MORFOLOGIA DAS CÉLULAS SANGUÍNEAS

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MORFOLOGIA DAS CÉLUL AS SA NGUÍ NEAS  Ant onio Altair M. Oli vei ra Domenico H.G.P. Barbieri Lúcia Helena M. Bruneri Primavera Borelli A. INTRODUÇÃO  De um modo geral, as células, no seu processo de maturação, apresentam modificações nos elementos estruturais . Quando coradas pelos corantes usuais (coloração panóptica), as modificações fundamentais podem ser assim resumidas: Nucléolo: de visível, torna-se não visível. Cromatina: de delicada, torna-se compacta. Núcleo: de grande passa a pequeno (no eritroblasto o núcleo na fase final é expulso da célula, que se torna anucleada). Relação núcleo/citoplasma: de grande, passa a pequena (exceção no linfócito maturo, onde o citoplasma se reduz intensamente e portanto, esta relação perm anece semelhante). Forma do núcleo : na linhagem granulocíitca, o núcleo arredondado, modifica-se intensamente, passando à forma bastão e depois passa a apresentar segmentos. Citoplasma: de coloração basófila, passa a acidófila (eosinófila), exceto nos linfócitos e monócitos e plaquetas. Tamanho da célula: diminui (exceto no Megacariócito, cujo tamanho é bem maior que o Megacarioblasto). B. DESCRIÇÃO MORFOLÓGICA DAS CÉLULAS SANGUÍNEAS Entre a célula PRIMITIVA (STEM CELL) e as células que dão orig em às linhage ns sanguínea s, F ERRATA e seus seguid ores. admitem existência de dois estados ainda indiferenciados: HEMOHISTIOBLASTOS(célula tronco) E HEMOCITOBLASTOS (célula tronco hemopoética)  

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MORFOLOGIA DAS CÉLULAS SANGUÍNEAS

 Anton io Altair M. OliveiraDomenico H.G.P. Barbieri

Lúcia Helena M. Bruneri

Primavera Borelli

A. INTRODUÇÃO 

De um modo geral, as células, no seu processo de maturação,apresentam modificações nos elementos estruturais

.Quando coradas pelos corantes usuais (coloração panóptica),

as modificações fundamentais podem ser assim resumidas:

Nucléolo: de visível, torna-se não visível.

Cromatina: de delicada, torna-se compacta.

Núcleo: de grande passa a pequeno (no eritroblasto o núcleo na fase final éexpulso da célula, que se torna anucleada).

Relação núcleo/citoplasma: de grande, passa a pequena (exceção no linfócitomaturo, onde o citoplasma se reduz intensamente e portanto, esta relaçãopermanece semelhante).

Forma do núcleo: na linhagem granulocíitca, o núcleo arredondado, modifica-se

intensamente, passando à forma bastão e depois passa a apresentar segmentos.Citoplasma: de coloração basófila, passa a acidófila (eosinófila), exceto noslinfócitos e monócitos e plaquetas.

Tamanho da célula: diminui (exceto no Megacariócito, cujo tamanho é bem maiorque o Megacarioblasto).

B. DESCRIÇÃO MORFOLÓGICA DAS CÉLULAS SANGUÍNEAS

Entre a célula PRIMITIVA (STEM CELL) e as células que dãoorigem às linhagens sanguíneas, FERRATA e seus seguidores.admitem existência de dois estados ainda indiferenciados:HEMOHISTIOBLASTOS(célula tronco) E HEMOCITOBLASTOS (célula troncohemopoética) 

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HEMOHISTIOBLASTO (célula tronco): origina os HEMOCITOBLASTOSMIELÓIDES e LINFÓIDES. Apresenta-se como uma célula de forma geralmentealongada, com diâmetro de cerca de 30 , citoplasma azul, com granulaçõesazurófilas. O núcleo apresenta-se arredondado ou ovalado, (relativamentepequeno para o tamanho da célula), de cromatina delicada com nucléolos nítidos.

HEMOCITOBLASTO: pode-se diferenciar em células das séries MIELÓIDE(eritrocitária, plaquetária e granulocítica-monocitária) e LINFÓIDE.Apresenta-se como uma célula arredondada, com diâmetro médio de 20, comcitoplasma basófilo, sem granulações, núcleo arredondado de cromatina frouxa,com 3 a 4 nucléolos.Entre a célula primitiva (Hemohistioblasto ou Célula Totipotente) e as célulasprogenitoras das diferentes linhagens sanguíneas, admite-se a existência de umacélula hematopoiéticamente comprometida e comum a todas elas ,denominada Stem Cell, que corresponderia ao Hemocitoblasto de Ferrata.

A partir do hemocitoblasto ocorrem processos de restrição seletiva de genes(diferenciação celular), originando a célula progenitora das linhagem mielóide e acélula progenitora da linhagem linfóide.

O processo de diferenciação celular é modulado pelo microambiente indutor dahemopoiese (HIM) que envolve células estromais, matriz extracelular e citocinas.

Os hemocitoblastos originam os progenitores mielóides e linfóides, quemorfologicamente são indestinguíveis entre si, e que são denominados deHemocitob lasto mielóide e Hemocitoblasto linfóide. 

SinonímiaHemocitoblasto mielóide  ou Progenitor Mielóide ou UFC-GEMM (UnidadesFormadoras de Colônias Granulocíticas, Eritrocíticas, Monocíticas eMegacariocíticas ou ainda Stem Cell Mieloide;

Hemocitoblasto linfóide  ou Progenitor Linfóide ou ainda Stem cell Linfóide.

A partir da UFC-GEMM derivam a progenitora de linhagem grânulo-monocítica(UFC-GM) e a progenitora da linhagem eritróide- megacariocítica (UFC-EM). Estesprogenitores de linhagem não são morfologicamente reconhecíveis.

A UFC-GM origina a série granulocítica (cuja primeira célula morfologicamentereconhecida é o mieloblasto) e a série monocítica (a primeira célulamorfologicamente reconhecida é o monoblasto).

A (UFC-EM) dá origem à série eritróide (o proeritroblasto é a primeira célulamorfologicamente reconhecida) e à série megacariocítica ou plaquetária (sendoo megacarioblasto a primeira célula morfologicamente reconhecida).

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1. SÉRIE ERITROCITÁRIA

1.1. PROERITROBLASTO: célula oval ou arredondada com 20 a 25 de

diâmetro, citoplasma reduzido, com basofilia atribuída ao RNA citoplasmáticodos ribossomas (persistem até RETICULÓCITO). O núcleo ocupa cerca de8/10 da célula, apresenta cromatina delicada e com a 1 a 2 nucléolos.

1.2. ERITROBLASTO BASÓFILO: célula geralmente com cerca de16 a 18 de diâmetro, citoplasma intensamente basófilo. O núcleo já nãoapresenta nucléolos visíveis (por coloração panóptica), a cromatina se dispõeem conglomerados de formas diversas, freqüentemente pentagonais ouhexagonais, que se distribuem no núcleo em forma semelhante aos raios deuma “roda de carroça”, mais ou menos regulares, dando aspectocaracterístico.

1.3. ERITROBLASTO POLICROMÁTICO: neste estágio de maturação, ahemoglobina está presente em grande quantidade, mas os ribossomas aindapersistem e conseqüentemente a coloração do citoplasma varia de azul acinza. A célula mede cerca de 9 a 12 de diâmetro, o núcleo ocupa cerca de25% da célula, cora-se mais intensamente, conservando sempre o aspectocaracterístico das condensações cromatínicas dispostas como “ roda decarroça “ .

1.4. ERITROBLASTO ORTOCROMÁTICO: nesta fase há uma grandediminuição do diâmetro: a célula mede cerca de 8 a 9, atinge o fim de sua

capacidade de síntese de DNA e é incapaz de atividade mitótica; ocitoplasma é saturado de hemoglobina com conseqüente acidofilia. O núcleoé constituído por massa homogênea de cromatina, sem estrutura definida, delocalização excêntrica, estágio que normalmente precede sua expulsão.

1.5. RETICULÓCITO: “célula” anucleada que em coloração panótica,apresenta citoplasma acidófilo, mas quando quando corada com corantesvitais (ex.: Novo Azul de Metileno ou o Azul de Cresil Brilhante) apresenta umretículo basófilo (RNAm) neste citoplasma.

1.6. ERITÓCITO: é um disco bicôncavo, anucleado, com cerca de 7 de

diâmetro, de coloração róseo-clara e com halo central mais claro.

2. SÉRIE PLAQUETÁRIA 

2.1. MEGACARIOBLASTO: célula com cerca de 30 de diâmetro,citoplasma basófilo, relação N/C elevada. A célula pode apresentar-se com

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1 ou 2 núcleos de forma irregulares, cromatina frouxa, reticular egeralmente com 2 ou 3 nucléolos.

2.2. MEGACARIOCITO BASÓFILO: a célula aumenta de tamanho, ocitoplasma apresenta granulações e intensa basofilia, presença de vários

núcleos, a cromatina condensa-se e, em geral, não se observam nucléolosna microscopia óptica.

2.3. MEGACARIOCÍTO ACIDÓFILO: a célula apresenta diâmetro de cercade 50 , a relação núcleo/citoplasma diminui, o citoplasma, agoraabundante, torna-se acidófilo com inúmeras granulações, o núcleo torna-sepicnótico. As células mais maduras apresentam plaquetas em sua periferia.Geralmente um megacariócito origina cerca de 2.000 plaquetas.

2.4. PLAQUETAS: são estruturas de forma estrelada, com diâmetro de 2 a5 geralmente; em casos patológicos podem apresentar 10 a 20;

apresentam região central mais escura e uma periférica mais clara, commuitas granulações.

3. SÉRIE GRANULOCÍTICA

3.1. MIELOBLASTO: apresenta diâmetrto de 20-25 ; célula de aspectoirregular, arredondada ou ovalada, citoplasma basófilo (menos que o doHemocitoblasto), com granulações azurófilas, relação núcleo/citoplasmagrande, núcleo de forma irregular (cromatina delicada), com2 a 3 nucléolos.

Origina as séries neutrófila, eosinófila e basófila.

Os granulócitos neutrófilos, eosinófilos e basófilos possuem asmesmas etapas de maturação, apresentando coloração do citoplasma eforma do núcleo semelhantes, mas com diferentes granulaçõesespecíficas citoplasmáticas.

GRANULAÇÕES ESPECÍFICAS

As granulações específicas dos neutrófilos apresentam-se pequenas,

ás vezes pouco visíveis, dispersas pelo citoplasma, que apresentacoloração vermelho salmão.

As granulações específicas dos eosinófilos, quando coradas porcorantes panóticos, apresentam variação de cor conforme o estado dematuração: no início são violáceas, depois tornam-se azul-violeta efinalmente tomam a cor laranja. São muito maiores que as do neutrófilo,

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com 0,4 – 0,8 de diâmetro, de forma esférica ou ovóide, dispostas por todoo citoplasma.

As granulações específicas dos basófilos, são na realidademetacromáticas, de cor violeta, de vários tamanhos, podendo atingir 2 

de diâmetro, dispondo-se por todo o citoplasma e sobre o núcleo,mascarando-o.

3.2. PROMIELÓCITO: apresenta cerca de 20 de diâmetro, formaarredondada ou ovalada; com coloração panótica. O citoplasma seapresenta basófilo, com granulações azurófilas e específicas (de neutrófilo ou eosinófilo ou basófilo), núcleo pode apresentar forma ovalada,arredondada (cromatina delicada) , com ou sem chanfradura e geralmentesem nucléolos evidentes.

3.3. MIELÓCITO: mede 12-18u de diâmetro; o citoplasma a partir desteestádio é acidófilo com granulações específicas evidentes (de neutrófilo oueosinófilo ou basófilo), por coloração panótica. Núcleo geralmentearredondado, podendo apresentar chanfradura e com cromatina maiscondensada.

3.4. METAMIELÓCITO: mede cerca de 15u, citoplasma acidófilo, comgranulações específicas evidentes (de neutrófilo ou eosinófilo oubasófilo) por coloração panótica. Núcleo se apresenta reniforme ecromatina condensada.

3.5. BASTONETE: mede cerca de 12 u, citoplasma acidófilo comgranulações específicas evidentes (de neutrófilo ou eosinófilo ou basófilo)por coloração panótica, núcleo em forma de ferradura.

3.6. SEGMENTADO: mede cerca de 12 u, citoplasma acidófilo comgranulações específicas evidentes (de neutrófilo ou eosinófilo oubasófilo) por coloração panótica. Núcleo lobulado (a média para neutrófilosé de 3 a 4 segmentos e para eosinófilos cerca de 2 segmentos).

4 SÉRIE MONOCITÁRIA

4.1. MONOBLASTO: célula grande (geralmente maior que oHemocitoblasto), com cerca de 30u, arredondada, citoplasma basófilo (azulclaro), podendo apresentar algumas granulações azurófilas, núcleogeralmente arredondado, podendo apresentar chanfradura, cromatinadelicada, disposta em rede, com 1 a 2 nucléolos.

4.2. PROMONÓCITO: célula intermediária entre monoblasto e monócito.

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4.3 MONÓCITO: apresenta diâmetro de 20 a 30 u, cotoplasma azul-acinzentado com um número variável de granulações azurófilas e vacúolos.Núcleo grande, freqüentemente chanfrado, cromatina delicada e disposta emrede.

5 SÉRIE LINFÓIDE

5.1. LINFOBLASTO: apresenta diâmetro de cerca de 15-20u, citoplasmabasófilo com halo claro perinuclear podendo, raramente apresentargranulações azurófilas; relação núcleo/citoplasma grande; cromatinanuclear delicada mas, com tendência a apresentar grumos, geralmente com1 a 2 nucléolos..

5.2. PROLINFÓCITO: é uma célula intermediária entre linfoblasto e

linfócito; apresenta diâmetro de 10 a 18u, relação núcleo/citoplasma grandemas tende a ser menor que a do LINFOBLASTO; citoplasma basófilo,podendo também apresentar algumas granulações azurófilas. O núcleo seapresenta arredondado ou oval, com cromatina mais condensada que a dolinfoblasto, mas mais delicada que a do linfócito; geralmente apresenta umnucléolo.

5.3. LINFÓCITOS: no sangue periférico podem ser observadas as formas:pequeno linfócito (7-8u de diâmetro) e grande linfócito (10u dediâmetro).

PEQUENO LINFÓCITO: célula arrendondada, apresenta relaçãonúcleo/citoplasma grande (o núcleo ocupa 9/10 da célula); por isso,geralmente, o citoplasma não é visualizado; o núcleo apresenta cromatinadensa.

GRANDE LINFÓCITO: é uma célula arredondada, citoplasma basófilo (azulclaro), geralmente com granulações azurófilas; núcleo arredondado(freqüentemente apresenta-se ligeiramente excêntrico); relaçãonúcleo/citoplasma menor do que a do pequeno linfócito.

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VALORES HEMATOLÓGICOS QUE SERÃO CONSIDERADOSNORMAIS PARA ADULTOS

Hemácias.................... Homens............. 4,6 a 6,2 milhões/mm3 

Mulheres............ 4.2 a 5,2 milhões/mm

3

 Hemoglobina......(Hb)... Homens.............. 14,0 a 17,0 g%

Mulheres............. 12,0 a 16,0 g%

Hematócrito....... (Ht) Homens............... 40 a 54%Mulheres............. 37 a 47%

Hemoglobina Corpuscular Média (HCM)................................... 27 a 32 ug ou pg

Volume Corpuscular Médio (VMC)............................................. 82 a 92 u3 

Concentração da Hemoglobina Corpuscula Média (CHCM)....... 32 a 36%

Plaquetas................................. 150.000 a 300.000/mm3 – Mét. de Rees-Ecker200.000 a 400.000/mm3– Mét. de Fônio

Leucócitos..................................................................... 5.000 a 10.000//mm3

% /mmNeutrófilos 0 0

Neutrófilos bastonetes 2 a 4 100 a 400Neutrófilos segmentados 54 a 62 2700 a 6200Eosinófilos 1 a 4 50 a 400Basófilos 0 a 1 0a 100Linfócitos 22 a 33 1100 a 3300Monócitos 3 a 7 150 a 700

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CONTAGEM DE RETICULÓCITOS

1. PRINCÍPIO

Quando o eritroblasto perde o núcleo, transforma-se em uma célulaanucleada com a propriedade de, quando corada a fresco (antes de fixada) por umcorante vital (por ex.: novo azul de metileno ou o azul de cresil brilhante), revelar apresença de um retículo formado por finos filamentos ou grânulos. Esta célula sechama RETICULÓCITO e é na evolução eritropoética, imediatamente anterior aoeritrócito. O reticulócito difere do eritrócito apenas quando à sua propriedade emrelação aos corantes vitais.

2. TÉCNICA “ A”

2.1. Aplica-se uma ou mais gotas de uma solução metanólica a 1% de azul decresil brilhante, sobre uma lâmina de vidro, em uma das extremidades. Aseguir coloca-se a lâmina em esturfa, para evaporação total do metanol(por 10 a 15 minutos).

2.2. Uma gota de sangue oxalatado, com menos de 30 minutos de coleta, écolocada sobre o corante e misturada a este ( com a ponta de uma lâminaou com um capilar fechado).

2.3. Após aproximadamente 30 segundos, estende-se a gota da misturasangue/corante.

2.4. A seguir, seca-se ao ar por agitação. A preparação pode ser contra-corada pelos corantes panóticos usuais (Leishman, por exeemplo).

2.5. Ao microscópio, com objetiva de imersão, contam-se cerca de 20 campose expressa-se o número de reticulócitos em % dos elementos da sérievermelha examinada. A contagem também pode ser expressa em númerode reticulócitos/mm3 de sangue.

3. VALORES NORMAIS

De 0,5 a 1,5% de reticulócitos , ou de 20.000 a 75.000/mm3 de sangue.

OBSERVAÇÃO: O valor “ normal” deve ser corrigido segundo o grau deanemia.

4. TÉCNICA “ B”

Empregamos o método de BRECHER, modificado

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4.1. Misturam-se partes EQUIVALENTES da solução corante (*) e de sangueoxalatado ou fesco ( com menos de 30 min. de coleta) em um tubo deKhan.

4.2. Deixa-se a mistura em repouso por 10 minutos (mínimo)

4.3. Coloca-se a mistura sobre uma lâmina e após estendê-la, secamos ao arpor agitação.

4.4. Após a secagem, a preparação pode ser examinada diretamente, ou apósfixação e contra coloração, utilizando-se a objetiva de imersão.

4.5. A contagem é idêntica à da técnica “A”

(*) Novo azul de metileno.......................... 0,5 gOxalato de potássio............................. 1,6 gÁgua destilada.................................... 100 ml