Coleta Extensão Sanguinea e Coloração 010313
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Primeira aula
Apresentao da Disciplina
Caractersticas do sangue
Coleta de sangue
Extenso sangunea e colorao
Hemograma
Profa Elvira Shinohara
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Caractersticas do sangue
Tecido lquido e renovvel Plasma Clulas sanguneas Eritrcitos Leuccitos Plaquetas
Tipos de leuccitos Neutrfilos Eosinfilos Basfilos Linfcitos Moncitos
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Funo do sangue
Transporte (O2, CO2, nutrientes, metablitos, etc)
Defesa (fagocitose)
Homeostase (temperatura, controle eletroltico, etc)
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Dis
cip
lina
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Clulas sanguneas
Eritrcitos ou Hemcias ou Glbulos vermelhos
Leuccitos
Neutrfilos
Eosinofilos
Basfilos
Linfocitos
Moncitos
Plaquetas
Granulcitos
Agranulcitos
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Como visualizamos estas clulas?
Extenso sangunea
Colorao da extenso sangunea
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Clulas sanguneas
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Clulas sanguneas
Eosinfilo Neutrfilo Segmentado Linfcito
Plaquetas
Hemcias
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Clulas sanguneas
Moncito Linfcito
Plaquetas Hemcias
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Clulas sanguneas
Basfilos
Fonte: Hoffbrand & Pettit, 1991
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Clulas sanguneas
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Clulas sanguneas
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Volume sanguneo nas mulheres
Volume de sangue nas mulheres 61,9 mL/kg
Exemplo:
Mulher de 55 kg (peso corpreo)
Logo:
Volume de sangue 3.404 mL
O volume total de eritrcitos corresponde a 24,8 ml/kg de peso, ou 1.362 mL
(usou o Ht=40% para este clculo)
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Volume sanguneo nos homens
Volume de sangue nos homens = 62,4 mL/kg
Exemplo:
Homem de 75 kg (peso corpreo)
Logo:
Volume de sangue 4.680 mL
O volume total de eritrcitos corresponde a 28,1 ml/kg de peso, ou 2.106 mL
(usou o Ht=45% para este clculo)
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Coleta do sangue
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Locais de coleta de sangue
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Puno venosa
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Tubos vacuo para coleta
A cor da tampa indica qual anticoagulante est sendo utilizado
Cor roxa = EDTA
Cor cinza = fluoreto de sdio
Cor azul = citrato de sdio
Cor verde = heparina
Cor vermelha/marrom = sem anticoagulante
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Anticoagulantes utilizados em hematologia
EDTA
K3EDTA e K2EDTA so os anticoagulantes mais adequados para a rotina hematolgica (hemograma)
EDTA quela o clcio do sangue
utilizado na seguinte proporo: 10 L de anticoagulante/1mL de sangue.
Vantagens:
no altera a morfologia das clulas (desde que a proporo anticoagulante/sangue seja mantida)
no dilui o sangue e impede a agregao plaquetria
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Anticoagulantes utilizados em hematologia
CITRATO DE SDIO
o anticoagulante de escolha para os testes de coagulao e prova de agregao plaquetria.
O citrato de sdio reage com o clcio formando um composto insolvel.
utilizado na seguinte proporo:
1 mL de anticoagulante/ 9 mL de sangue.
ou
0,5 mL de anticoagulante/ 4,5 mL de sangue
Desvantagem: altera a morfologia das clulas e dilui o sangue (uma parte de anticoagulante para 9 partes de sangue).
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Anticoagulantes utilizados em hematologia
HEPARINA
A heparina age pela formao de um complexo com a antitrombina III plasmtica, que inibe a trombina e outros estgios dos fatores de coagulao
Vantagens
no altera a morfologia das clulas e no dilui o sangue
Desvantagem: o preo do anticoagulante maior do que o EDTA
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EXTENSO SANGUNEA anlise da morfologia essencial para o diagnstico
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Plasma
Clulas sanguneas
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Clulas sanguneas
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Extenso Sangunea
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COLORAO SANGUNEA
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Corantes do Tipo Romanovsky
So misturas que contem eosina e azul de metileno dissolvidos em metanol
Na soluo envelhecida (aps dias do preparo do corante), o azul de metileno se oxida em gradaes diferentes, originando os azures de metileno
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Colorao do tipo Romanowsky
O corante de Romanowsky (neutros) uma soluo alcolica de um complexo de eosinato de azul e azures de metileno
A diferena entre os vrios corantes derivados do corante primitivo de Romanowsky acha-se na proporo que se emprega de azul-de-metileno e de eosina, ou no mtodo de tratamento do azul-de-metileno, antes de sua combinao com a eosina
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Princpio da colorao
Os componentes Azures em sua forma de dmeros ligam-se a molculas aninicas, exemplo os grupos fosfato do DNA
Os grupamentos cidos dos cidos nucleicos e protenas do ncleo celular e do citoplasma tem afinidade pelo corante bsico Azul- de -Metileno
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Princpio da colorao
A eosina na forma de monmero se liga aos stios catinicos das protenas
A presena de grupamentos bsicos na molcula de Hb resulta na afinidade por corantes cidos, corando-se pela eosina
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Principio da colorao
CORANTE CLULA
Azul de Metileno cora Ncleo (DNA)
(bsico) (cido)
Eosina cora Hb
(cido) (bsico)
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Nomenclatura usual
Colorao Ortocromtica: a clula cora-se com a mesma cor do corante
Colorao Metacromtica: a clula toma uma cor diferente daquela do corante
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Nomenclatura usual
Estruturas celulares que se coram em pelo Azul de Metileno so chamadas de basfilas (corando-se de azul)
Estruturas celulares que se coram pela Eosina so chamadas de acidfilas (corando-se em rosa)
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Tipos de corantes de Romanovsky
May-Grunwald ou Jenner,
Giemsa
Leishman
Wright
(Podem ser encontrados, no comrcio, na forma de reagentes ou em solues j preparadas pelo fornecedor)
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Clulas sanguneas
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Contagem relativa dos leuccitos realizada atravs da anlise morfolgica dos leuccitos, contando no
mnimo 100 leuccitos, diferenciando clula a clula.
Campo muito grosso Campo adequado Campo muito fino
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Contagem relativa dos leuccitos realizada atravs da anlise morfolgica dos leuccitos, contando no
mnimo 100 leuccitos, diferenciando clula a clula.
Campo muito
grosso Campo adequado Campo muito fino
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Campos de leitura na extenso sangunea
Corpo da extenso sangunea
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Regio grossa da extenso (cabea)
No deve ser feito contagem das clulas
nesta regio da extenso sangunea
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Regio da cauda (muito fina)
No deve ser feito contagem das clulas nesta regio da extenso sangunea
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Campos que NO devem ser analisados na extenso sangunea
Regio muito fina Cauda da extenso
Regio muito grossa
Cabea da extenso sangunea
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Contagem relativa dos leuccitos
realizada atravs da anlise morfolgica dos leuccitos, contando no mnimo 100 leuccitos, diferenciando clula a clula.
A
A
B
A Cerca de 25 clulas
B- Cerca de 50 clulas
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Contagem relativa dos leuccitos
As clulas no tem distribuio uniforme na extenso sangunea
Cabea Corpo Cauda
Os linfcitos predominam no meio da extenso
Neutrfilos e moncitos predominam nas margens e na cauda
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Problemas na colorao Presena de precipitados do corante na extenso sangunea
corada
Uso de lminas sujas com gordura
Secagem durante o perodo de colorao
Lavagem inadequada ao trmino da colorao
Filtrao inadequada dos corantes (vai aparecer os precipitados de corante)
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Precipitados de corante
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Colorao inapropriada
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HEMOGRAMA
Plasma
clulas
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HEMOGRAMA
Exame hematolgico mais solicitado
Consiste na anlise qualitativa e quantitativa das
clulas sanguneas
Fornece parmetros para controle e auxlio no
diagnstico das anemias, de vrios processos
infecciosos e de alteraes no nmero das plaquetas
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Hemograma
Eritrograma (avalia srie vermelha)
Leucograma (avalia srie branca)
Contagem de plaquetas
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Exemplo de um laudo de hemograma
eritrograma
leucograma
Contagem de plaquetas
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Bibliografia recomendada
. Dacie & Lewis. Practical Haematology. 8a Edition. Churchill Livingstone.
Stiene-Martin EA, Lotspeich-Steininger, Koepke JA Clinical Hematology- Principles, Procedures, Correlations. Editora Lippincott, 2edio, 1998.
Lorenzi TF, DAmico E, Daniel MM, Silveira PAA, Buccheri V Manual de Hematologia Propedutica e Clnica. Editora Medsi 3 edio, 2003.