EXAME DE MICROBIOLOGIA

(1ª época; 26/06/08; duração máxima: 2 horas)

Parte I 1 - Para cada pergunta escolha a resposta correcta (0,2 valores / cada resposta correcta; desconta 0,1 valores se a resposta estiver errada) (i) Um microrganismo com estrutura celular do tipo procariota, sem peptidoglicano na parede celular e composição lipídica da membrana plasmática única, pertencerá provavelmente ao domínio: A) Bacteria B) Archaea C) Eukarya D) Protista (ii) O microscópio electrónico de transmissão é adequado para a visualização de: A) estrutura interna de células fixadas B) estrutura interna de células vivas e móveis C) estrutura superficial de células fixadas D) membranas superficiais de células vivas e móveis (iii) Exoenzimas contidas no espaço periplásmico estão presentes: A) somente em procariotas B) somente em microrganismos eucariotas C) em ambos, microrganismos eucariotas e procariotas (iv) Em eucariotas, os poros nucleares são passagens entre o interior do núcleo e o citoplasma que: A) permitem que o DNA chegue ao citoplasma para ser transcrito em RNA B) permitem a entrada dos ribossomas na matriz nuclear C) permitem que proteínas sintetizadas no citoplasma entrem no núcleo D) reforçam estruturalmente a membrane do núcleo (v) A membrana plasmática em procariotas tem como função: A) permitir a passagem selectiva de moléculas para o seu interior B) permitir ao organismo sentir o que se passa no seu ambiente extracelular C) ser o local de geração de energia D) todos os anteriores (vi) Qual dos seguintes processos biológicos envolve o transporte de solutos contra o gradiente de concentração transmembranar? A) difusão passiva B) difusão facilitada C) transporte activo D) endocitose

(vii) O termo anaeróbio facultativo refere-se a um organismo que: A) não usa oxigénio mas tolera-o B) é morto pelo oxigénio C) usa o oxigénio quando está presente ou usa outro aceitador final de electrões (por exemplo, nitrato) quando o oxigénio está ausente D) requer menos oxigénio do que o que está presente no ar (viii) Se estiver a preparar uma experiência que envolve o crescimento de um microrganismo quimiolitoautotrófico, qual das seguintes condições será essencial para manter o crescimento do organismo? A) um meio nutriente contendo glucose B) a adição de vitaminas ao meio de cultura C) a adição de agar ao meio de cultura D) a adição de um composto orgânico reduzido, como por exemplo NH4+, ao meio de cultura 2- Descreva resumidamente (3 linhas, no máximo) o significado dos seguintes termos no contexto da Microbiologia (0,7 valores cada alínea): a) Cultura pura b) Metabolito primário c) Coliforme d) Esporo e) Temperatura mínima de crescimento g) Biofilme h) Microscópio de fluorescência 3 – Após inoculação de um meio de cultura contendo uma concentração saturante de lactose como única fonte de C e energia, foi acompanhado o crescimento em descontínuo de uma estirpe da bactéria Escherichia coli, a 37ºC. Na Tabela 1 encontram-se os valores da Densidade Óptica (determinada a 640 nm) da cultura ao longo do tempo. Tabela 1 . Evolução da Densidade Óptica em função do tempo de uma cultura em descontínuo de uma população de células da estirpe Escherichia coli DH1, a 37ºC.

Tempo (h) DO (640 nm) 0 0,32

0,5 0,33 1,0 0,32 2,0 0,34 4,0 0,8 6,0 3,1 10 5,3 20 5,4

a) Sabendo que a suspensão de células usada como inóculo foi crescida em meio de cultura contendo glucose, indique uma razão plausível para a duração prolongada da fase de latência. (0,5 valores) b) Calcule a taxa específica de crescimento e o tempo de duplicação da cultura. Justifique adequadamente a sua resposta. (0,75 valores)

c) Explique porque razão os dados fornecidos não lhe permitem identificar o tempo após o qual a cultura entrou na fase de morte. (0,5 valores) d) Considere que está a efectuar uma cultura contínua em quimiostato de uma outra estirpe bacteriana, para a qual se determinou um μmáx de 0,2 h-1 em meio de cultura com lactose (fonte de C), a 37ºC. Caso a cultura contínua fosse contaminada com células da estirpe A, diga, sem efectuar mais cálculos, se seria possível eliminar essa contaminação do quimiostato. Justifique convenientemente a sua resposta. (0,75 valores) 4 - Suponha que pretendia testar a eficácia de um composto químico novo que poderá vir a ser usado como desinfectante e que para o fazer dispunha de uma cultura em fase exponencial de crescimento de uma bactéria teste. Indique, e fundamente adequadamente, como poderia, no laboratório, determinar se esse composto tem acção bacteriostática ou bactericida em relação à bactéria teste em causa. (1 valor)

Parte II 5-a) Compare, quanto à estrutura e composição, a parede de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. (1,6 valores) b) Dê dois exemplos de espécies Gram-positivas e dois de Gram-negativas. (0,25 valores) c) Em que difere, relativamente à estrutura e composição da parede, o género Mycoplasma das outras bactérias? (0,5 valores) 6-a) Defina o conceito de auxotrofia. (0,25 valores) b) Descreva uma metodologia experimental de mutagénese clássica que lhe permita obter um mutante auxotrófico para triptofano e biotina. (1,5 valores) 7- Ilustre com um diagrama, o ciclo de um fago temperado (lisogénico), tal como o fago Lambda que infecta Escherichia coli. (1,5 valores) 8- Faça uma descrição sobre a morfologia, habitat e principais características fisiológicas dos seguintes microrganismos: (0,5 valores cada) a)Halobacterium salinarum b)Pseudomonas aeruginosa c)Saccharomyces cerevisiae d)Bacillus subtilis e)Streptomyces griseus f)Sinorhizobium meliloti 9- Para cada pergunta escolha a resposta correcta (0,2 valores / cada resposta correcta; desconta 0,1 valores se a resposta estiver errada) (i)- O que se compara durante estudos de hibridação DNA-DNA entre bactérias? A) a velocidade de replicação do DNA

B) o mecanismo de síntese de RNA a partir de DNA C) a percentagem de bases nitrogenadas face às bases totais D) a semelhança ao nível da sequência de bases do DNA E) a natureza do rRNA 16S (ii)- O fungos: A) são células procarióticas B) têm parede celular com peptidoglicano C) excretam enzimas que decompõem a matéria orgânica D) reproduzem-se somente por fissão binária (iii)- Nutricionalmente, os fungos são: A) fotoautotróficos B) quimioautotróficos C) quimioheterotróficos com absorção de nutrientes D) quimioheterotróficos com ingestão de nutrientes E) anaeróbios obrigatórios (iv)- Mutações que só se expressam em determinadas condições são denominadas: A) mutações condicionais B) mutações “missense” C) mutações “nonsense” D) mutações por “frameshift” E) nenhuma das anteriores (v)- A forma infecciosa de Chlamydia é denominada: A) corpo elementar B) corpo reticulado C) corpo contagioso D) heterocisto (vi)- Qual dos seguintes géneros produz antibióticos úteis do ponto de vista médico? A) Clostridium B) Leuconostoc C) Bacillus D) Streptococcus E) todos os anteriores (vii)- Helicobacter pylori é responsável por: A) gastroenterite B) cólera C) disenteria D) úlceras gástricas