Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas...
-
Upload
nguyendiep -
Category
Documents
-
view
225 -
download
0
Transcript of Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas...
![Page 1: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/1.jpg)
Nutrição e Crescimento Bacteriano
Prof. Adjunto Ary Fernandes Junior
Departamento de Microbiologia e Imunologia
Instituto de Biociências – UNESP
Tel. 14 3880.0412/0413
![Page 2: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/2.jpg)
Características básicas das bactérias
Estudos de Biologia Celular
10 horas 1 bilhão de células
![Page 3: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/3.jpg)
95% do
peso
seco da
célula
![Page 4: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/4.jpg)
Crescimento bacteriano
+ Motilidade,
Luminescência, etc
Visão geral do metabolismo celular
![Page 5: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/5.jpg)
Cultura: Propagação do microrganismo
em condições adequadas
(Exigências Nutricionais e Ambientais)
Nutrição: Fornecimento de substâncias
nutritivas para o crescimento
bacteriano
(Energia e Matéria Plástica)
![Page 6: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/6.jpg)
![Page 7: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/7.jpg)
FATORES NUTRITIVOS (in vitro = in vivo)
Ex: Haemophilus influenzae
Hemina (fator X), NAD+ (fator V)
Fastidiosos
N NaHK
Mg
Co Zn Mo Se etc
CaFatores de
Crescimento
OBS. Não existe um meio de cultura universal
![Page 8: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/8.jpg)
Classificação dos Meios de Cultura
(Substâncias nutritivas Sintéticos e Complexos)
![Page 9: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/9.jpg)
Líquido
(Turvação do
meio)
Sólido
(1,5 a 2,0%)
(Colônias)
Classificação dos Meios de Cultura
(Estado fisico) Agar
Semi-Sólido
(0,5%)
(Movimento)
![Page 10: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/10.jpg)
(Enriquecidos)
Classificação dos Meios de Cultura
(Poder Seletivo e Diferencial)
Agar Sangue
Agar Chocolate
Lowenstein - Jensen
![Page 11: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/11.jpg)
Classificação dos Meios de Cultura
(Poder Seletivo e Diferencial)
(Seletivos)
(Meio seletivo para Bacillus cereus)(Agar MacConkey)
(MAS – Manitol Salt Agar)
![Page 12: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/12.jpg)
Classificação dos Meios de Cultura
(Poder Seletivo e Diferencial)
(Seletivos)
(Eosin Methilen Blue (EMB) Oxoid Chromogenic Listeria Agar (OCLA)
![Page 13: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/13.jpg)
Classificação dos Meios de Cultura
(Poder Seletivo e Diferencial)
(Diferencial)
(Agar Sangue)
(Padrão de Hemólise)
![Page 14: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/14.jpg)
Classificação dos Meios de Cultura
(Poder Seletivo e Diferencial)
(Diferencial)
(Agar MacConkey)
(Fermentação da Lactose)
Lactose (-)
Lactose (-)
Lac + Lac -
(Meio Cromogênico)
(E. coli/coliformes em alimentos e água)
![Page 15: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/15.jpg)
(Meio de Tetrationato)(Meio de Selenito Cistina)
Classificação dos Meios de Cultura
(Poder Seletivo e Diferencial)
(De Enriquecimento)
![Page 16: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/16.jpg)
![Page 17: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/17.jpg)
Etapas do preparo de um meio sólido
![Page 18: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/18.jpg)
FATORES NUTRICIONAIS
ÁGUA - Solvente; Elevado Calor Específico;
Regula Pressão Osmótica; Participação em
Reações Químicas, Estrutura de
Macromoléculas, etc
FONTE DE ENERGIA = Doadores de Hidrogênio
*Fotossintetizantes Fototróficas
Quimiossintetizantes Quimiotróficas
(Quimiolitotróficas e Quimiorganotróficas)
![Page 19: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/19.jpg)
![Page 20: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/20.jpg)
FONTE DE ENERGIA = Doadores de Hidrogênio
![Page 21: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/21.jpg)
RECEPTORES DE HIDROGÊNIOS
Respiração aeróbia O2.
Respiração anaeróbia NO3-, SO4
-, CO2..
Fermentação Fermentação Lática, Alcoólica, etc.
![Page 22: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/22.jpg)
Respiração anaeróbia receptor inorgânico ≠ do O2
(ex: SO42-, NO3
-, CO2, S)
Salmonella, the host and its microbiota. S. Typhimurium uses its virulence factors (flagella, T3SS-1 and T3SS-2) to invade the epithelium and
survive in mononuclear cells. The ensuing inflammatory response results in the epithelial release of an antimicrobial (lipocalin-2) that sequesters
iron chelators (enterobactin) produced by the microbiota, but not an iron chelator (salmochelin) produced by S. Typhimurium. ROS generated by
neutrophils migrating into the intestinal lumen oxidize an endogenous sulfur compound (thiosulfate) to generate a respiratory electron acceptor
(tetrathionate) that enables S. Typhimurium to edge out the fermenting microbiota, thereby enhancing transmission of the pathogen.
Thiennimitr et al, 2011. Salmonella: the host and its microbiota. Current opinion in Microbiology, v.15, n.02, p.108-114, 2012.
4 H2 + SO42- + H+
HS +4 H20 4 H2 + CO2 CH4 + 2 H20
![Page 23: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/23.jpg)
Fermentação Composto orgânico produzido durante o
próprio processo fermentativo.
![Page 24: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/24.jpg)
CARBONO (Composição dos Compostos Orgânicos
-Compostos orgânicos - Quimio-heterotróficos.
-CO2 (Fotossíntetizantes) - Fotoautotróficos.
NITROGÊNIO (Proteínas, Ácidos Nucléicos, Coenzimas)
Orgânica - Aminoácidos, Sais Orgânicos de Amônia.
Inorgânica - NH3, NO3-, N2
![Page 25: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/25.jpg)
ENXOFRE (Aminoácidos Sulfurados, Vitaminas)
-Forma orgânica (Radicais sulfidrilas);
-Forma inorgânica ( SO4- , H2S)
-Forma elementar
FÓSFORO (ATP, Ácidos Nucléicos, Fosfolipídeos, Coenzimas)
-Fosfato inorgânico (PO42- )
ATIVADORES DE ENZIMAS
Minerais na forma de sais:
-Mg++e K+ (Ribossomos)
-Fe++ (citocromos e peroxidases)
-Ca++ (Parede celular de Gram positivas e esporulação)
![Page 26: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/26.jpg)
ELEMENTOS TRAÇOS - Cobalto, Zinco (Atividade de
Enzimas), Molibdênio
FATORES DE CRESCIMENTO - Ex: Vitaminas,
Aminoácidos, Bases Nitrogenadas, Ácidos
Graxos, etc.
![Page 27: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/27.jpg)
FATORES AMBIENTAIS
pH
Temperatura
Aeração (O2)
Osmolaridade
![Page 28: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/28.jpg)
FATORES AMBIENTAIS
pH – Estrutura e funções das proteínas
Maioria na faixa ótima de pH entre 6 e 8.
Ex. Thiobacillus - 1 e 2 (Acidófila)
Vibrio comma - 10 (Alcalinófila)
Obs. Normalmente os meios de cultura são
tamponados.
Bactérias patogênicas pH ao redor de 7
![Page 29: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/29.jpg)
Organismo
Mínimo Ótimo Máximo
Thiobacillus thiooxidans 0,5 2,0-2,8 4,0-6,0 Sulfolobus acidocaldarius 1,0 2,0-3,0 5,0
Bacillus acidocaldarius 2,0 4,0 6,0 Zymomonas lindneri 3,5 5,5-6,0 7,5
Lactobacillus acidophilus 4,0-4,6 5,8-6,6 6,8 Staphylococcus aureus 4,2 7,0-7,5 9,3
Escherichia coli 4,4 6,0-7,0 9,0 Clostridium sporogenes 5,0-5,8 6,0-7,6 8,5-9,0
Erwinia caratovora 5,6 7,1 9,3 Pseudomonas aeruginosa 5,6 6,6-7,0 8,0
Thiobacillus novellus 5,7 7,0 9,0 Streptococcus pneumoniae 6,5 7,8 8,3
Nitrobacter sp 6,6 7,6-8,6 10,0
Valores mínimos, ótimos e máximos de pH durante o cultivo para algumas bactérias
Acidofílicas
Neutrofílicas
Alcalinofílicas
![Page 30: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/30.jpg)
Temperatura - Velocidade das reações químicas
Concentração
elevada de ácidos
graxos insaturados
garante fluidez da
membrana
plasmática
Patogênicas
ao homem e
animais)
Organização tridimensional das proteínas
permite a manutenção da estrutura
adequada para sua ação em elevadas
temperaturas
![Page 31: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/31.jpg)
Aeração - Metabolismo energético
Aeróbio estrito
(18-21% )
P. aeruginosa,
Mycobacterium
Anaeróbio estrito
(<0,5%)
C.haemolyticum
Facultativo
(<0.5-21%)
Enterobactérias
Microaerófilo
aeróbio (1-5%)
Campylobacter,
Neisseria
Microaerófilo
anaeróbio
(Aerotolerante)
(2-8%)
Bacteroides,
Clostridium
![Page 32: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/32.jpg)
Bactérias aeróbias e facultativas
O2 Metabolismo
Ação das enzimas superóxido dismutase, catalase e peroxidase. Estas
enzimas eliminam radicais tóxicos do oxigênio que são inevitavelmente gerados
em sistemas vivos na presença de O2.
A distribuição destas enzimas nas células determina a capacidade
destas células existirem na presença de O2 .
Sistema de
desintoxicação
Produtos
não tóxicos
O2 + 2 e- + 2 H+ H2O2
O2 + e- O-
2
O2 + H2O2 OH*
O-2 + H2O2 O2 + OH2- + OH*
H2O2 + e- + H+ H2O + OH*
Produtos
tóxicos
![Page 33: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/33.jpg)
Bactérias anaeróbias estritas
Danos ao DNA, destroem
componentes lipídicos,
inativam enzimas
Morte
bacteriana
O2 Metabolismo
O2 + 2 e- + 2 H+ H2O2
O2 + e- O-
2
O2 + H2O2 OH*
O-2 + H2O2 O2 + OH2- + OH*
H2O2 + e- + H+ H2O + OH*
Produtos
tóxicos
Ausência do
sistema de
desintoxicação
![Page 34: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/34.jpg)
Reação positiva produzida por Bacillus sp,
Staphylococcus sp;
Reação negativa produzida por Clostridium sp,
Streptococcus sp.
Teste da Catalase
![Page 35: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/35.jpg)
Método da
vela acesa
(microaerofilia)
![Page 36: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/36.jpg)
Grampo
de rosca
Tampa com
anel
selador
Catalisador
de paládio
em pastilha
Envelope
contendo
bicarbonado de
sódio e boroidreto
de sódio
Placas de
Petri
Indicador de
anaerobiose
(azul de
metileno)
Jarra de anaerobiose (Sistema GasPak)
![Page 37: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/37.jpg)
Câmara de anaerobiose (“Glove Box”)
![Page 38: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/38.jpg)
Controle da Osmolaridade Transporte ativo de K+ para interior da célula e
eliminação de PUTRESCINA
Osmolaridade - Concentração de solutos no
meio Disponibilidade de água
![Page 39: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/39.jpg)
Aumento no número de células no meio de cultivo
Meio líquido Turvação do meio de cultivo;
Meio Sólido Formação de colônias
Concentração Celular = Núm. Cel. / Vol. meio
Densidade Celular = Massa Cel./ Vol. meio
CRESCIMENTO BACTERIANO
Após inoculação no meio de cultura (= “semeadura”)
em condições ótimas
![Page 40: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/40.jpg)
Contagem bacteriana
(Plaqueamento)
![Page 41: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/41.jpg)
![Page 42: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/42.jpg)
Absorbância = 2 - Log de % de Transmissão
![Page 43: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/43.jpg)
NMP
(Número Mais provável)
Tubos de meio
nutriente (grupo de
cinco tubos
Número de tubos
positivos por
grupo
Volume de
inóculo
para cada
grupo de
cinco tubos
Combinação de
tubos positivos
Índice de
NMP/100mL Inferior Superior
Limites com 95%
de confiabilidade
![Page 44: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/44.jpg)
Fases do crescimento bacteriano
Fisiologicamente
ativas
Tempo de
geração
Progressão
geométrica (Crescimento
Morte)
(Crescimento << Morte)
Formas de involução
![Page 45: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/45.jpg)
Taxa de Crescimento x Tempo de
Geração
![Page 46: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/46.jpg)
Semeadura = Inocular (transferir o microrganismo a um meio de
cultura)
![Page 47: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/47.jpg)
SEMEADURA POR ESGOTAMENTO
SEMEADURA EM QUADRANTES
![Page 48: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/48.jpg)
Semeadura Correta
Semeadura Errada
![Page 49: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/49.jpg)
![Page 50: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/50.jpg)
Princípios de Alguns Testes
Bioquímicos
![Page 51: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/51.jpg)
2 H2O2 2 H2O + O2
Catalase
Comum em bactérias aeróbias e anaeróbias
facultativas
Staphylococcus, Bacillus (+) e Streptococcus (-)
![Page 52: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/52.jpg)
Oxidase (Citocromo oxidase)
Oxidação do Citocromo C pelo O2
Para fenilenodiamina é oxidado pela enzima
adquirindo cor vermelha
Neisseria (+), Pseudomonas (+), Enterobactérias (-)
![Page 53: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/53.jpg)
Prova de OF
(Oxidação - Fermentação)
(Carboidrato Ácido)
Azul de Bromotimol: pH Alcalino (Azul), pH Ácido
(Amarelo)
Glicose Enterobactérias, Staphylococcus
(Fermentam), Pseudomonas, Micrococcus (Oxidam)
![Page 54: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/54.jpg)
Fermentação de Açúcares
Produção de Ácido ou Ácido mais gás
Açúcar a ser estudado + indicador de Andrade
(vermelho em pH ácido)
Enterobactérias Glicose (Todas), Lactose
(Algumas espécies apenas)
Glicose Lactose
![Page 55: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/55.jpg)
Família Enterobacteriaceae
Lactose
-
Gêneros
Shigella
Salmonella
Proteus
Providência
Morganella
+
Gêneros
Escherichia
Klebsiella
Enterobacter
Serratia
Agar MacConkey
![Page 56: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/56.jpg)
Vermelho de Metila (VM): Fermentação Mista
(Glicose Acidos Orgânicos)
Vermelho de Metila em pH ácido (4,5) fica Vermelho
E.coli (+), Enterobacter (-) 1 2 3
![Page 57: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/57.jpg)
Voges-Proskauer (VP)Fermentação
Butilenoglicólica
Glicose Acetilmetilcarbinol (= Acetoina) 2,3 butilenoglicol
Acetoina + Creatinina composto vermelho
E. coli (-), Klebsiella pneumoniae (+), Enterobacter (+)
![Page 58: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/58.jpg)
Indol
Triptofanase
Triptofano Indol
Para Dimetilaminobenzaldeído = Reativo de Kovacs + indol
Composto vermelho.
E. coli (+), Klebsiella-Enterobacter (-)
Não inoculado + -
![Page 59: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/59.jpg)
Citrato de Simnons
Citrato de Sódio como única fonte de C
Se bactéria usa (Cresce) – Alcaliniza o meio Azul
(Azul de Bromotimol)
Klebsiella - Enterobacter (+), E. coli (-)
![Page 60: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/60.jpg)
Uréia
(Urease)
Amônia
Alcalinização do meio (Vermelho Fenol Vermelho)
E. coli (-), K. pneumoniae (+)
![Page 61: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/61.jpg)
Fenil-Alanina
Desaminação da Fenil-alanina Ácido Fenilpirúvico
Ac. Fenilpirúvico + Cloreto Férrico Hidrazina (Cor
verde-garrafa)
Característica de todas espécies de Proteus
+-
![Page 62: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/62.jpg)
Movimento
Crescimento em meio semi-sólido (0,5% de Ágar)
Imóvel - Cresce só no local da picada: K. pneumoniae
Móvel - Cresce além da picada: E. coli
![Page 63: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/63.jpg)
EPM, MILI
Tríplice Açúcar com ferro
TSI
![Page 64: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/64.jpg)
Métodos Miniaturizados
![Page 65: Nutrição e Crescimento Bacteriano - ibb.unesp.br · cultivo para algumas bactérias Acidofílicas Neutrofílicas Alcalinofílicas. Temperatura - Velocidade das reações químicas](https://reader035.fdocumentos.tips/reader035/viewer/2022062505/5bc5135209d3f21a088c63f2/html5/thumbnails/65.jpg)