PROTEÍNAS TOTAIS E SÉRICAS

PROF; DIMAS CAMPIOLO

PROTEÍNAS TOTAIS E SÉRICAS

Proteínas totaisAlbuminaGlobulinas

PROTEÍNAS TOTAIS Existem mais de 300 proteínas diferentes já

identificadas no plasma sanguíneo.

Apenas algumas são avaliadas rotineiramente

Amostras mais usadas: sangue, urina, LCR, líquido amniótico, peritonial, pleural ou sinovial, saliva ou fezes.

PROTEÍNAS TOTAIS Funções:

- transporte- manutenção da pressão coloidosmótica- tamponamento de ΔpH- imunidade humoral- atividade enzimática- coagulação- resposta da fase aguda

PROTEÍNAS TOTAIS A concentração das proteínas

plasmáticas é determinada por três fatores:

- Velocidade de síntese: A maioria produzida no fígado. Cerca de 25g/dia num indivíduo de 70kgs

- Volume de líquido: Cerca de 250g de proteínas são encontradas no compartimento vascular de um homem de 70kgs, dando uma concentração ao redor de 7,0g/dl- Velocidade do catabolismo: As proteínas totais são degradadas, liberando aminoácidos para a síntese de proteínas celulares.

PROTEÍNAS TOTAIS Determinação das proteínas totais:

- Método do Biureto: O cobre, em meio alcalino, reage com a ligação peptídica. O produto apresenta bandas de absorção.Interferentes: Substâncias que possam reagir com o íon cúprico. Ex: Bilirrubina aumentada, triglicerídeos acima de 500mg/dlVR soro: 6,0 – 8,0g/dl

PROTEÍNAS TOTAIS Outros métodos:

- Método de Lowry- Método de Bradford- Método de Smith

Paciente: Jejum de 8 horasAmostra: soro sem hemólise e não lipêmico

PROTEÍNAS TOTAIS Hiperproteinemia

- Desidratação (vômito, diarréia ou acidose diabética)- Mieloma múltiplo- Cirrose hepática- Hepatite ativa crônica- Lupus eritematoso sistêmico- Infecções bacteriana crônica

Hipoproteinemia - Hemodiluição- Perda renal de proteínas- Queimaduras severas-Desnutrição (Kwashiorkor) -Hipertireoidismo-Hemorragia grave

ALBUMINA Representa cerca de 60% das proteínas do

plasma humano. Meia vida de 15-19 dias Velocidade de síntese depende da ingestão

protéica e regulada por feedback negativo pelo teor de albumina circulante

Produção de cerca de 15g/ dia

ALBUMINA Funções

- Regulação osmótica- Transporte e armazenamento : Ácidos graxos e esteróides; bilirrubina; farmacos etc.

Síntese : no fígado, na forma de pro-albumina. Degradação: mecanismo desconhecido,

degradadas aleatoriamente (novas e velhas), provavelmente pelos endotélio dos capilares, medula óssea e sinusóides hepáticos.

ALBUMINA Determinação da albumina

- Métodos de corantes: Metil orange, HABA, verde de bromo cresol(VBC) e púrpura de bromocresolVR: 3,5 a 5,5g/dl - Eletroforese- Fracionamento salino

ALBUMINA Paciente : Não consumir dieta rica em

gordura por 48hr antes da prova Amostra: soro, observar postura dos

pacientes, pois em pacientes ambulatoriais o teor de albumina é cerca de 0,3g/dL maior que em pacientes hospitalizados.

Interferências: Elevação ACO, agentes citotóxicos. Redução Paracetamol, aspirina, ACO, ampicilina

ALBUMINA Hiperalbuminemia

- É rara- Encontrada em casos de carcinomatose metastática, desidratação aguda, diarréia, estresse, febre reumática, meningite, osteomielites, traumatismo, tuberculose, hemoconcentração, entre outros.

ALBUMINA Hipoalbuminemia

- Redução da síntese: Cirrose- Ingestão inadequada de proteínas: A síntese é reduzida a um terço durante um jejum de 24hr- Perda protéica extravascular: Síndrome nefrótica (proteinúria massiva) e enteropatia perdedora de proteínas- Queimaduras extensas : a pele é o maior local de armazenamento extravascular da albumina.- Hemodiluição: Ascites, ICC- Estresse- Analbuminemia

ALBUMINA Conseqüências da hipoalbuminemia

- Edema facial, macroglossia, icterícia conjuntival- Bradicardia, hipotensão, cardiomegalia- Hepato-esplenomegalia, ascites- Encefalopatias- Atrofia testicular- Ginecomastia, hipotermia

FRACIONAMENTO ELETROFORÉTICO

A eletroforese de proteínas (EFP) no soro é uma técnica simples para separar as proteínas do soro. É o teste de triagem mais utilizado para investigação de anormalidades das proteínas séricas. Em condições normais, são separadas cinco bandas do soro: albumina, alfa-1, alfa-2, beta e gamaglobulinas. Eventualmente, pode ser observada a presença da pré-albumina.

FRACIONAMENTO ELETROFORÉTICO

ELETROFORESE DE PROTEÍNAS

FRACIONAMENTO ELETROFORÉTICO

GLOBULINAS Região α1

-Alfa1-antitripsina (AAT)Tem como função a inibição de várias

proteases provenientes dos neutrófilos.Proteção contra destruição da parede alveolar

VR: 20 - 60μmol/L

GLOBULINAS- Alfa1-glicoproteína ácida(AAG)Tem como função primária inativar a progesterona, alem de interagir com alguma drogas. Aumentada na artrite reumatóide, Lúpus, queimaduras e infarto. O papel exato da AAG não é conhecido-Alfa1-Fetoproteína (AFP)Usada para detectar defeitos de tubo neural em fetos, examinado através do líquido amnióticoVR líquido amniótico: 5 a 25mg/dl-Alfa 1- LipoproteínaTransportadora de lipídeos

GLOBULINASRegião α2

-Haptoglobina (HAP) Transportadora de Hb para o retículo endotelial para ser degradada. Aumentada durante os processos inflamatórios e diminuída em síndromes hemolíticas. - Alfa2-macroglobulinainibidora de proteases. Aumentada durante a infância e na síndrome nefrótica e está diminuída em hepatopatias crônicas. - Ceruplasmina (CER)é fixadora de cobre. Está diminuída nas anemias e aumentada em neoplasias malignas; proteína de fase aguda tardia.

GLOBULINAS Região β1

-Transferritina(TRF)Transporta o ferro do intestino até a medula óssea. Está aumentada na depleção de ferro e diminuída nas perdas protéicas e hepatopatias crônicas. -Hemopexina (HX) Transporta o grupamento Heme até o fígado-Beta-lipoproteína Transportadora de lipídeos-Complemento C4 Resposta humoral, participa da via clássica do complemento. A deficiência resulta redução da resposta a infecções.

GLOBULINASRegião β2

- Fibrinogênio Substrato da trombina, não encontrado em fracionamentos eletroforéticos pois a amostra usada é o soro -Complemento fração C3 Atua na resposta imunológica humoral- Beta2- microglobulina (BMG) Proteína usada para testar a função tubular renal. Elevada em IR

GLOBULINAS Região γ (gama)

-Proteína C reativa Marcador não-específico de lesão tecidual, infecção ou necrose celular associada com infarto ou malignidadeVR: 0-800μg/dl

ImunoglobulinasSintetizadas pelo sistema Sintetizadas pelo sistema imune em resposta a uma partícula estranha.imune em resposta a uma partícula estranha.-Reconhecem,reagem,neutralizam bactérias, -Reconhecem,reagem,neutralizam bactérias, vírus e proteínas estranhas.vírus e proteínas estranhas.-Constituídas por proteínas com estrutura em y.-Constituídas por proteínas com estrutura em y.-4 cadeias: 2 leves(L) e 2 pesadas(H)-4 cadeias: 2 leves(L) e 2 pesadas(H)- Antígeno se liga a região variável das cadeias.- Antígeno se liga a região variável das cadeias.- IgG, IgM, IgA, IgD e IgE- IgG, IgM, IgA, IgD e IgE

GLOBULINAS Imunoglobulinas (valores de referência)

IgG (1,2,3,4)85% das Ig totais, atravessa a barreira placentáriaVR:800-1800mg/dl

IgM 5-10% das Ig totaisVR: 50-150mg/dl

IgE importante papel na atopia e imunidade antiparasitáriaVR:0-0,2mg/dl

GLOBULINAS Hipogamaglobulinemia

-Imunodeficiências hereditárias-Imunodeficiência adquirida: neoplasias linfóides, IR, terapia imunossupressiva-Mieloma múltiplo, leucemia linfocítica crônica-Crianças prematuras-Fármacos: Fenitoína, carbamazepina, ác. Valpróico

GLOBULINAS Gamopatias

policlonais-Aumentos difusos das gamaglobulinemias-Causado por: lepra, tuberculose, cirrose biliar primária, cirrose portal, hepatite crônica ativa, doença de Crohn, lúpus eritematoso sistêmico

Gamopatias monoclonais-Encontrada em: Mieloma múltiplo, macroglobulinemia de Waldenström, doença da cadeia pesada (doença de Franklin)

GLOBULINAS

Eletroforese de proteínas séricas em gel de agarose,

(1) hipergamaglo-bulinemia em processo inflamatório; (2) e (3): fracionamento normal;

(4) gama monoclonal no mieloma múltiplo.

GLOBULINAS Perfis eletroforéticos patológicos:

-Mau fornecimento protéico: albumina , 1 e 2, , -Perdas protéicas – Síndrome Nefrótica: albumina , 1, 2, , (varia)-Hepatite crônica: albumina, -Hepatite aguda: albumina ou normal, 1, 2 normal ou , e -Cirrose: albumina , 1,2 normal ou , , fusão das frações e

GLOBULINAS

FIM