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MINISTÉRIO DA EDUCAÇÃO E CULTURA

UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO NORTE

CENTRO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE

PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS DA SAÚDE

ERIKA DANTAS DE MEDEIROS ROCHA

EFEITO DA SUPLEMENTAÇÃO ORAL DE ZINCO SOBRE O CRESCIMENTO DE

CRIANÇAS PRÉ-PÚBERES SAUDÁVEIS E EUTRÓFICAS SEM DEFICIÊNCIA DE

ZINCO

Natal/RN

2014




ZINCO

NATAL/RN

2014

Tese apresentada ao Programa de Pós-graduação em

Ciências da Saúde da Universidade Federal do Rio Grande

do Norte como requisito para a obtenção do título de

Doutor em Ciências da Saúde.

Orientador: Professor Dr. José Brandão Neto

Apoio ao Usuário

Catalogação de Publicação na Fonte. UFRN – Biblioteca Setorial do Centro de Ciências da Saúde

Rocha, Érika Dantas de Medeiros.

Efeitos da suplementação oral de zinco sobre o crescimento de crianças

pré-púberes saudáveis e eutróficas. – Natal/RN, 2014.

94f.

Orientador: Prof. Dr. José Brandão Filho.

Tese (Doutorado em Ciências da Saúde) – Programa de Pós-

Graduação em Ciências da Saúde. Universidade Federal do Rio Grande

do Norte. Centro de Ciências da Saúde.

1. Zinco – Tese. 2. Administração venosa – Tese. 3. Suplementação

oral – Tese 4. Sistema GH-IGF1 – Tese. 5. Crescimento – Tese. 6.

Criança – Tese. I. Brandão Filho, José. II. Título.

RN/UF/BSA01 CDU: 616.379-008.64

MINISTÉRIO DA EDUCAÇÃO

UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO NORTE

CENTRO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE

PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS DA SAÚDE

Coordenador do Programa de Pós-graduação em Ciências da Saúde:

Professor Dr. Erivaldo Sócrates Tabosa do Egito

iii




ZINCO

Aprovada em ____/____/____

Banca Examinadora:

Presidente da Banca:

Professor Dr. José Brandão Neto

Membros da Banca:

Professor Dr. Alcides da Silva Diniz

Professora Dra. Karine Cavalcanti Maurício de Sena Evangelista

Professora Dra. Maria José de Carvalho Costa

Professora Dra. Selma Sousa Bruno

iv

AGRADECIMENTOS

“Nada na vida acontece por um acaso, e se aconteceu DEUS quis assim”. Portanto, minha

gratidão, primeiramente, e acima de tudo, a Ele que, diante de todas as atribulações, esteve

presente em minha vida, guiando todos os obstáculos, removendo as pedras que surgiram em

meu caminho e atendendo as minhas necessidades.

À minha família, especialmente, meu pai Durval Dantas, minha irmã Mariana Medeiros

Dantas, e meus irmãos Davi Marins Dantas e Durval Dantas Junior, pelo apoio em todos os

momentos vivenciados.

À minha mãe, peça fundamental do quebra-cabeça da minha vida e de importância

inquestionável; por ter me carregado em seu ventre por nove meses, sem se queixar; por ter

cuidado de mim, com tanto amor e dedicação, sem se importar com o amanhã; pelos

incessantes esforços em me proporcionar educação de qualidade e ensinamentos de ética e

moral. Minha eterna gratidão!

À minha tia, Marluce Dantas de Medeiros, considerada minha “segunda mãe”, a qual tenho

enorme apreço e respeito, pelo amor, carinho, dedicação e ensinamentos proporcionados.

Ao grupo de pesquisa, em especial, as colegas Lúcia Dantas Leite e Naira Josele Neves de

Brito Neves, pela paciência e pelo companheirismo durante a trajetória da pós-graduação.

v

http://frases.globo.com/eca-de-queiroz/5940

A todas as crianças e suas respectivas famílias, que aceitaram em participar do estudo,

colaborando de forma ímpar para a concretização do mesmo.

A todos os funcionários que, direta ou indiretamente, contribuíram para a realização deste

trabalho.

vi

AGRADECIMENTO ESPECIAL

Ao meu orientador, Professor Dr. José Brandão-Neto, pelos seus valiosos ensinamentos, pela

divisão de conhecimento, pela amizade, pela confiança, pelo estímulo, pela presença marcante

na minha vida acadêmica, me ensinando e estimulando a correr atrás de meus objetivos e

superar os meus limites.

vii

“A vida é uma peça de teatro que não permite ensaios. Por isso, cante, chore, dance, ria e

viva intensamente, antes que a cortina se feche e a peça termine sem aplausos”.

Charles Chaplin

viii

RESUMO

Introdução: o zinco é um importante micronutriente para numerosos processos bioquímicos

em animais e humanos, desempenhando papel de destaque no crescimento e desenvolvimento.

Em populações mundiais, a deficiência primária grave de zinco não é comum, embora, a

deficiência leve seja bastante prevalente. Considerando que o zinco é essencial para a saúde

humana e regula o sistema hipotálamo, hipófise, fígado e osso, buscamos averiguar os seus

efeitos no eixo GH-IGF1-IGFBP3 agudamente, mediante administração intravenosa com o

elemento zinco, e cronicamente, mediante suplementação oral com o elemento zinco, usando

doses fisiológicas de 0.06537 mg Zn/kg (via intravenosa) e 10 mg Zn/dia (via oral). A

inclusão de crianças pré-púberes aparentemente saudáveis e eutróficas sem deficiência de

zinco é raro na literatura, pois grande parte das publicações foram reportadas em crianças

apresentando deficiência de zinco. A metodologia aplicada foi absolutamente inovadora e

original, tornando o estudo altamente relevante para a interface entre endocrinologia e

nutrição. Objetivo: investigar os efeitos da suplementação oral e administração intravenosa

com o elemento zinco sobre a secreção de GH, IGF1, IGFBP3, OCN, ALP, TRAP e PT em

crianças aparentemente saudáveis e eutróficas sem deficiência de zinco. Métodos: o estudo

foi conduzido durante um período de três meses, e caracterizado por ser randomizado

controlado triplo cego. As crianças foram selecionadas por amostragem não probabilística de

conveniência, provenientes de escolas públicas municipais, de ambos os gêneros, na faixa

etária compreendida entre 8 e 9 anos de idade, divididas em grupo controle (20 crianças

recebendo solução placebo contendo 10% de sorbitol) e grupo experimental (20 crianças

suplementadas com o elemento zinco na forma de sulfato de zinco heptahidratado –

ZnSO4.7H2O). As crianças foram submetidas à suplementação oral de zinco elementar (10 mg

Zn/dia) e à administração intravenosa de zinco (0.06537 mg Zn/kg de peso corporal), na

forma de ZnSO4.7H2O, cujas amostras sanguíneas foram coletadas em 0, 60, 120, 180 e 210

minutos. Foram realizadas avaliações antropométricas e dietéticas e dosagens bioquímicas e

hormonais nas crianças estudadas. Resultados: após a suplementação oral, foi observado no

grupo experimental (i) aumento significativo dos valores de ingestão de energia total, proteína

e gordura total (p = 0.0007, p< 0.0001, p< 0.0001, respectivamente), (ii) aumento

significativo do zinco sérico basal (p< 0.0001), aumento significativo das concentrações

plasmáticas de fostatase alcalina (p = 0.0270), e (iv) correlação positiva com o IGF1,

IGFBP3, OCN, comparando antes e após a suplementação (p = 0.0011, p< 0.0001, p< 0.0446,

respectivamente). Durante a administração venosa de zinco, as concentrações plasmáticas de

IGF1 e IGFBP3 aumentaram significativamente no grupo experimental (p = 0.0468, p <

0.0001, respectivamente). Em relação o cálculo da adequação aparente, segundo as DRI, para

o cálcio, houve inadequação da dieta com 85% de confiabilidade dos dados; para o ferro,

adequação da dieta, com 85% de confiabilidade dos dados. Para o zinco, adequação da dieta,

com 50% de confiabilidade dos dados. Conclusões: a suplementação oral com o elemento

zinco pode ter estimulado um aumento na ingestão de energia total, proteína e gordura total,

assim como, nas concentrações basais de zinco sérico e nas concentrações plasmáticas de

fosfatase alcalina. A administração intravenosa de zinco aumentou as concentrações séricas de

zinco e as concentrações plasmáticas de GH, IGF1 e IGFBP3 no grupo experimental.

Descritores: zinco; administração intravenosa; suplementação oral; sistema GH-IGF1;

crescimento; criança.

x

LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS

ALP Alkaline Phosphatase (Fosfatase Alcalina)

BMI Body Mass Index (Índice de Massa Corporal)

DRI Dietary Reference Intake (Ingestão Dietética de Referência)

EAR Estimated Average Requirements (Necessidade Média Estimada)

GH Growth Hormone (Hormônio de Crescimento)

GHRH Gonadotropin-Releasing Hormone (Hormônio Liberador de GH)

IGF1 Insulin-Like Growth Factor 1 (Fator de Crescimento Semelhante a Insulina

Tipo 1)

IGFBP

3

Insulin-like Growth Factor-Binding Protein-3 (Proteína Ligadora 3 do Fator

de Crescimento Semelhante a Insulina)

OCN Osteocalcin (Osteocalcina)

OMS Organização Mundial de Saúde

PT Total Protein (Proteínas Totais)

PTH Parathyroid Hormone (Paratormônio)

RDA Recommended Dietary Allowance (Ingestão Dietética Recomendada)

T3 Triiodothyronine (Triiodotironina)

TRAP Tartrate-Resistant Acid Phosphatase (Fosfatase Ácida Resistente ao

Tartarato)

UFRN Universidade Federal do Rio Grande do Norte

UL Tolerable Upper Intake Levels (Limite Superior Tolerável de Ingestão)

WHO World Health Organization

xi

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 Ação do zinco sobre o crescimento ósseo longitudinal.

Figura 2 Desenho experimental do estudo.

Figura 3 Esquema da administração venosa com o elemento zinco.

Figura 4 Esquema da avaliação do estado nutricional.

Figura 5 Esquema dos procedimentos biológicos e análises bioquímicas.

xii

LISTA DE APENDICES

Apêndice 1 Original Research

“Sensitivity of zinc kinetics and nutritional assessment of children

submitted to venous zinc tolerance test”

Apêndice 2 Review

“Kinetics of zinc status and zinc deficiency in Berardinelli-Seip syndrome”

Apêndice 3 Figura 1: zinco sérico (A), área sob a curva de zinco (B), zinco ingerido e

suplementado (C) nos grupos controle e experimental.

Apêndice 4 Figura 2: concentrações plasmáticas de GH (A), IGF1 (B), IGFBP3 (C) e

OCN (D) nos grupos controle e experimental durante a administração

intravenosa de zinco.

Apêndice 5 Figura 3: área sob a curva de zinco e IMC (A), GH (B), IGF1 (C), IGFBP3

(D), OCN (E) e IGF1 versus IGFBP3 (F) no grupo experimental após a

suplementação oral de zinco.

Apêndice 6 Tabela 1: valores de ingestão de energia e nutrientes antes e após a

suplementação oral de zinco nos grupos controle e experimental,

comparados com as recomendações segundo gênero e idade.

Apêndice 7 Tabela 2: valores do peso corporal, altura e IMC obtidos antes e após a

suplementação oral com o elemento zinco nos grupos controle e

experimental.

xiii

LISTA DE ANEXOS

Anexo 1

Certificado do Comitê de Ética em Pesquisa com Seres Humanos do Hospital

Universitário Onofre Lopes da Universidade Federal do Rio Grande do Norte

(CEP-HUOL)

xiv

SUMÁRIO

RESUMO ix

LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS xi

LISTA DE FIGURAS xii

LISTA DE APÊNDICES xiii

LISTA DE ANEXOS xiv

SUMÁRIO xv

1. INTRODUÇÃO 17

2. OBJETIVOS 21

2.1. Objetivo Geral 21

2.2. Objetivos Específicos 21

3. JUSTIFICATIVA 22

4. MÉTODOS 23

4.1. Sujeitos 23

4.2. Critérios de Inclusão e Exclusão 24

4.3. Desenho Experimental 25

4.4. Suplementação Oral com o Elemento Zinco 27

4.5. Administração Intravenosa com o Elemento zinco 28

4.6. Avaliação Antropométrica do Estado Nutricional 29

4.7. Avaliação Dietética 30

4.8. Materiais Biológicos 32

4.9. Procedimentos para Coleta de Materiais Biológicos e Análises

Bioquímicas

33

4.10. Tratamento Estatístico 35

5. ARTIGO PRODUZIDO 36

6. COMENTÁRIOS, CRÍTICAS E CONSIDERAÇÕES FINAIS 77

7. REFERÊNCIAS 81

APÊNDICE 1 87

APÊNDICE 2 88

APÊNDICE 3 89

APÊNDICE 4 90

APÊNDICE 5 91

APÊNDICE 6 92

APÊNDICE 7 93

ANEXO 1 94

xvi

17

1. INTRODUÇÃO

O zinco é um elemento-traço essencial à vida, desempenhando inúmeras funções vitais

no organismo humano. A compreensão a respeito de sua essencialidade foi descrita, pela

primeira vez, por meio de estudos desenvolvidos em 1869, os quais mostraram a necessidade

desse micronutriente para o crescimento do fungo Aspergilus niger 1, 2

.

O zinco atua na síntese e degradação de DNA (ácido desoxirribonucléico) e RNA (ácido

ribonucléico), expressão gênica, proliferação e diferenciação celular, apoptose, estabilização

de membranas e componentes celulares, sistemas imunológico e hormonal, crescimento e

desenvolvimento 3,4

. Além disso, é constituinte estrutural, regulador e catalítico de várias

enzimas e proteínas. Possui ação antioxidante, protegendo estruturas biológicas da ação de

radicais livres 5. Considerando sua multiplicidade de funções vitais, a deficiência de zinco

pode causar sérios problemas à saúde humana 6.

Em populações mundiais, a deficiência primária grave de zinco não é comum, embora,

a deficiência leve seja bastante prevalente 7,8

. Porém, não existe um método diagnóstico

completamente fidedigno para detectar a deficiência subclínica desse micronutriente.

Alterações fisiológicas ou teciduais não são evidentes com o declínio da concentração sérica

de zinco. Apesar das limitações, o zinco sérico é utilizado como marcador bioquímico para

avaliar o estado corporal de zinco, principalmente, em populações 9,10

.

Crianças de baixa renda, de países em desenvolvimento e em idade escolar, representam

um grupo de risco para o desenvolvimento da deficiência de zinco. Isso, devido a escolhas

alimentares errôneas. Portanto, a carência deste micronutriente, nesta faixa etária, pode

promover conseqüências como atraso no crescimento e desenvolvimento, hiporexia,

supressão do sistema imunológico e dano na função cognitiva 11

. A magnitude dessas

18

conseqüências é proporcional à severidade de sua deficiência 12

. Nos países em

desenvolvimento, a deficiência de zinco constitui um dos fatores mais importantes para o

agravamento de doenças com elevada mortalidade. Sendo assim, a suplementação de zinco

pode contribuir na redução da mortalidade infantil 13

.

Inúmeros modelos animais e estudos envolvendo seres humanos têm mostrado a relação

do zinco com a ativação de mecanismos envolvidos no crescimento e desenvolvimento. Este

micronutriente atua em mecanismos de secreção e ação periférica de hormônios envolvidos

no crescimento 14, 15

. Os principais mecanismos são: o zinco pode estimular o GHRH

(hormônio liberador de GH) no hipotálamo 16

, a síntese de GH (hormônio de crescimento) na

hipófise 17

, a ação do GH nos seus receptores hepáticos e consequente síntese do IGF1 (fator

de crescimento semelhante a insulina tipo 1) no fígado 18

, a ação do IGF1 nos condrócitos

(epífises ósseas) 19

, a síntese de IGFBP3 (proteína ligadora 3 do fator de crescimento

semelhante a insulina) no fígado 20

, a síntese de ALP (fosfatase alcalina) e OCN (osteocalcina)

na matriz óssea 14,21

. Além disso, pode potencializar a ação do estradiol 22

, testosterona 23

,

insulina 24

, vitamina D3 (colecalciferol) 25

, T3 (triiodotironina) 26

, e inibir a ação do PTH

(paratormônio) 27

. A Figura 1 ilustra esses mecanismos.

19

Figura 1: Ação do zinco sobre o crescimento ósseo longitudinal.

O sistema hipotálamo-hipófise-fígado-osso é o principal regulador do crescimento. A

maioria dos estudos mostram o efeito positivo do zinco no crescimento de crianças com

deficiência de zinco, embora os mecanismos não estão completamente compreendidos 28

. No

entanto, observa-se que o zinco estimula ou induz (Figura 1): os neuropeptídeos

hipotalâmicos 16

, a secreção fisiológica do GH 28, 17

, a sensibilidade do GH endógeno 29

, a

ligação do GH nos seus receptores hepáticos 18

, a bioatividade do GH 30

, a dimerização do GH

19, a expressão gênica dos receptores de GH e IGF1 no fígado

31, e GH pós-receptor

23.

As concentrações plasmáticas dos hormônios IGF1 e IGFBP3 aumentam com a idade

em crianças, particularmente no puberal catch-up 32

. Esses hormônios são influenciados pelo

zinco, e a deficiência deste micronutriente pode diminuir as concentrações plasmáticas de

IGF1 e IGFBP3 circulantes 20

, que são aumentados após a suplementação oral de zinco,

incluindo crianças sem deficiência de zinco 14, 20

. Em relação o IGF1, o zinco é essencial para

Pituitária

Fígado

OSSO

GH

IGF1

Condroblastos

Osteoblastos

Fibroblastos

Estradiol

Testosterona

Insulina

Colecalciferol

Triiodotironina

Paratormômio

[--]

[--]

[-]

Zn

Zn

Zn

Zn

Zn +

+

+

+

+

+

HIPOTÁLAMO

GHRH

[+]

GHIH

[--]

Osteocalcina

Fosfatase alcalina

20

a indução da proliferação de células de IGF1 33

, a ativação do receptor tirosina quiinase de

IGF1 34

, e a expressão gênica hepática de IGF1 35

.

O hormônio OCN, proteína não colagenosa, dependente de vitamina K, é secretado na

fase final do processo de diferenciação de osteoblastos 36

. Suas concentrações séricas estão

mais elevadas durante a infância e a puberdade, marcadamente nos gêneros feminino e

masculino 37

. Além disso, os níveis mRNA de OCN foram positivamente correlacionados com

o zinco em uma linha de osteoblasto-like em ratos 38

.

A suplementação oral com o elemento zinco aumentou os níveis séricos de OCN em

crianças com baixa estatura apresentando deficiência subclínica de zinco 21

e em MC3T3-E1,

uma linha celular osteoblástica em ratos 38

, confirmando a sua importância para o bom

funcionamento do metabolismo ósseo 36

. Portanto, o zinco interage em várias etapas da

síntese, secreção e ação dos hormônios, essenciais para o crescimento linear.

Portanto a ALP é um subproduto da atividade dos osteoblastos, associada com a

formação óssea, enquanto TRAP (fosfatase ácida resistente ao tartarato) é uma enzima

expressa pelos osteoclastos de reabsorção óssea. A síntese de ALP pode está prejudicada em

crianças com deficiência de zinco 14

.

Diante do exposto, o nosso objetivo foi avaliar o efeito da suplementação oral com o

elemento zinco sobre a secreção de GH, IGF1, IGFBP3, OCN, ALP, TRAP e PT (proteínas

totais) em crianças aparentemente saudáveis e eutróficas, de ambos os gêneros, na faixa etária

compreendida entre 8 (oito) e 9 (nove) anos de idade, portanto, sem deficiência de zinco,

usando uma dose fisiológica pelas vias oral e intravenosa.

21

2. OBJETIVOS

2.1. Objetivo Geral

Avaliar o efeito da suplementação oral e administração venosa de zinco na secreção de GH,

IGF1, IGFBP3, OCN, ALP, TRAP e PT em crianças pré-púberes aparentemente saudáveis e

eutróficas sem deficiência de zinco.

2.2. Objetivos Específicos

Estimar a ingestão dietética de energia total, macronutrientes, fibras, cálcio, ferro e

zinco;

Verificar a adequação aparente da dieta consumida habitualmente pelas crianças, em

relação o cálcio, ferro e zinco;

Determinar o estado nutricional antropométrico mediante o indicador IMC/idade;

Analisar, antes e após a suplementação oral com o elemento zinco, as dosagens de

zinco sérico, ALP, TRAP e PT e hemoglobina;

Estudar a relação do zinco sérico com os níveis plasmáticos de GH, IGF1, IGFBP3 e

OCN, durante a administração venosa de zinco, tanto antes e como após a sua

suplementação oral;

Investigar a relação do zinco sérico com os níveis plasmáticos de ALP, TRAP e PT.

22

3. JUSTIFICATIVA

O zinco é apontado como um dos principais micronutrientes essenciais para os seres

vivos, em especial, os humanos. Atua positivamente sobre os sistemas imunológico, nervoso

central e periférico, reprodutivo, além do metabolismo intermediário. Em virtude de sua

multiplicidade de funções vitais, a deficiência de zinco pode causar vários danos à saúde

humana 2.

Considerando que este micronutriente é vital para o crescimento e desenvolvimento

humano, buscou-se averiguar seus efeitos sobre o sistema hipotálamo, hipófise, fígado e osso,

mediante administração intravenosa e suplementação oral com o elemento zinco. Existem

vários estudos abordando o retardo no crescimento como causa de déficits nutricionais

relacionados com macro e micronutrientes.

A desaceleração do crescimento ocorre como resposta adaptativa a uma nutrição

subótima que impede o suprimento adequado para alcançar um determinado potencial

genético de crescimento. A carência subclínica de micronutrientes, especialmente de zinco, é

de difícil avaliação e muitas vezes não condiz com o diagnóstico da antropometria. Além

disso, muitas nucleoproteínas que contém zinco estão envolvidas na expressão de proteínas

importantes ao crescimento. A deficiência deste micronutriente pode também reduzir a síntese

e ação de GH, IGF1 e IGFBP3.

Este trabalho foi realizado com crianças pré-púberes aparentemente saudáveis e

eutróficas sem deficiência de zinco, usando doses fisiológicas (10 mgZn/dia e 0.06537

mgZn/kg) vias oral e intravenosa, sem efeitos adversos à saúde das crianças. Portanto, a

metodologia aplicada foi absolutamente inovadora e original, tornando o estudo altamente

relevante para a interface entre endocrinologia e nutrição. Quando detectada a deficiência, a

intervenção poderá melhorar o processo de crescimento e desenvolvimento da criança.

23

4. MÉTODOS

4.1. Sujeitos

Participaram do estudo 40 (quarenta) crianças, sendo 17 (dezessete) do gênero feminino

e 23 (vinte e três) do gênero masculino, na faixa etária compreendida entre 8 (oito) e 9 (nove)

anos de idade. Aumentamos o número de crianças para 20 (vinte) controles e 20 (vinte)

experimentais e também a dose de 5 mg Zn/dia para 10 mg Zn/dia. Foram incluídas apenas as

crianças nesta faixa etária, em virtude de resistirem melhor o tempo exigido pelo teste venoso

de tolerância ao zinco, que passou de 2 (duas) horas para 4 (quatro) horas, após jejum noturno

de 12 (doze) horas.

As crianças foram provenientes de três escolas municipais do noroeste da Cidade do

Natal, RN, Brasil, entre o período de 2008 e 2011. As escolas que participaram do estudo

foram Escola Municipal Laura Maia localizada na Rua do Motor, Praia do Meio; Escola

Municipal Henrique Castriciano na Rua Décio Fonseca, Rocas; e Escola Municipal Antônio

Campos na Rua João, Mãe Luíza.

Foram selecionadas por amostragem não probabilística de conveniência. O tamanho da

amostra foi calculado usando a fórmula η = (α Z + Zβ) 2.σ2D/d2, através da qual o tamanho

da amostra necessária seria η = 15. A principal limitação foi a falta de outro grupo de estudo

com uma dose farmacológica de 25 mg Zn/dia durante 3 (três) ou 6 (seis) meses.

O consentimento escrito foi obtido de todos os pais ou responsáveis, além da

concordância da criança em participar do estudo. Os protocolos foram aprovados pelo Comitê

de Ética em Pesquisa do Hospital Universitário Onofre Lopes (CEP-HUOL) da UFRN (nº

323/09). Para o desenvolvimento do presente estudo, foram atendidos todos os princípios

24

éticos da pesquisa envolvendo seres humanos, em consonância com a Resolução Nº 466 de 12

de dezembro de 2012 do Conselho Nacional de Saúde.

Após a aprovação do estudo pelo CEP e antes do seu inicio, foi realizada uma reunião

com os responsáveis legais pelas crianças e direção da escola para explicar o caráter da

pesquisa e as etapas do estudo. Após os esclarecimentos, foi entregue para assinatura o Termo

de Consentimento Livre e Esclarecido (TCLE) para confirmar a participação voluntária da

criança no estudo.

Foi ainda esclarecido sobre o sigilo das informações obtidas e que os resultados deste

estudo poderiam ser publicados, sem revelar a identificação dos participantes. Além disso,

que os mesmos poderiam desistir de participar da pesquisa, em qualquer momento, e sem

nenhum prejuízo.

4.2. Critérios de Inclusão e Exclusão

Participaram do estudo, crianças na faixa etária compreendida entre 8 e 9 anos de idade,

de ambos os gêneros, aparentemente saudáveis e eutróficas sem deficiência de zinco, sem

doenças agudas ou crônicas, segundo avaliações antropométrica, clínica e laboratorial. De

acordo com o estado nutricional, conforme indicador antropométrico IMC/idade, foram

classificadas como eutróficas, com base no ponto de corte para o percentil entre 15 e 85.

Clinicamente, foram avaliadas segundo estágio I de Tanner para crescimento de pêlos

pubianos, seios e genital 39

. Esta avaliação foi realizada por um médico endocrinologista.

Foram excluídas as crianças categorizadas no estágio II de Tanner com presença de

telarca (desenvolvimento de glândulas mamárias), pubarca (aparecimento precoce de pêlos

pubianos), ou menarca (aparecimento da primeira menstruação), presença de sobrepeso,

25

obesidade, doenças infecciosas ou inflamatórias agudas ou crônicas, submetidas a cirurgia,

utilizando qualquer suplemento vitamínico e mineral, ou que desistiram de participar do

estudo. Além disso, aquelas que apresentaram zinco sérico abaixo de 0.7 μg/mL.

4.3. Desenho Experimental

O estudo foi conduzido no Laboratório Multidisciplinar de Doenças Degenerativas

Crônicas, durante um período de três meses (Figura 2). Determinamos este período pelo fato

de ser o tempo mínimo para uma boa ação do zinco sobre os mecanismos biológicos, nos

quais ele atua. Foi caracterizado por ser randomizado controlado do tipo triplo-cego, formado

por um processo de amostragem não probabilística (amostra de conveniência), cujos

voluntários foram divididos em grupos controle e experimental. O pareamento foi realizado

de maneira aleatória, considerando idade e gênero. O grupo controle foi constituído por 20

(vinte) crianças, sendo 9 (nove) do gênero feminino e 11 (onze) do gênero masculino, usando

placebo. O grupo experimental foi constituído por 20 crianças, sendo 8 (oito) do gênero

feminino e 12 (doze) do gênero masculino, usando suplementação oral com o elemento zinco.

A ingestão dietética de energia, macronutrientes, fibras, cálcio, ferro e zinco; a

avaliação do estado nutricional antropométrico; as dosagens de zinco sérico, GH, IGF-1,

IGFBP-3, OCN, ALP, TRAP, PT e hemoglobina foram observadas antes e após a

suplementação oral com o elemento zinco.

As crianças faziam parte de um mesmo universo de estudo, compunham uma faixa

etária previamente definida e tinham condições socioeconômicas similares, contribuindo para

a homogeneidade da amostra. Outro aspecto importante é que embora os parâmetros

antropométricos indicassem a classificação de eutrofia, a determinação do estado nutricional

26

não deveria ser baseada unicamente nesse método. Na maioria dos casos, o peso pode estar

adequado à altura e à idade. No entanto, o consumo alimentar e os dados bioquímicos podem

indicar carência de proteínas e micronutrientes, contrapondo-se a um estado de eutrofia.

Considerando esses aspectos, as crianças foram reunidas em dois grupos (controle e

experimental), e avaliadas em momentos distintos, antes e após a suplementação oral de zinco

durante três meses.

Figura 2: Desenho experimental do estudo.

27

4.4. Suplementação Oral com o Elemento Zinco

Durante 3 (três) meses, as crianças do grupo experimental foram submetidas a

suplementação oral com 10 mg do elemento zinco por dia, sob a forma de solução de sulfato

de zinco heptahidratado (ZnSO4.7H2O, Merck, Darmstadt, Alemanha). A escolha por esta

fórmula química foi devido ser a mais usada na literatura científica, assim como, ser a mais

bem tolerada pelos humanos, sem causar flatulência, náuseas, vômitos e pirose. As crianças

do grupo controle receberam, por via oral, solução de placebo contendo sorbitol a 10%.

Os xaropes foram preparados no Laboratório de Farmacotécnica do Departamento de

Farmácia da UFRN. Cada gota do xarope continha 1 mg de zinco elementar. Dez gotas de

xarope foram adicionadas a um alimento líquido (leite ou suco) servido todos os dias, no

desjejum. A escolha deste alimento ficou sob critério dos pais e crianças, a fim de evitar

interferências nas opções individuais e garantir maior adesão dos participantes. A ingestão foi

monitorada pelo mesmo observador, quinzenalmente, por meio de contato pessoal em visita

domiciliar, ou telefônico, com a mãe ou responsável pela criança.

A dose suplementada (10 mg Zn/dia) ultrapassou em 6 mg a EAR (4 mg Zn/dia) e em 5

mg a RDA (5 mg Zn/dia) para as crianças com 8 (oito) anos de idade. Para as crianças com 9

(nove) anos de idade, a dose ficou aquém da EAR e RDA (7 mg e 8 mg Zn/dia,

respectivamente). As crianças com 8 (oito) anos de idade, o somatório entre zinco

suplementado e o zinco proveniente da alimentação ultrapassou os valores de UL (12 mg

Zn/dia) 40

. No entanto, para as crianças com 9 (nove) anos de idade, não excedeu os valores

de UL (23 mg Zn/dia). Entretanto, podemos dizer que a dose escolhida foi considerada segura

e fisiológica.

28

4.5. Administração Intravenosa com o Elemento Zinco

As crianças dos grupos controle e experimental foram submetidas à administração

venosa de zinco em dois momentos, antes (tempo 1) e após (tempo 2) a suplementação oral

com o elemento zinco. O teste teve início às 7 horas da manhã, após um jejum noturno de 12

(doze) horas, e concluído às 12 (doze) horas. Todas as crianças foram monitoradas, pelos

pesquisadores responsáveis (médico e nutricionistas).

Cada criança foi mantida em decúbito dorsal durante o procedimento. Uma veia

antecubital do antebraço foi puncionada e infundida solução salina (livre de zinco) durante

todo o ensaio. Uma dose de 0,06537 mg Zn/kg de peso corporal (1 μmol ZnSO4.7H2O) foi

injetado no tempo 0 minuto, em bolus. Cada ampola continha 5 mL = 40 μmol ZnSO4.7H2O.

Essas ampolas foram preparadas pela Injectcenter (Manipulação de Injetáveis, Ribeirão Preto,

Brasil). As amostras de sangue foram coletadas nos tempos 0 (zero), antes da administração

venosa com o elemento zinco, 60 (sessenta), 120 (cento e vinte), 180 (cento e oitenta) e 210

(duzentos e dez) minutos, após a administração venosa com o elemento zinco, como mostrado

na Figura 3. Seringas de plástico polipropileno foram utilizadas em todas as coletas de

sangue.

29

Figura 3: Esquema da administração venosa com o elemento zinco.

4.6. Avaliação Antropométrica do Estado Nutricional

Para a avaliação antropométrica do estado nutricional (Figura 4), o peso corporal (kg) e

a altura (cm) foram aferidos utilizando-se uma balança eletrônica (Balmak, BK50F, São Paulo,

Brasil) e um estadiômetro fixo (Estadiômetro Professional Sanny, American Medical do

Brasil, São Paulo, Brasil), respectivamente. Para aferição do peso, a criança permaneceu em

pé sobre a balança vestindo roupas leves e sem calçados. Para aferição da altura, a criança

permaneceu em pé, sem calçados, com os calcanhares juntos e o corpo o mais reto possível.

Os calcanhares, glúteo, ombros e cabeça tocaram a superfície vertical do equipamento de

medida. Os procedimentos foram realizados pelo mesmo observador.

A classificação do estado nutricional foi baseada no indicador antropométrico

30

IMC/idade mediante as curvas de crescimento publicadas pela OMS 41

, a qual reconstruiu a

referência de crescimento recomendada pelo National Center for Health Statisticspara

crianças de 5 (cinco) a 19 (dezenove) anos de idade. Os pontos de corte recomendados pela

OMS foram percentil abaixo de 0,1 para IMC muito baixo para a idade, percentil entre 0,1 e

3,0 para IMC baixo para a idade, percentil entre 3,0 e 15,0 vigilância para IMC baixo para a

idade, percentil entre 15 e 85 para IMC adequado para a idade, percentil entre 85 e 97

vigilância para IMC elevado para a idade (sobrepeso), e percentil acima de 97 para excesso de

peso (obesidade). Os cálculos foram realizados mediante o WHO AnthroPlus v1.0.4 42

.

4.7. Avaliação Dietética

Para a avaliação da ingestão dietética (Figura 4), foi utilizado o registro alimentar

prospectivo de três dias, sendo dois dias durante a semana e um dia do final de semana. Todas

as mães ou responsáveis foram orientados sobre a técnica para o preenchimento dos registros

alimentares. Foram registrados os horários das refeições, tipos de alimentos e bebidas

consumidos durante o dia e suas respectivas medidas caseiras, a fim de prover estimativas da

ingestão habitual do momento em que a criança acordou até a hora que foi dormir. Além disso,

foram coletadas descrições detalhadas dos alimentos consumidos e o modo de preparo das

refeições.

As medidas caseiras foram convertidas em unidades de peso (miligramas) e em

unidades de volume (mililitros e litros). Foi realizado também o controle de qualidade dos

registros alimentares, mediante identificação e correção de eventuais erros na obtenção de

dados dietéticos, tais como, descrição incompleta dos alimentos, modo de preparo e/ou das

medidas caseiras.

31

Posteriormente, para a análise do valor nutricional de energia, macronutrientes, fibras,

cálcio, ferro e zinco dos alimentos e refeições consumidos, foram utilizados o ambiente

virtual do software NutWin versão 1.5 43

e as informações contidas na tabela de composição

química de alimentos da UNICAMP (TACO) 44

. Quando não existiam informações na tabela

TACO, era procedida a inserção de novos alimentos ou preparações no software, através do

rótulo nutricional do alimento consumido pela criança. Os valores foram comparados com as

recomendações para idade e gênero: energia, macronutrientes e fibras 45, 46

, cálcio 47

, ferro e

zinco 40

.

Foi realizado o cálculo da adequação aparente, segundo as DRI (ingestão dietética de

referência), para cálcio, ferro e zinco. Os cálculos foram feitos individualmente, considerando

gênero e idade. Os dados utilizados para calcular o nível de confiabilidade da dieta está

adequada e atender as necessidades do nutriente foram a ingestão dietética total, a avaliação

da ingestão dos três dias de consumo alimentar, estimativa de necessidade do nutriente sendo

EAR (necessidade média estimada) o valor de referência utilizado e as variâncias inter e

intrapessoal. Para o cálcio, houve inadequação da dieta com 85% de confiabilidade dos dados.

Para o ferro, adequação da dieta, com 85% de confiabilidade dos dados. Para o zinco,

adequação da dieta, com 50% de confiabilidade dos dados.

32

Figura 4: Esquema da avaliação do estado nutricional.

4.8. Materiais Biológicos

As amostras de sangue para análises de zinco foram coletadas em tubos Vacutainer

Becton Dinckson (Trace Element, Soro, BD Franklin Lakes, NJ, USA), as amostras de sangue

para análises bioquímicas foram coletados em tubos Vacuette Z com soro ativador coágulo

(GreinerBio-One, Monroe, NC, USA), e as amostras de sangue para análises hormonais foram

coletadas em tubos Vacuette NH Sod Hep PREM GRN/GRN (GreinerBio-One, Monroe, NC,

USA).As amostras de zinco foram armazenadas em uma estufa de aço inoxidável adequada

para metais (Orion, Fanem, São Paulo, SP, Brasil). As soluções salinas (livres de metais)

foram adquiridas de Gaspar Viana S/A (Fortaleza, CE, Brasil) e seringas de polipropileno de

Becton Dinckson (Hercules, CA, USA). Ponteiras de plástico e tubos (livres de metal) foram

33

obtidos na Bio Rad Laboratories (Hercules, CA, USA).

4.9. Procedimentos para Coleta de Materiais Biológicos e Análises Bioquímicas

Observa-se na Figura 5 mostra o esquema geral dos procedimentos para coleta de

materiais biológicos e análises bioquímicas. As amostras de sangue foram coletadas por

punção de uma veia do antebraço sem uso de torniquete. As amostras de zinco foram

armazenadas a 37oC, em uma estufa para metais, durante 2 horas. Em seguida, foram

centrifugadas a 2500 rpm (rotações por minuto), por 6 minutos, a fim de se obter soro. As

amostras hemolisadas foram descartadas, uma vez que os eritrócitos são ricos em zinco 48

. As

amostras de soro foram armazenadas a 20 ºC negativos, para posterior mensuração.

Para a análise de zinco, foram coletados 500 µL de soro com ponteiras de plástico livres

de metais e transferidos para tubos de vidro livres de metais contendo 2000 µL de água ultra

pura (Milli-Q Plus, Millipore, Massachusetts, USA). Para as análises de zinco foi considerada

diluição de 1:4. Posteriormente, as amostras foram congeladas e estocadas a 80 ºC negativos

(Ultralow Freezer, Nuaire, Minnesota, USA), para posterior análise.

O zinco sérico foi mensurado por espectrofotometria de absorção atômica (SpectrAA-

200FS, Varian, Victoria, Australia). O comprimento de onda foi de 213,9 nm, a corrente da

lâmpada 10 mA, e os outros procedimentos como calibração e medições foram realizados em

conformidade com as instruções do fabricante.

O aparelho foi previamente calibrado, após estabelecimento de uma curva de

linearidade (r²>0,999), a partir de concentrações crescentes (0–1,0 mg/L em ppm) solução-

padrão versus absorbância. A solução-padrão de zinco (1000 mg/mL) foi obtida por diluição

de TitrisolZinc Standard (Merck, Darmstadt, Germany) em água ultra pura. A sensibilidade

34

foi de 0,01 μg/mL, o coeficiente de variação intra-ensaio foi de 2,2%, e os valores de

referência foram 0.7 – 1.2 μg/Dl 49

. A creatinina sérica e foi determinada, usando métodos

padrão de laboratório clínico e as análises realizadas por meio do analisador semiautomático

RA-50 (Bayer Diagnostics, Dublin, Ireland). Todos os procedimentos relacionados com a

manipulação de amostras de zinco foram realizados de acordo com normas internacionais 50

.

Os hormônios GH, IGF1, IGFBP3 e OCN foram mensurados pelo método

quimioluminescência, utilizando os kits do Immulite (IMMULITE ® 1000 Immunoassay

System; Siemens, Washington,USA).

As análises hematológicas foram mensuradas mediante métodos laboratoriais (Horiba

ABX Diagnostics, Micros 60, Montpellier, France), através do aparelho ABX Micro 60 semi

automatizado. As análises bioquímicas de ALP, TRAP e PT foram mensuradas pelo método

colorimetria (DadeBehring Dimension AR, Illinois, USA).

35

Figura 5: Esquema dos procedimentos biológicos e análises bioquímicas.

4.10. Tratamento Estatístico

Para analisar a normalidade dos dados foram utilizados os testes de D’Agostino &

Pearson. Foi utilizado o teste t de Student para amostras pareadas e não pareadas. Para

complementar, testes não paramétricos foram utilizados como: Mann-Whitney (amostras

pareadas) e Wilcoxon (amostras não pareadas). Correlação foi usada para mensurar duas

variáveis em cada sujeito mediante os coeficientes de correlação de Pearson (paramétrico) e

Spearman (não paramétrico). Foi utilizado o Graph Pad Prism versão 6.0 (Graph Pad

Software. Inc., San Diego, USA), e como nível de significância o p < 0,05.

36

5. ARTIGO PRODUZIDO

Título:

Effect of zinc supplementation on GH, IGF1, IGFBP3, OCN, and ALP in non-zinc-deficient

children

Autores:

Érika Dantas de Medeiros Rocha, MSc, Naira Josele Neves de Brito, PhD, Márcia Marília

Dantas, MSc, Alfredo Silva, MSc, Maria das Graças Almeida, PhD, and José Brandão-Neto,

PhD.

Aceite:

Journal of the American College of Nutrition

Fator de Impacto: 2,97

Qualis B1 para Área de Medicina II

JOURNAL OF THE AMERICAN COLLEGE OF NUTRITION

COMMENTS RECEIVED

05-Apr-2014

Dear Dr Brandão-Neto:

Your manuscript entitled "Effect of zinc supplementation on GH, IGF1, IGFBP3, OCN and

37

ALP in non-zinc-deficient children", which you submitted to Journal of the American College

of Nutrition, has been reviewed. The reviewer comments are included at the bottom of this

letter.

The reviews are in general favourable and suggest that, subject to minor revisions, your paper

could be suitable for publication. Please consider these suggestions, and I look for ward

toreceiving your revision.

When you revise your manuscript please high light the changes you make in the manuscript

by using the track changes mode in MS Word or by using bold or coloured text.

To start the revision, please click on the link below:

http://mc.manuscriptcentral.com/jacn?URL_MASK=77dbd54e0aea45b19a30e0d1b2d11104

This will direct you to the first page of your revised manuscript. Please enter your responses

to the comments made by the reviewer(s) in the space provided. You can use this space to

document any changes you made to the original manuscript. Please be as specific as possible

in your response to the reviewer(s).

This link will remain active until you have submitted your revised manuscript. If you begin a

revision and intend to finish it at a later time, please note that your draft will appear in the

“Revised Manuscripts in Draft” queue in your Author Center.

IMPORTANT: Your original files are available to you when you upload your revised

38

manuscript. Please delete any redundant files before completing the submission.

Because we are trying to facilitate timely publication of manuscripts submitted to Journal of

the American College of Nutrition, your revised manuscript should be uploaded by 05-May-

2014. If it is not possible for you to submit your revision by this date, we may have to

consider your paper as a new submission.

Once again, thank you for submitting your manuscript to Journal of the American College of

Nutrition and I look for ward to receiving your revision.

Sincerely,

Dr Zapatero

Associate Editor, Journal of the American College of Nutrition

[email protected]

Reviewer(s)' Comments to Author:

Reviewer: 1

Comments to the Author

"Effect of zinc supplementation on GH, IGF1, IGFBP3, OCN and ALP in non-zinc-deficient

children" for Journal of the American College of Nutrition. This study was do net investigate

the effects of this micronutrient on the secretion of growth hormone (GH), insulin-like

growth factor 1 (IGF1), insulin-like growth factor binding protein 3 (IGFBP3), osteocalcin

(OCN), and alkaline phosphatase (ALP) in healthy and eutrophic children. The authors

39

concluded that Zn supplementation improved thein take of some macronutrients and basal

serum zinc and plasma alkaline phosphatase levels. Zn administration increased hormone sof

the GH-IGF1 system. The study was nicely done and well conducted. Some comments are

written below:

Comments:

MATERIALS AND METHODS: The study design is OK, and all procedures are nicely

described. The study has some limitations. Nevertheless, the few limitations do not

compromise the results and conclusions.

FIGURES AND TABLES: The figures and tables are of good quality and the legends

correctly describe their findings.

DISCUSSION: The discussion is good, and the authors compare their findings with data from

studies in the literature.

REFERENCES: References are correctly cited by bracketed character of the corresponding

number. “The list at the end of the paper needs revision”. Please, see and follow the

instructions for authors.

CONCLUDING: I think that the study is relevant and important for clinicians who study

nutrition in children. The English language should be revised. Ex: “Some problems were

detected in the English language pages 15 (line 26, 46, 55)”, “page 16 (line 19, 48, 49)”,

“page 20 (line 10, 23 41, 48)”, etc. The authors must be congratulated for this well-conducted

40

study. The Reviewer assessments should be viewed as a constructive criticism and a

contribution to the improvement of the paper, so that the J Am Coll Nutr can maintain its

recognized quality.

Reviewer: 2

Comments to the Author

“High light the unprecedented aspect of your research in the title, abstract, and text”.

Abstract

“High light the unprecedented aspect in the objective” described in the abstract. Results:

“replace the term “increased energy values” by “stimulated increase in consumption”.

Conclusion: “replace “improved intake” by “stimulated increase in consumption” ... and “add

the word “improved” before basal phosphatase levels.

Introduction

“High light in the last sentence whether this study is unprecedented” or not.

Material and Method

In the item relating to intra venous Zinc administration, specify that “this administration was

performed in all children in the experimental group”.

Results

In results related to the intake of macro and micro nutrients, “calculate the apparent adequacy

of zinc, iron and calcium”.

77

6. COMENTÁRIOS, CRÍTICAS E CONSIDERAÇÕES FINAIS

A metodologia para a realização deste estudo foi planejada durante o período do

mestrado (2004 a 2008), quando na época foi desenvolvido o trabalho de doutorado da pós-

graduanda Lúcia Dantas Leite, sob a orientação do Professor Dr. José Brandão Neto,

intitulado “Sensibilidade da cinética do zinco e avaliação nutricional em crianças submetidas

ao teste venoso de tolerância ao zinco”. E nessa oportunidade, participei como colaboradora.

O motivo pelo qual nos levou a desenvolvê-lo foi que os resultados preliminares da

pesquisa supracitada mostraram-se instigantes, pois revelava que o zinco aumentava os

valores plasmáticos de GH, IGF1 e IGFBP3 com a dose oral de 5 mg Zn/dia. Esse trabalho

preliminar foi publicado no Journal of Pediatric Endocrinology and Metabolism (Alves CX,

Vale SHL, Dantas MMG, Maia AA, Franca MC, Marchini JS, Leite LD, Brandao-Neto J:

Positive effects of zinc supplementation on growth, GH, IGF1, and IGFBP3 in eutrophic

children. Journal of Pediatric Endocrinology and Metabology 25: 881 - 887, 2012.) e foi

assunto de dissertação da aluna Camila Xavier Alves. Portanto, visando aprimorar e

aprofundar tais resultados e desvendar os desafios da temática relacionada com “zinco e

crescimento infantil” foi traçado um novo desenho metodológico.

O modelo metodológico do presente estudo contou com a participação multidisciplinar

de farmacêuticos, médico, nutricionistas e estatístico, e foi aplicado para avaliar o efeito da

suplementação oral de zinco sobre a secreção hormonal de GH, IGF1, IGFBP3, OCN e ainda

da ALP.

Houve a incessante preocupação com o rigor metodológico durante o desenvolvimento

do estudo, o qual foi cuidadosamente delineado com a finalidade de precisão, fidedignidade e

reprodutibilidade. Podemos considerar que os objetivos propostos foram contemplados e sua

78

realização foi satisfatória, juntamente com a equipe multidisciplinar. Além disso, o que estava

proposto no projeto inicial foi executado com devidos ajustes, os quais contribuíram para a

melhoria do presente estudo, dentro das circunstâncias vivenciadas.

A análise estatística foi cuidadosamente realizada, mediante escolha adequada dos testes

e orientação de um profissional qualificado. Mostrou-se relevante, em nosso estudo, pois

assegurou, mediante significância, as conclusões geradas. Portanto, os resultados obtidos

proporcionaram novas informações para compreender a complexa relação existente entre

zinco e crescimento infantil, certamente essenciais para a comunidade científica.

Ao longo do estudo, observamos que não é fácil trabalhar com pesquisas envolvendo

seres humanos, especialmente crianças, por se tratar de um estudo prospectivo de intervenção,

que requer testes dinâmicos e coletas sucessivas de materiais biológicos, além de jejum muito

prolongado. No entanto, tivemos boa adesão por parte das crianças e seus respectivos

responsáveis, além do prestimoso apoio e receptividade dos diretores e professores das

escolas participantes.

Almejando uma publicação em um periódico internacional de impacto, o manuscrito

oriundo deste estudo foi submetido ao American Journal Experts (USA) para revisão do

inglês. A futura publicação contribuirá, notoriamente, com novos conhecimentos. Por sua

originalidade, acreditamos na nossa colaboração intelectual à pesquisa e, principalmente, aos

investigadores de temas semelhantes ou relacionados.

Em relação à prática docente, a pós-graduação stricto senso me permitiu atuar, entre

2010 e 2012, como docente no Curso de Nutrição da Universidade Potiguar, possibilitando

agregar melhor entendimento da vida acadêmica, participar de orientações e bancas de defesa

de trabalhos de conclusão de curso (TCC), e contribuir com o desenvolvimento de projetos de

especialização do tipo lacto senso em Nutrição Clínica.

Atualmente, resido em Joinville/SC, cidade na qual atuo como docente do Curso de

79

Nutrição de uma instituição de ensino superior denominada Associação Educacional Luterana

Bom Jesus/IELUSC, desde janeiro de 2013, desenvolvendo atividades relacionadas com

ensino, pesquisa e extensão. Dentre as atividades, participo como membro da Comissão

Própria de Avaliação, representando os docentes da área da saúde, analisando as avaliações

institucionais realizadas por discentes e docentes e membro do Comitê de Ética em Pesquisa

envolvendo Seres Humanos contribuindo com a relatoria de projetos de pesquisa de discentes

e docentes da própria instituição e de outras instituições de ensino superior da região.

Coordeno as ações integradas do NENUT (Núcleo de Estudos, Pesquisa e Extensão em

Nutrição). Além das aulas para a graduação do Curso de Nutrição, ministro também aulas

para residência multiprofissional e residência médica do Hospital Municipal São José e

Maternidade Darcy Vargas, ambos são hospital escola, com os módulos de metodologia da

pesquisa científica, bioestatística e epidemiologia.

Durante a trajetória da pós-graduação, alguns artigos foram submetidos e/ou

publicados em periódicos de circulação internacional, tais como:

Leite LD, Rocha ÉDM, Almeida MG, Rezende AA, da Silva CA, França MC,

Marchini JS, Brandão-Neto J: Sensitivity of zinc kinetics and nutritional assessment of

children submitted to venous zinc tolerance test. J Am Coll Nutr 28:405-412, 2009.

Santos MGN, Baracho MFP, Vale SHL, Leite LD, Rocha ÉDM, Brito NJN, França

MC, Almeida MG, Chiquetti SC, Marchini JS, Brandão-Neto, José. Kinetics of zinc

status and zinc deficiency in Berardinelli-Seip syndrome. Journal of Trace Elements in

Medicine and Biology, v. 26, p. 7-12, 2012. (Apêndice 1).

Rocha ÉDM, Brito NJN, Alves CX, Almeida MG, Brandão-Neto J. Zinc regulation of

GH, IGF1, IGFBP3, and OCN in healthy and eutrophic children. Submitted to

Nutrition and Metabolism (USA).

Brito NJN, Rocha ÉDM, Silva AA, Costa JBS, Marchini JS, França MC, Almeida MG,

80

Brandão-Neto J. Oral zinc supplementation can decrease the serum iron profile of

healthy schoolchildren. Submitted to Biological Trace Element Research (USA).

Dantas MMG, Rocha EDM, Alves CX, Brandão-Neto J. Bioelectrical impedance

vector as a method to evaluate zinc supplementation in prepubertal children.

Submitted to Clinical Nutrition (USA).

A conclusão do Doutorado representará para mim uma conquista vitoriosa. Entretanto,

não estagna a necessidade e o desejo que sinto de abarcar novos projetos, como o pós-

doutorado como meta futura que pretendo ainda alcançar. Além disso, a capacitação adquirida

durante o período de mestrado e doutorado (2004 a 2013) e o ganho intelectual, traduzem-se

num preparo mais seguro para o seguimento da carreira acadêmica.

81

7. REFERÊNCIAS

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87

APÊNDICE 1

Journal of

the American College of Nutrition, Vol. 28, No. 4, 405–412 (2009)Published by the American College of Nutrition

88

APÊNDICE 2

89

APÊNDICE 3

Figura 1: zinco sérico (A); área sob a curva de zinco (B) e zinco ingerido e suplementado (C)

nos grupos controle e experimental. Valores expressados em média ± erro padrão da média. P

nível de significância de 5%.

90

APÊNDICE 4

Figura 2: concentrações plasmáticas de GH (A), IGF1 (B), IGFBP3 (C) e OCN (D) nos

grupos controle e experimental durante a administração intravenosa com o elemento zinco.

Valores expressados em média ± erro padrão da média. P nível de significância de 5%.

91

APÊNDICE 5

Figura 3: área sob a curva de zinco e IMC (A), GH (B), IGF1 (C), IGFBP3 (D), OCN (E) e

IGF1 versus IGFBP3 (F) no grupo experimental após a suplementação oral com o elemento

zinco. Valores expressados como coeficientes de determinação (R2). P nível de significância

de 5%.

92

APÊNDICE 6

Tabela 1: valores de ingestão de energia e nutrientes antes e após a suplementação oral com o

elemento zinco nos grupos controle e experimental, comparada com as recomendações

segundo gênero e idade. Valores expressados em média ± erro padrão da média. P nível de

significância de 5%.

93

APÊNDICE 7

Tabela 2: Valores de peso corporal, estatura e IMC obtidos antes e após a suplementação oral

com o elemento zinco nos grupos controle e experimental. Valores expressados em média ±

erro padrão da média. P nível de significância de 5%.

94

ANEXO 1

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