117 - Documentos de Identificação - Documentos de Identificação 6
IDENTIFICação de biomoleculas
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IDENTIFICAÇÃO DE SUBSTÂNCIAS ORGÂNICAS
1) IDENTIFICAÇÃO DE PROTEÍNAS: Na reação do biureto, a adição do hidróxido de potássio (KOH) que é uma base, vai desnaturar as proteínas. Com a adição do sulfato de cobre formam-se flocos azuis de hidróxido de cobre (CuOH). Deixando repousar os flocos o líquido fica com uma cor violeta devido à fixação do cobre sobre as ligações peptídicas, o que é muito característico desta reação
2) IDENTIFICAÇÃO DE LIPIDIOS:Na identificação dos lipídios utiliza-se o corante sudão III. Trata-se de uma solução de natureza apolar que tem afinidade para os lipídeos que têm cabeças polares. Os lipídios em contacto com o sudão ficam retidos na sua estrutura e a cor vermelha persiste. Ainda se pode utilizar como identificador de lipídios o papel porque este deixa uma mancha translúcida persistente que é muito característica
3) IDENTIFICAÇÃO DE CARBOIDRATOS:A identificação do amido é feita com o soluto de lugol (iodo). Na presença do amido forma-se um complexo de cor azul intenso devido às moléculas de iodo se incorporar no interior das hélices do amido. O amido não tem capacidade redutora porque os grupos funcionais responsáveis pela redução (grupo aldeído e grupo cetona) estão envolvidos na ligação glicosídica. A identificação da glicose é feita com o indicador licor de Fehling (licores de Fehling nº1 e nº2), em que a glicose, devido ao seu caráter redutor, capta elétrons do licor de Fehling, formando-se o íon cobre 1 que dá a característica cor de tijolo, depois do aquecimento.
T12 Teste de Fehling ou Benedict - Os reagentes de Fehling e de Benedict são usados na caracterização de grupos aldeídos, especialmente em carboidratos (açúcares redutores). Os reagentes contêm o íon cúprico complexado (azul) em meio básico com o ion tartarato (Fehling) ou citrato (Benedict). Aldeídos reagem com o cobre II complexado produzindo um carboxilato e precipitando o cobre como Cu2O (cobre I), de cor marrom-avermelhada. O reagente de Fehling é usado como um teste qualitativo para a deteção de glicose na urina, uma indicação de diabetes ou disfunção renal.
Procedimento: Em tubo de ensaio misturar 1 mL de solução de sulfato de cobre (solução A) com 1 mL de solução de tartarato de sódio e potássio (solução B para o teste de Fehling) ou de citrato de sódio (solução C para Benedict). Adicionar 2 a 3 gotas (ou cerca de 0,05 g se sólido) da amostra a ser examinada e aquecer a mistura à ebulição. A formação de um precipitado vermelho de óxido cuproso é um resultado positivo.
Reagentes: Solução A. Sulfato de cobre (CuSO4.5H2O) a 1,7% (Benedict) ou a 7% (Fehling) em água. Solução B. Tartarato de sódio e potássio (sal de Rochelle) a 34,6% em solução aquosa de NaOH a 10%. Solução C. Citrato de sódio a 17,3% em solução aquosa de carbonato de sódio a 10%.