7/23/2019 extrao da caseina

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EXPERIMENTO N. 1: Extrao da casena

Reagentes:

Leitecido actico 2 M

Etanolter etlico

Tcnica:

1. aquecer 150 mL de gua destilada a 38 oC;2. adicionar 50 mL de leite e misturar bem;3. adicionar a esta soluo, gota a gota, a soluo de cido actico, at o

aparecimento de um precipitado abundante (gasta-se aproximadamente0,7 mL do cido);

4. deixar sedimentar durante 20 minutos e decantar o sobrenadante;5. adicionar ao precipitado 20 mL de etanol e misturar bem;6. filtrar ou centrifugar a 3.000 rpm por 10 minutos e desprezar o filtrado, ou o

sobrenadante;7. adicionar ao precipitado 5 mL de ter etlico e misturar por agitao;8. decantar o sobrenadante e secar o precipitado (casena) em papel filtro.

EXPERIMENTO N. 2: Preparao de uma soluo de casena

Reagentes:

CasenaHidrxido de sdio 1 Mcido actico 1 M

Tcnica:

1. colocar, em um frasco de Erlenmeyer, aproximadamente 1 grama dacasena obtida no experimento anterior;

2. adicionar 50 mL de gua destilada e ressuspender a casena;3. adicionar 25 mL da soluo de hidrxido de sdio e agitar lentamente (para

evitar a formao de espuma) at a completa dissoluo da casena;4. adicionar 25 mL da soluo de cido actico e agitar lentamente;5. ajustar o pH para valores em torno da neutralidade (com o cido ou com a

base).

EXPERIMENTO N. 3: Determinao do ponto isoeltrico da casena

Reagentes:

Soluo de casenacido actico 2 Mcido actico 1 Mcido actico 0,1 Mcido actico 0,01 M

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Tcnica:

1. numerar 9 tubos de ensaio e distribuir os reagentes, conforme indicado:

Tubos

Reagentes (mL)

1 2 3 4 5 6 7 8 9

H2O destilada 4,0 4,4 4,3 3,7 3,5 2,5 0,5 2,0 1,2c. actico 0,01 M 0,5 - - - - - - - -c. actico 0,1 M - 0,1 0,2 0,8 - - - - -c. actico 1 M - - - - 1,0 2,0 3,0 - -c. actico 2 M - - - - - - - 2,7 3,5

2. adicionar, em cada tubo, 0,5 mL da soluo de casena preparada noexerccio anterior e agitar lentamente, sem fazer espuma;

3. imediatamente aps a agitao verificar a turbidez e anotar, no quadrode resultados, conforme a conveno indicada abaixo;

4. medir o pH em todos os tubos, com papel indicador cuja sensibilidadeseja em dcimos de unidade, ou com pHmetro porttil, anotando osresultados no quadro respectivo;

5. discutir os resultados observados.

Quadro de ResultadosTubos 1 2 3 4 5 6 7 8 9

pHTurbidez

Conveno:

Intensidade crescenteTurbidez 0, x, xx, xxx, xxxx

QUESTIONRIO

1. Qual a propriedade da protena que permite identificar o seu ponto isoeltrico. Justifique aresposta.

2. Descreva a evoluo da turbidez, em funo do tempo, no tubo identificado como o doponto isoeltrico.

3. A casena a principal protena do leite, constituindo aproximadamente 1/3 da protenatotal no leite humano. Considerando que o pH deste leite de aproximadamente 6,6 e combase no experimento desta aula, responda aos seguintes tens:

a) a casena solvel ou est precipitada no leite humano ?b) o que aconteceria se ns acidificssemos o leite at um valor de pH que coincida

com o pI da casena ?4. Embora seja proibido e torne o leite imprprio para o consumo humano, alguns produtores

inescrupulosos adicionam soda custica ao leite de vaca para evitar que ele coalhe. Estaadio feita empiricamente mas voc pode explicar o fenmeno? Descreva-o.