregados

negativamente na superfície das mesmas. Na

superfície da água, as moléculas de sabão se orientam

em uma camada onde as cabeças polares interagem

com a água e as caudas apolares permanecem fora do

líquido. Esta disposição provoca o abaixamento da

tensão superficial da água. Os ácidos graxos dos

sabões podem ser precipitados pela adição de ácidos

fracos (ácido acético).

SABÕES INSOLÚVEISOs sabões de metais alcalinos terrosos (Ca+2) são

insolúveis porque se encontram praticamente não

dissociados.

CAPACIDADE EMULSIFICANTEOs sabões também possuem poder emulsificante visto

que quando agitados com óleo ou gordura, em meio

aquoso, interagem com os mesmos através das caudas

apolares produzindo gotículas carregadas que se

mantêm em emulsão.

Objetivos- Caracterizar os triacilgliceróis através de hidrólise

alcalina (reação de saponificação);

- Analisar a composição desses lipídios através de

reações de saponificação e precipitação.

Materiais e Reagentes: - óleo vegetal (1 mL em cada tubo);

- 1 béquer;

- 3 tubos de ensaio;

- 1 Bastão de vidro;

- Solução de Hidróxido de potássio 40% em etanol

(1:1);

- Solução de cloreto de cálcio;

- Solução saturada de cloreto de sódio;

- Banho-maria;

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::. CARACTERIZAÇÃO DE TRIACILGLICERÓIS EM ÓLEO VEGETAL.::

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- Ácido acético concentrado (CAPELA);

- 3 pipetas (p/ medir volumes).

ProcedimentosSaponificação:

Colocar 15 gotas do óleo em um tubo de

ensaio;

Colocar 5 mL de KOH 40%;

Aquecer o tubo a aproximadamente 90ºC por

30 minutos;

Registrar os dados.

Análise de características de sabões: Agitar o tubo e verificar a formação de

espuma;

Registrar o ocorrido.

Dividir o conteúdo em 3 tubos de ensaio;

Adicionar Ácido acético concentrado em

outro tubo de ensaio, gota a gota, até notar

a presença de precipitado branco insolúvel

que são ácidos graxos com baixo grau de

dissociação;

Registrar o ocorrido.

Adicionar gotas de CaCL2 e agitar até a

formação do precipitado branco, que são os

sabões de cálcio;

Registrar o ocorrido.

Ao último tubo adicionar solução de Cloreto

de sódio saturada e observar a formação de

um precipitado de sabão por excesso de

sais neutros (efeito do íon comum);

Registrar o ocorrido.

Explicar o processo de solubilização dos

lipídios.

Explicar o mecanismo da reação de

saponificação.

Discutir como poderiam ser analisados os

ácidos graxos.

REAGENTES TUBO 1 TUBO 2 TUBO 3solução de sabão* 2 ml 2 ml 2 mlsolução de NaCl 5 gotas - -

solução de H3CCOOH - 5 gotas -

solução de CaCl2 - - 5 gotas

Questionário1. Escrever a reação de hidrólise do triglicerídeo

Trinoleína.

2. Por que se utiliza etanol na reação de

saponificação?

3. Explicar a ação detergente dos sabões.

4. Explicar a precipitação de sabões por excesso de

eletrólitos.

BIBLIOGRAFIAALFENAS, A. C. Eletroforese de isoenzimas e proteínas afins: fundamentos e aplicações em plantas e microorganismos. Viçosa: U.F.V., 1998,

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ALFENAS, A. C.; PETERS, I.; BRUNE, W.;

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U.F.V., 1991. 242p.

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LAEMMILI, U. K. Cleavage of strutural proteins during assembly of the head of bacteriophag T4. Nature, London, v.227, p.680-685, 1970.

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