BioCisionnitrógeno líquido y baño de agua. • La termo-conducción es la transferencia de calor...

Standardizing SamplesTM

BioCision Constante. Reproducible. Estandarizado.

Diciembre 2011

Standardizing SamplesTM 2

CoolProducts Los productos CoolProducts permiten que las muestras

sean reproducibles, estandarizadas, y que no haya variabilidad entre los usuarios, laboratorio a laboratorio

y experimento a experimento.

CoolBoxTM Sin hielo/

Manipulación de muestras

CoolCell® Sin alcohol/

Congelación de células

CoolRack®

Sin error/ Temperatura controlada


Problema: Falta de estandarización “…La falta de estandarización, y de alta calidad de bio-

muestras ha sido reconocida como el impedimento más importante en el progreso de la investigación de la enfermedad del cáncer…” - NIH / NCI / OBBR

Ejemplos de esfuerzos mundiales para desarrollar nuevos estándares para la adquisición, manipulación y procesamiento pre-analítico de muestras (sangre, tejido, tumor, otras muestras biológicas):

•  Union Europea: http://www.devicelink.com/ivdt/archive/09/04/003.html •  NCI/NIH: http://biospecimens.cancer.gov/practices/default.asp •  NIH Office of Biorepositories and Biospecimen Research 2010 Symposium:

http://www.brnsymposium.com/meeting/brnsymposium/2010/ •  BioCoR: http://biocor.umn.edu/ •  Duke University: http://web.genome.duke.edu/cores/biorepository/protocols/ •  Molecular Epidemiology Workshop, Shanghai, 2008


CoolRack

Sin error / Refrigeración, congelación o

descongelación

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CoolRack


El CoolRack organiza immediatamente las muestras y permite una incubación de las muestras a temperatura constante (+/- 0.1oC). .

Enfriamiento con hielo

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Método actual de enfriamiento con hielo. La colocación de los tubos en hielo resulta en una manera muy desorganizada de incubación, la cual incrementa el error en la distribución de líquidos, la identificación de la muestras y la variación de la temperatura.

“BioCision posee productos patentados que reducen la variación y aseguran que la manipulación de muestras clínicas sea estandarizada. El manejo previo al análisis de las muestras es crucial para asegurar buenos resultados en los experimentos tanto en ciencia básica como en investigación clínica”. "Biotech International” (November 2010)


La solución es el CoolRack Refrigeración, congelación (rápida), y descongelación estandarizada, y constante

CoolRack in water bath

CoolRack in dry ice

La varición de la temperatura en cinco ciclos de congelación/descongelación utilizando el CoolRack es muy baja y tiene alta

reproducibilidad

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Biotech International (November 2010)


¿Cómo funciona? •  El módulo CoolRack está hecho de una novedosa

aleación altamente termo-conductiva. •  Reemplaza el tener que poner las muestras directamente

en fuentes de temperatura como el hielo, hielo seco, nitrógeno líquido y baño de agua.

•  La termo-conducción es la transferencia de calor de sitios mas calientes a sitios mas fríos.

•  El CoolRack en hielo: El calor del CoolRack es transferido al hielo (hielo seco, nitrógeno líquido) hasta que se logra el equilibrio

•  CoolRack en baňo de agua: El calor es transferido del agua hacia el CoolRack (o vice-versa dependiendo de la temperatura del agua) hasta que se logre el equilibiro.

•  La novedosa aleación del CoolRack distribuye uniformemente la temperatura en todos los pocillos asegurando la misma temperatura en todas las muestras. 7


CoolRack Versátil •  El CoolRack se adapta rápidamente a la cualquier

temperatura deseada. •  Desde -150oC hasta más de +100oC •  Enfriamiento (hielo), congelación (hielo seco,

nitrógeno líquido). •  Descongelación/incubación (hielo, baño de agua,

bloque de calentamiento).

Temperatura uniforme •  Uniformidad de +/-0.1oC de temperatura en todos los pocillos. •  Estandarización de experimento a experimento, usuario a usuario y sitio a sitio.

Novedosa aleación (patente pendiente) •  Tiene una capacidad muy rápida de termo-conducción y adaptación. •  Garantiza la temperatura deseada sin ningún problema y, sin dudas.

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CoolRack Para tubos

Módulos Para toda variedad de muestras biológicas

CoolSink Para placas

CoolTray Plataformas

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Hielo seco Nitrógeno líquido Baño de agua

-150oC -78oC 0o a 4oC 37oC +

•  Elimina el contacto directo con el nitrógeno líquido. •  Los tubos están siempre de forma vertical. •  El mismo patrón de congelación entre las muestras. •  El ThermalTray mantiene las muestras elevadas incrementando la distancia entre las manos y el nitrógeno líquido. •  Se adapta rápidamente a la temperatura ambiental (25oC) a la temperatura del nitrógeno líquido (-150oC) en tan solo 12-14 minutos.

•  Elimina el contacto directo con el hielo seco. •  No hay necesidad de usar alcohol– más económico, reduce accidentes y menos deshechos tóxicos. •  La congelación en el CoolRack PF sobre hielo seco es igual o más rapida que con la mezcla de etanol. •  Congelación estandarizada- la desviación estándar entre cada congelación es mínima. • Se adapta a -78oC en solo 5-7 minutos.

•  Organiza tus muestras manteniéndolas estables en hielo. •  Mantiene la temperatura uniforme aunque el hielo se derrita. •  Las etiquetas se mantienen secas asegurando la identificación legible de las muestras. •  Reduce el riesgo de contaminación de las muestras •  Cambia rápidamente de la temperatura ambiente a <4oC en 90 segundos. • La utilización del ThermalTray permite entre 10 y 15 horas de incubación a <4oC.

•  Mantiene los tubos fuera del agua – reduce la contaminación y las etiquetas se mantienen secas. •  La descongelación es uniforme en todas las muestras. •  Todos los pocillos están a la misma temperatura – elimina la variación de los resultados en los pocillos periféricos. •  Da soporte a todo tipo de tubos y placas.

Hielo

Versátil Para varios usos

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Las herramientas de BioCision son únicas y reemplazan a los actuales métodos rudimentarios de preservación (congelación, congelación-rápida) y manipulación (enfriamiento, descongelación) de muestras


Velocidad de enfriamiento – Hielo §  De temperatura ambiente a < 4oC en 60-90

segundos.

§  Obtenga de 4 a 6 horas de uso poniendo el CoolRack directamente en hielo.

§  Obtenga hasta 14 horas de enfriamiento utilizando el ThermalTray en la misma cubeta de hielo.

Velocidad de congelación rápida –Hielo seco

§  Igual o más alta velocidad de congelación que en un baño de hielo seco y etanol.

§  Sin alcohol – Más económico, menos riesgo y residuo tóxicos.

§  El mismo patrón de congelación para cada muestra. Freeze rate on dry ice Standard deviation

Cooling rate on ice

Rendimiento del CoolRack

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Rendimiento del CoolSink

Figure 2. Final equilibrium well temperature for a 96-well flat bottom plate in direct contact with (A) crushed ice, (B) CoolSink 96Fwith a dry interface, and (C) CoolSink 96F with aqueous conductive medium in the interface. Colors represent 0.5°C temperature intervals of the corresponding plate wells. The white cell represents the well that was fitted with the thermocouple probe.

Ø  La placa de 96-pocillos puesta directamente en hielo no alcanza la temperatura crítica deseada de < 4oC en ninguno de los pocillos (Fig. 2, A).

Ø  El módulo CoolSink distribuye por igual la temperatura del hielo en todos los pocillos (Fig. 2, B and C).

•  Todos los pocillos están a <4oC •  La curvatura en el gráfico incluye la

variación en el centro de la placa (Fig.1)

Figure 1. Variance in height of undersurface of 96-well flat-bottom plate. The x and y axes represent the well number and letter, and the z axis represents the relative deviation of the surface in units of 0.001 in. Data was collected using a ball dial indicator with a resolution of 0.0001 in.

Published in Biotechniques, November 2010

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Kits y Accesorios •  CoolBoxTM

•  Recipiente para refrigeración sin hielo.

•  CoolSystem® Kits •  Kits diseñados para cada especialidad; como

criopreservación, disección de tejidos, preparación sin hielo de PCR, incubación de proteína/ARN/ADN.

•  Accesorios •  Cubetas para hielo

•  Rectangular (1L, 4L, 9L) y redonda (4L). •  Monitor de temperatura

•  Visualización digital y LCD. •  CoolMatTM superficie para disección histológica.

•  Protege la superficie delThermalTray y la hoja del bisturí.

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Opinión de clientes respecto al CoolRack Steffan Vartanian – Genentech “…¿No te molesta cuando pasaste toda la mañana aislando ARN o preparando lisados celulares y regresas de almorzar y encuentras todos tus valiosos tubos ahogándose en una piscina de hielo derretido?.....Pero después de utilizar algunas veces el ThermalTray y CoolRack los días de mis muestras malogradas están contados!!! No solamente estas herramientas mantienen tus muestras frías por horas, pero también las mantienen seguras y en buen estado. Los productos de BioCision están muy bien hechos, bien diseñados y se ven muy “Cool”. ! Definitivamente los recomiendo !...” Hans B - Perkin Elmer “…En las últimas semanas hemos utilizado los CoolRack para congelar nuestras muestras con la técnica de congelación-rápida y hemos tenido resultados maravillosos. Como teníamos muy corto plazos hicimos experimentos de validación en el laboratorio y quedamos muy contentos con los resultados…”

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CoolBox Sin hielo /

Enfriamiento y congelación de

muestras

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CoolBox


Método actual de enfriamiento

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Método actual de enfriamiento en hielo. Las muestras se colocan directamente en hielo que puede resultar en una variación de la temperatura, que puede implicar la pérdida de las etiquetas de identificación, crear una confusión entre las muestras, en error en la distribución de líquidos, y en el incremento del riesgo de contaminación.


Refrigeración constante y congelación sin hielo •  Los cartuchos proveen varias horas de refrigeración (0.5 a 4oC) o de

congelación (-18 a -6oC) sin hielo. •  Máxima variación de +/- 0.1oC entre los pocillos. Refrigeración, congelación y congelación rápida. •  Cartuchos reutilizables •  Hielo seco •  Nitrógeno líquido

Versátil •  Se acomoda a todo tipo de tubos y placas. •  Ideal para PCR, cultivo celular, manipulación de virus/bacterias, incubación de

RNA y enzimas, utilización en campana de flujo laminar, GMP/GLP, experimentos en bioterio y transporte de muestras por corto tiempo.

CoolBox elimina el uso de hielo

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CoolBox 30 y CoolBox MP

Sistema CoolBox 30 (para tubos) • Refrigeración/Congelación de tubos sin hielo • Incluye el CoolBox, la tapa, el cartucho azul para +2oC, cartucho rojo para aislar el hielo, aislante morado. • Sirve para todos los CoolRacks de 30-well . • Venta de piezas por separado o con el CoolRack.

CoolBox MPSystem (para placas) • Formato SBS para placas sin hielo, enfriamiento de tubos y congelación. • Incluye el CoolBox, la tapa, cartucho azul para +2oC. • Se acomoda a todos los módulos de formato SBS- CoolSinks, CoolRack PCRs, CoolRack 1mlx96. • Venta de piezas por separado o con el CoolRack/CoolSink.

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-25oC with thermal regulator pad placed between CoolRack and dry ice

Snap-freezing at -78oC with CoolRack directly on 200cc dry ice

Rendimiento del CoolBox

NOTE: Performance may vary depending on ambient conditions, starting temperature and other specific set-up criteria. See instructions for complete information.

mmmm

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Ventajas del CoolBox CoolBox Cartucho de Gel

Variación de la temperatura entre pocillos: +/-0.1oC

Variación de la temperatura entre pocillos: Hasta +4oC

Fuente de refrigeración: Nitrógeno líquido, hielo seco, hielo, cartucho.

Fuente de refrigeración: Gel

Rango de temperatura: De -150oC a +150oC

Rango de temperatura: Fijo, -20oC o 0oC

Formato de tubos y placas: 0.5ml cónicos, 1.5ml cónicos, criotubos de 1.5-2.0ml cilíndrico de 12.5mm de diámetro, tubos para MS, PCR 96 y 384-pocilllos, placas de 6, 12, 24, 48, 96-pocillos.

Formato de tubos y placas: 0.5ml cono, 1.5ml cono, tubos para PCR

Duración: 10h (2ºC), 6h (-12ºC), 5h (-25ºC), 6h (-78ºC)

Duración: 8h (0ºC), 3h (-21ºC)

Tiempo para la reutilización: Inmediato – cambiar el cartucho por uno frío o añadir más hielo seco o nitrógeno líquido

Tiempo para la reutilizacion: Necesita ser colocado por 4-6 horas en el congelador para re-congelar el gel

CoolBox provee una temperature uniforme y versatilidad de uso

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Kits para cada necesidad

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CRYO CoolSystem

Proteínas / DNA CoolSystem – Sin hielo

PCR Prep CoolSystem


Opinión de clientes respecto al CoolBox

Fraser Moss Ph.D. - Case Western Reserve University, Dept. of Physiology and Biophysics, President Scientist Solution “…BioCision ha eliminado el factor del uso de hielo y propone el CoolBox en el cual se puede usar un CoolRack-96 well (placa de 96 pocillos)…..Yo lo utilizo para mantener el ARN refrigerado para inyectar ovocytos . Lo utilizaré también para preparar las reacciones del PCR en un futuro cercano. Ha resultado ser una herramienta genial de tener en el laboratorio ya que la máquina de hacer hielo del departamento se malogró en abril y aún no la han arreglado…” Laura Matthews - Sarah Cannon Research Institute (SCRI) “…Les escribo respecto a las muestras del CoolRack y CoolBox que estamos probando. Son dos productos excelentes. Los CoolRacks han eliminado el desorden y el problema de la desintegración de las cajas de cartón por la húmedad. Las muestras definitivamente se congelan mas rápido en los CoolRacks. El CoolBox fue especialmente de ayuda en el transporte de biopsias congeladas de un sitio a otro…”

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CoolCell CoolCell

Sin alcohol / Congelación de células


CoolCell Máxima reproducibilidad •  Velocidad de congelación de -1oC/minuto en un

congelador de -80oC. •  Congelación idéntica cada vez. Máxima viabilidad •  Líneas celulares, PBMC (células mononucleares

de sangre periférica), células madre, levaduras. Sin alcohol •  Sin líquidos, menos problemas. •  Sin alcohol significa economía y menos residuo tóxico. •  Sin necesidad de mantenimiento. •  Menos variabilidad debido al nivel y evaporación del alcohol.

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Resultados reproducibles

Los patrones de enfriamiento y congelación son idénticos luego de cinco ciclos consecutivos de

congelamiento, en un congelador de -80oC utilizando un CoolCell (12-criotubos de 2ml)

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CoolCell Criopreservación a velocidad de -1oC/minuto disponible para una gran variedad de tubos

Para criotubos de 1 y 2ml 12 tubos

- Colores disponibles; morado, naranja y verde


- El soporte de tubos puede ser transferido fácilmente a

una caja para almacenamiento

- Colores disponibles; morado, naranja y verde


Para tubos de suero de 2ml

12 tubos

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Alta viabilidad celular

El uso del CoolCell permite incrementar la viabilidad de las células primarias

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94%

82%


CoolSystem® CRYO •  Un Kit para preparación de muestras sin hielo y congelación sin alcohol

CoolSystem CRYO (#BCS-142)

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Opinión de clientes respecto al CoolCell

John S– Roslin Cellab (Reino Unido) “…CoolCell es sin duda la mejor nueva tecnología en el campo de la criopreservación de células en las últimas décadas…” Rohit G. - Stanford University (EE.UU) “…Mantenemos un registro de procesamiento de grandes cantidades de células mononucleares de sangre periférica procesadas para criopeservación de largo tiempo. Sin duda, CoolCell ha roto esquemas y ha resultado ser el nuevo estándar para criopreservación…” Sam Knight - Ceramisphere (Australia) “…Pasé casi un año obteniendo una viabilidad muy baja de congelación de células en hielo seco (con un equipo con alcohol) y almacenamiento en nitrógeno líquido, usando células HeLa que son normalmente fácil de almacenar. ! Luego compré el CoolCell y ahora obtengo casi 100% de viabilidad al descongelar las células !...”

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•  La manipulación de muestras ha cobrado mucha importancia últimamente •  Incremento del uso en compañías multinacionales,

laboratorios de investigación, estudios científicos. •  Incremento del uso de biomarcadores y de otras muestras

sensibles a la variación de temperatura.

•  BioCision = Constante. Reproducible. Estandarizado. •  Experimento a experimento •  Investigador a investigador •  Laboratorio a laboratorio •  Sitio a sitio

Resumen- Estandarización de la manipulación de muestras


Genentech Amgen Pfizer Roche Harvard MIT CalTech UCSF Glaxo Bristol Myers Squibb Novartis Translational Genomics Gilead Sciences Merck MedImmune ATCC Genpharm Elan Pharmaceuticals Centocor Boehringer Ingelheim Oncomed NIH/NCI Takeda Pharmaceuticals CDC Covance XOMA Quest Diagnostics Otsuka America Pharmaceuticals Salk Institute Burnham Institute Scripps Institute Stanford University Yale Genzyme EMD Serono Shire HGT Alnylam Wyeth Cell-Systems Jackson Labs Beth Israel Deaconess Hospital HHMI Whitehead Institute Harvard Systems Biology Exelixis Charles River Labs Sanofi Pasteur Penn State Lawrence Berkeley Lab Batelle UC Berkeley Cedars Sinai Hospital Cleveland Clinic IDEXX Biogen Perkin Elmer Genetics Blood Systems Research Inst.

Gracias

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