Estudo Dirigido Para o Primeiro Bloco Do Curso-1
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8/18/2019 Estudo Dirigido Para o Primeiro Bloco Do Curso-1
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Estudo Dirigido para o
Primeiro Bloco do Curso
Ao fnal desse bloco, esperamos que vocês se
concentrem nos seguintes tópicos:
1) Saber identifcar os dierentes açúcares, bases
nitrogenadas que compõem os ácidos nucleicos;2) Saber identifcar as ligações químicas nos nucleotídeos;) !escre"er as principais características da orma # do
!$%;&) !ierenciar d$'( de $'(;) (rincípios dos testes de paternidade;*) +plicar o eperimento de -eselson.Sta/l0) +plicar a bioquímica da ormaço da ligaço
osodister;3) +plicar a descontinuidade da síntese de !$%;4) !escre"er as ati"idades da !$% (olimerase 5 de E.
coli;16)Saber a unço das en7imas en"ol"idas na replicaço
do !$%;11) 5mport8ncia da metilaço na replicaço e reparo;12)+plicar a adiço de sequ9ncias nos tel:meros;1)!escre"er os mecanismos de reparo;
1&)!esen/ar primers e calcular o 'm dos mesmos parauma reaço de (
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Lig. Glicosídica.2. tem um ?@ em caso de ribose, e um @ em caso de
!esoirribose. tem um ?@ se representa o etremo A ou ele se esterifca
com o osato do nucleotídeo subBacente ormando parte do
enlace fosfodiéster >&. . unio ao osato>
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2)
$o !$% eistem ligaçõesCDma delas so as pontes de hidrogênios entre as bases
nitrogenadas =Eigações can:nicas) as quais se encontram no
centro do !$%> SF lembrando que, para que seBa possí"el a lig>!e pontes de /idrog9nios, eles precisam uma dist8ncia
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adequada e que os átomos que participam dessa ligaço de"em
ser mais eletronegati"os do que o =carbono), G?$>A liga!o glicos"dica que eiste entre os açúcares e as bases
nitrogenadas, uma ligaço co"alente entre o 1 da pentose
=açúcar) e o $1 doas pirimidinas ou $3 no caso das purinas>% outra ligaço eistente no !$% so os enlaces #os$odi%ster,
esse enlace se dá entre os açúcares dos nucleotídeos que se
encontram em direço eterna H molcula> +ssa cadeia de
ligações, Bunto com o eeito /idroFbico e o empil/amento das
bases =orças de I%$ !+< J%EES), conerem estabilidade H
cadeia de !$%
) ? que dierencia estes tr9s tipos de !$% =%, # e K) a sua
espessura, o número de pares de base por "olta da /lice e a
eposiço das bases nitrogenadas ao meio eterno>? !$% tipo # o fsiolFgico e o maBoritariamente encontrado na
clula, ele apresenta a orma de /lice dupla clássica, descritapor Jatson e ricL%lgumas características soC. % /lice dupla gira para a direita e a rotaço entre os dois
pares de bases adBacentes de &,*M>. Dma "olta da /lice percorre uma dist8ncia de &,'( nm )&'
A*+, que o passo da /lice> ada par de bases adiciona H
/lice uma dist8ncia de (,&' nm +nto se a dist8ncia entre
cada par de bases de &,' A* !essa orma, a /lice dupla
pera7 uma "olta completa a cada -(,' pb>
. ? di8metro da /lice dupla de .,&/ nm). A*+
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. ?bsC Se o !$% tipo # em soluço or desidratado, por eemplo,
em 0N de etanol, ou se o conteúdo de sal or diminuído, a
molcula, que fna e comprida, se encurtará e engrossará
gerando o !$% tipo %. 'anto no D0A tipo B quanto no tipo %, a desoirribose e a
base nitrogenada esto em lados opostos da ligaço glicosídica,
ou seBa, na conormaço anti
?#SC a "e7es que na precensa de altas concentrações de
cátions, alguns nucleotídeos assumam a conormaço 12n,
fcando o açúcar e a base do mesmo lado
&)
)*) ? eperimento de -eselso e St/al, se baseia na replicaço do
!$% que utili7a o $itrog9nio nas bases nitrogenada dos
nucleotídeos> (ara pode determinar e dierencias o !$% se
utili7o o isFtopo $1 que a dierença do $1&, mais pesado>(ara ter o !$% /ibrido com $1, oram utili7adas bactrias em
culti"o de $1> %pFs de um determinado tempo, as mesmas
bactrias oram le"adas a outro culti"o com o isFtopo mais
le"e, $1&>(osteriormente H transer9ncia e em di"ersos momentos, oram
recol/idas amostras de !$%>? !$% etraído oi colocado numa soluço de loreto de sio,
apFs da colocaço, oi eita a centriugaço das soluções>
Ouando o cloreto de sio se centriuga a uma alta "elocidade,
se estabelece um gradiente de densidade no tubo, ento, as
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molculas de !$% de deslocam no gradiente atingindo o ponto
onde sua densidade equi"alente H densidade do csio>? !$% que contm o $1& oi transladado a uma posiço do
gradiente determinada por sua densidade, Bá o !$% que contm
o isFtopo $1, por ser mais pesado, oi transladado a uma
posiço inerior e mais prounda na soluço> %pFs de uma
geraço no meio $1&, as bactrias sinteti7aram uma fta de
densidade intermedia com os isFtopos $1& e $1> ? que
indicou que o !$% contin/a uma única fta com $1> Pá apFs de
duas gerações no culti"o de $1& oram obtidas duas amostras
de !$%, uma de densidade intermedia, ou seBa, com o $1& e
$1, a outra amostra de !$% apresenta"a uma densidade
baia, contendo o isFtopo $1&, onde nen/uma das ftas
contin/a o $1>
+nto -eselson e St/al concluíram que a replicaço duple do!$%, reali7a a síntese de no"as molculas separando as duas
ftas parentais com unço de molde =templete) para a síntese
de no"a cadeia complementares aos QtempletesR> ?s resultados
le"aram H que a replicaço 1emiconservativa
0) ? enlace Gosodister um enlace que se reali7a por
condensaço, onde por meio da aço en7imática daspolimerases se cli"a o triosato do d$'(, a energia que gera
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essa cli"agem utili7ada para a interaço do osato com o
álcool =?@) do nucleotídeo supraBacente, a esterifcaço desse
álcool gera um enlace co"alente entre o osato do nucleotídeo
subBacente>?#S>C uma molcula de @2? eliminada durante este processo,
e o osato que participa da ligaço Gosodister, o osato
%EG%>
3) % descontinuidade, na replicaço, se reere H síntese da cadeia
discontinua, essa cadeia fca resagada comparada H síntese da
outra cadeia, pois, as (olimerase trabal/am de A.A, e como a
replicaço numa orquil/a eita por uma mesma encima que
trabal/a sobre as 2 ftas de !$%, essa cadeia sinteti7ada em
ragmentos, esses ragmentos recebem o nome de QGragmentos
de ?La7aLiR, a síntese desses ragmentos unço da !$%(olimerase 5>
4) !$% (olimerase 5 possui ati"idades en7imáticas na replicaço
de !$%>Dma delas a de polimeri7aço, de A a A importante na
replicaço da fta descontinua na replicaço do !$%, os
ragmentos de oLa7aLi>% ati"idade +o> A a A utili7ado na Qleitura e correçoR,
unço cla"e na manutenço da preciso na replicaço do !$%+ a outra ati"idade dela a de +o> A.A que utili7ada durante
a replicaço do !$%, ele tem a unço de remo"er o segmentode +sta
unço reali7ada em conBunto com a ati"idade polimerase que
possui este polipeptideo>16)
3elicaseC %bre a orquil/a de replicaço
1ub unidade BetaC11B )single strand binding+ C elas e"itam que aquela regio
sora torções, indu7indo uma conormaço do !$% ideal para a
replicaço e o pareamento de bases, alm de protegerem as
ftas simples da degradaço por nucleases>
11) % import8ncia da metilaço na replicaço do !$% estásuBeita H regulaço dessa replicaço, ou seBa, e"ita que a
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replicaço do !$% aconteça espont8nea e descontroladamente
apFs de uma replicaço Bá eita>%pFs de uma replicaço do !$% /á um lapso de tempo em que
a fta complementar sinteti7ada =no"a) no sore metilaço,
ento, sF uma das duas ftas do !$% fca metilada =a parental),
ento se ala de um !$% /imimetilado>$esse conteto entra a import8ncia da proteína Seq% que
recon/ece o sitio ?ri do !$% @emimetilado o que e"ita a aço
da !am.metilase =metila a % nas sequ9ncias %' da fta no"a
de !$%) o que pro"oca a regulaço negati"a do circuito de
ati"aço do !$% =Sequestro de ?ri)> Pá apFs da metilaço a Seq% retirado do !$%, e o !na% pode
recon/ecer o sitio ?ri, do !$%, totalmente metilado e começar
uma no"a replicaço>
% metilaço no reparo do !$% este suBeita ao recon/ecimento
da fta a ser reparado, ou seBa, os di"ersos mecanismos,
ecetos aqueles que cli"am a dupla fta do !$%, recon/ecem a
fta no"a =fl/a) pelo ato dela no sorer metilaço em
comparaço H fta parental que sim, em eeito, esta metilada>12) omo a replicaço do !$% no precisa especifcamente
começar na última base do !$%, e apFs di"ersas replicações as
cadeias de !$% fcariam cada "e7 mais curtas>+m resposta e esta necessidade aparece a telomerase, uma
!$% polimerase que, a dierença das outras, no precisa umetremo A?@ para reali7ar sua ati"idade !$% polimerase>+nto sua unço recon/ecer um sitio especifco, no Ada fta
no acurtada, onde começa a adicionar, H mesma fta mais
longa, nucleotídeos que ser"em como templete para a adiço
de no"os ragmentos de oLa7aLi1) .
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4 5evers!o direta de les!o:
Gotorreati"aço en7imáticaC
Separaço en7imática de bases alquiladasC
. 5epara!o por e6cis!o
(or +ciso de baseC
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(or +ciso de nucleotídeosC
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.1istema de repara!o pós4replica!o:Sistema de reparaço translesoC
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(or recombinaço /omFloga
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1&) 'mT temperatura no qual, o 6N do !$% esta
desnaturado> 'mT &=U) U 2=%U')
1) P/o1*) %sd10) ad