Outbreaks of Multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa in Community Hospitals Japan
description
Transcript of Outbreaks of Multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa in Community Hospitals Japan
Outbreaks of Multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa in Community
Hospitals Japan
Andréa Lanzara IanniDaniela SoaresMariana Lemos
Verônica Boeira Reina
Pseudomonas aeruginosa
-bactéria gram negativa, aeróbia, baciliforme-patógeno oportunista-infecções nosocomiais-sobrevive em muitos ambientes-resistência a muitos antibióticos e antisépticos
-beta-lactamicos-aminoglicosideos-quinolonas
Introdução
-infecção no trato urinário envolvendo P. aeruginosa (cepa IMCJ2.S1) resistente a vários medicamentos em um hospital do Japão
-possui novo integron classe 1(In113) contendo 3 genes cassetes:
Gene Metalo-β-lactamase(MBL) blaIMP-1
Gene aminoglicosídeo 6’-acetiltransferase aac(6’)-Iae Gene aminoglicosídeo 3’-adneliltransferase aadA1
- mutação nos genes gyrA e parC (substituição de aminoácidos) resistência a fluoroquinolonas
Material e Métodos - 13 hospitais do Japão - outubro de 2003 a setembro de 2004 - 284 isolados clínicos de P. aeruginosa
-214 isolados clínicos - MDR
214 isolados - MDR
70 isolados - não MDR
72 – urina 55 - cateter urinário
18 – trato respiratório
5 – fezes
2 – ponta de cateter
2 – feridas
99/214
Material e MétodosTeste bioquímico - confirmação da identidade das espécies através de métodos colorimétricos com kit API20NESorotipagem – teste de aglutinação Suscetibilidade antimicrobiana – através do MIC50 e MIC90
Screening para produção de MBL (multiresistência a β-lactâmicos)Detecção imunológica de AAC(´6) – Iae – através da aglutinação com Ac conjugadoPCR de integron classe 1 (já foi descrito previamente e a identificação do mesmo, na estrutura, caracteriza a multiresistência a drogas)PCR de QRDRs - identifica regiões determinantes de resistência a quinolonasLAMP (amplificação isotérmica de DNA)Sequenciamento de DNAEletroforese em gel de campo pulsátil - PFGE
Resultados
Sorotipagem
-10 sorotipos identificados - O11, O1, O10, B, M, O4, O3, O6, O9, C
-214 MDR 212 O11 (99%)
-70 não MDR – variável O1, O3, O4, O6, O9, O10, O11, B, C, M
- O11 – predominante para MDR P. aeruginosa nesta população
Resultados Suscetibilidade Microbiana
MDR P. aeruginosa
- Resistência - maioria dos isolados MDR P.aeruginosa apresentou resistência a todos os antimicrobianos
- Sensibilidade
Não MDR P. aeruginosa
-Resistência – menos de 63%, exceto para STR ( 98,6%)
Gentamicina (GEN) – 57,5% de resistência
Polimixina B ( PL-B) – 28,0% de resistência
Resultados Screening para verificação de produção de MBL - 214 MDR – 212 produziram MBL
Detecção imunológica de AAC(6´)Iae
Resultados Detecção de integrons classe 1 (PCR) - 230/284 – positivo para integron classe1 - 212/230 – apresentaram mesmo tamanho de banda comparado
ao integron classe 1 In113
Resistência a fluorquinolonas GyrA -254/284 isolados clínicos - substituição de aminoácido ParC -244/284 isolados clínicos - substituição de aminoácido GyrB -70/284 isolados clínicos - substituição de aminoácido ParE -30/284 isolados clínicos - substituição de aminoácido
Resultados Análise do gene aac(6’)-Iae (Método de LAMP)
-Laranja para verde = amplificação positiva
-212/284 positivo
-Concordância com os resultados de PCR
-presença de gene aac (6’)-Iae – MDR cepas
Resultados PCR=LAMP
Resultados Genotipagem por PFGE
MDR P.aeruginosa 211/214 – cluster A – associação com a resistência a múltiplas
drogas
Não MDR P.aeruginosa genótipos variáveis
Discussão Demonstrou expansão clonal de MDR P. areuginosa em
hospitais no Japão.
Esta é a primeira descrição de um surto em larga escala de infecção nosocomial causada por um único clone de P. aeruginosa, com alto nível de resistência a um grande número de antibióticos.
Discussão A maioria dos isolados MDR testados (205 de 214)
apresentavam sorotipo O11.
Os sorotipos O11 e O12 tem sido mais associados com surtos de P. aeruginosa.
Surtos de P. aeruginosa, sorotipo O11:- 1980 – Estados Unidos;- 1994 e 1995 – Grécia;- Recentemente: Bélgica e Japão
Não se sabe porque estes dois sorotipos específicos estão envolvidos em mais surtos de P. aeruginosa.
Discussão
Aac(6’)-Iae - bom candidato para marcador de infecção por MDR P. aeruginosa, já que 99% das MDR isoladas apresentaram o gene aac(6’)-Iae.
Detecção de aac(6’)-Iae e seu produto: - LAMP (amplificação isotérmica do DNA): método simples e com
alta especificidade; - Aglutinação com Ac-conjugado: menos específico, mas
suficientemente preciso para detectar MDR de P. areuginosa.
Discussão MDR P. aeruginosa pode ter se espalhado no Japão devido
ao crescente uso de carbapenemos, aminoglicosídeos e fluoroquinolonas.
Vigilância nacional para MDR P. aeruginosa está sendo planejada.
Medidas consideradas eficazes na prevenção de infecção nosocomial por P. aeruginosa em hospitais:• Monitorar fontes ambientais de bactérias;• Limpeza de locais contaminados;• Revisão das medidas de controle de infecções no
tratamento da urina.
Discussão
Modo de transmissão de MDR P. areuginosa entre hospitais – desconhecido
Transferência de pacientes infectados entre hospitais pode ser uma causa.
31 pacientes infectados com MDR P. areuginosa foram transferidos de outros hospitais para os hospitais participantes do estudo.
Análise Crítica Trabalho com uma quantidade grande de informações
Vários métodos de identificação e caracterização foram utilizados - estão dispostos de maneira ordenada na descrição de Materiais e Métodos;- em Resultados as informações ficaram um pouco dispersas, às vezes, trazendo confusão para o entendimento.
Na discussão não houve aprofundamento dos assuntos abordados e não há uma conclusão finalizando esta discussão.