Dicas para pipetagem

Dicas para pipetagemProf. Felipe Francisco Bittencourt JuniorA pipeta um instrumento de preciso confivel e tem sido usada h muitos anos. Contudo, como h vrias formas de manuseio, uma pipeta s ir operar bem se o operador souber us-la.Diferenas nas tcnicas podem alterar o volume aspirado e interferir diretamente nos resultados obtidos.No setor de bioqumica, a pipetagem fator determinante da preciso dos resultados.Por isso, de fundamental importncia a padronizao da pipetagem do operador.Dicas geraisManter a pipeta/amostra em posio vertical no momento da aspirao.Trocar a ponteira quando pipetar reagente/amostra diferente.Pressione/solte o boto de modo calmo e constante, observando a aspirao do lquido.Encaixe a ponteira em movimento rotativo.Finalize o ajuste de volumes (pipetas de volume regulvel) no sentido horrio.Nunca deite a pipeta quando na mesma estiver contido lquido, mantenha-a sempre na vertical.Nunca tente ajustar o volume acima/abaixo do limite da mesma, pois isto pode danificar a mesma.Dicas especficasHomogeneizar a amostra suavemente por inverso, aperte o boto at o primeiro estgio, mergulhe a ponteira no lquido e aspire-o, soltando o boto (cerca de 1 mm para volumes entre 10 e 50 uL, mantenha esta imerso constante em todas as pipetagens).Este procedimento importante para minimizar/eliminar volumes de amostras que ficam no exterior da ponteira quando a mesma ser imersa no reagente de trabalho para o teste.Com isso, torna-se desnecessrio limpar o exterior da mesma com papel toalha, j que o resduo exterior se tornar mnimo/desprezvel.O procedimento de limpar a ponteira, se mal executado, pode absorver um pouco de amostra caso o papel encoste na ponta da ponteira, gerando assim uma inexatido dos resultados.

Sempre verifique se existe sedimentao, cristalizao ou mesmo turvao dos reagentes.Realize a pipetagem sem bolhas, pois a aspirao de ar ir alterar o volume de reagente, gerando uma desproporcionalidade que poder interferir nos resultados.No encoste a ponteira nas laterais do tubo, pois podem ocorrer perdas de lquido.A lavagem da ponteira deve ser realizada, a fim de garantir que no ocorra a perda de amostra, que pode permanecer na ponteira.A mesma deve ser feita de 3 5 vezes, indo somente at o primeiro estgio, somente na ltima lavagem se vai at o fim do estgio 2, removendo todo o contedo lquido da ponteira. importante no retirar a ponteira do lquido antes de completar a lavagem.Erros mais comunsTrabalhar muito rpido, como diz o ditado a pressa inimiga da perfeio.Remover a ponteira antes da completa aspirao/despejo do lquido.Arrastar a ponteira nos lados do tubo.Soltar o boto rpido demais.Lavagem da ponteira indo at a segunda fase em todos os momentos.E, claro: No pedir ajuda em caso de dvida.

Bom trabalhoReferncias

Adaptado e complementado de: acesso em 24/04/2014 as 19:15.