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CONCEITOS DEEXPRESSÃO GÊNICA
Jorge Mondego
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DNA
A TC
GTA
G C
DNA: livro da vida, escrito com 4 letras: A T C G
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células núcleo cromossomos DNAorganismo
Paradigma Central
DNA RNA Proteína
Nucleotídeos Nucleotídeos Aminoácidos
Transcrição TraduçãoReplicação
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Em eucariotos
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Em procariotos
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Em eucariotos
DNA nuclear
DNA mitocondrial e plastidial – circular(origem endossimbiótica)
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Condensação do DNA
Histonas
Cromossomos
Agregação do DNA
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Estrutura de Ácidos Nucleicos
Nucleotídeos
5’
3’
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Purinas
Estrutura de Ácidos Nucleicos
Bases nitrogenadas
Pirimidinas
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Estrutura de Ácidos Nucleicos
Açúcares
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5´5´end
3´end
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Replicação do DNA
- Abertura de dupla hélice
- Aparato de enzima de replicação
- Cada fita de DNA gera uma fita “filha”
- Forquilha de replicação
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- DNA polimerase
- Necessidade de um iniciador ( primer)
- Adição de um nucleotideo trifosfato
- Formação de ligação fosfodiéster
- 5’ para 3’
- Liberação de um difosfato
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Mecanismo básico dareplicação
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Elementos do aparatode replicação
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Regulação da Expressão Gênica
promotor codificante terminadora
...ATCGTGATATACTAGACGATGCATGACCACCCAACTGAACTGTAACTTTAAC...
A estrutura de um gene
Onde:folharaiz
Quando:início germinaçãoataque inseto
Quanto:muito, pouco.
O que:proteína bactericidaabsorção de Fesíntese açúcar
Final do gene
...ATCGTGATATACTAGACGATGCATGACCACCCAACTGAACTGTAACTTTAAC...
Baseado em slide de Marcelo Menossi
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Transcrição
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Transcrição
- Ligação de maquinaria básica no core do promotor
- Abertura de dupla hélice
- Síntese a partir de fita molde (antissense)
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Transcrição em procariotos
Policistron – Um RNA mensageiro contêm a informação de vários genes
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Transcrição em eucariotos
Monocistron – Um RNA mensageiro contêm a informaçãode “um único” gene
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Promotores e Transcrição em Procariotos
-TATA Box: 10 pb a montante do sítio de início de transcrição
Fita codificante
Fita molde
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30
Promotores e Transcrição em Eucariotos
-TATA Box: 25 a 30 pb a montante do sítio de início de transcrição
- Promotores em eucariotos mais primitivos
- Promotores em eucariotos superiores
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Estrutura da região codificante
3’ Untranslated region5’ Untranslated region
Seqüência codificante
Proteína
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5´ UTR
- Sítio de ligação de proteínas – Estabilidade do mRNA e ajuda da tradução
- Promove o início da transcrição
3´ UTR
- Sítio de ligação de proteínas – Estabilidade do mRNA e ajuda da tradução
-Sítio de poliadenilação (AAUAAA)
- Sítio de ligação de MicroRNAs – Regulação negativa da tradução
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Capping 5’
Defosforilação
Guanilyl transferasetransferase
Metilação
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a) Distingue mRNAs dos outros RNAs
b) Protege região 5´
Importância do Capping 5´
c) Ajuda no transporte do mRNA para o citoplasma
d) Importante durante tradução
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Poliadenilação
http://vcell.ndsu.nodak.edu/animations/mrnaprocessi ng/index.htm
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Importância da Poliadenilação
a) Ajuda na terminação da transcrição
b) Protege região 3´
c) Ajuda no transporte do mRNA para o citoplasma
d) Importante durante tradução
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Exons e Introns
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![Page 36: CONCEITOS DE EXPRESSÃO GÊNICA Jorge Mondegolge.ibi.unicamp.br/lgeextensao2008/extsup/aula1.pdf · Replicação do DNA-Abertura de dupla hélice-Aparato de enzima de replicação-Cada](https://reader034.fdocumentos.tips/reader034/viewer/2022052421/5bed8fad09d3f2da098ba5a9/html5/thumbnails/36.jpg)
Splicing
Exons Introns
Expressed Interveining
Expresso Intron metido
GU AG
nnnnnAnnnnCTCTCTCTnnn
Branch point Trato de polipirimidina
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Mecanismo de Splicing
http://vcell.ndsu.nodak.edu/animations/mrnasplicing /movie.htm
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Splicing Alternativo
Retenção de íntron
Plasticidade do transcriptoma
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Splicing Alternativo
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Retenção de Íntron
Éxons alternativos
Sítios de poliadenilação alternativos
Seleção alternativa de promotores
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Complexidade dos organismos x
Tamanho dos íntrons
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Transporte do mRNA
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Tradução e código genético
Códonsunidades de três nucleotídeos que codificam para um único aminoácido
AUGUUUAAA CCCM F K P M F K P
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Tradução e código genético
RNA transportador e os anticódons
Alanine Alanine
Dois RNAs transportadores carregam o mesmo aminoáci do !
GCC GCU
A
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Degeneração do código genético :Dois códons diferentes originam o mesmo aminoácido
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Subunidade grandeProcariotos (23S)Eucariotos (28S)
Subunidade pequenaProcariotos (16S)Eucariotos (18S)
Ribossomose a tradução
RNA ribossômicoe
Proteínas
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A – AminoacidB – tRNAC – AnticodonD – CodonE – mRNAF – RibosomeG – Protein
http://www.wiley.com/legacy/college/boyer/047000379 0/animations/animations.htm
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AUGUUUAAA CCCGGGACGTACUGAM F K P G T Y stop
Open Reading Frame – Matriz aberta de leitura
As ORFs são seqüências codificantes em potencial po r possuírem
-Códon de iniciação-Região codificadora-Códon de terminação
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Direcionamento de proteínas
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Expressão gênica e estrutura do DNA