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O estudo da atividade antiacetilcolinesterásica é de grande importância na prevenção da doença de Alzheimer (DA), que é uma patologia neurodegenerativa caracterizada pela perda das capacidades cognitivas superiores, ocasionando em perda de memória. Uma das alternativas para tratar esta doença é aumentar o nível do neurotransmissor acetilcolina (ACh) no cérebro usando inibidores da enzima acetilcolinesterase (AchE). (Barbosa-Filho et al., 2006). As recentes pesquisas demonstram que as plantas medicinais podem possuir uma grande eficácia no tratamento das desordens cognitivas e de memória, uma vez que elas apresentam os chamados metabólitos secundários ou produtos naturais, que são compostos cada vez mais investigados por possuírem atividades biológicas e baixa toxicidade, podendo agir como anticolinesterásicos inibindo a DA. Nesse contexto destaca-se a Byrsonima sericea da família Malpighiaceae, conhecida popularmente como murici da praia ou murici do brejo, é uma espécie de ampla distribuição geográfica e que ocorre em ambientes de matas, sendo predominante nas áreas mais ensolaradas. Esta planta é utilizada popularmente no tratamento de diabetes e disfunções gastrointestinas e revelou o melhor poder antioxidante do extrato etanólico das folhas, frente ao radical livre DPPH entre várias plantas medicinais analisadas por Boscolo et al. (2007). O presente trabalho tem como objetivo estudar a atividade anticolinesterase “in vitro” do extrato etanólico e das frações hexânica, clorofórmica, acetato de etila e metanólica das folhas da B.sericea. . 1. BARBOSA-FILHO, J.M..; MEDEIROS, K.C.P.; DINIZ, M.F.F.M.; BATISTA, L.M.; ATHAYDE-FILHO, P.F.; SILVA, M. S.; CUNHA, E.V.L.; ALMEIDA, J.R.G.S. e QUINTAS-JÚNIOR, L.J. 2006. Natural products inhibitors of the enzyme acetylcholinesterase. Revista. Brasileira de Farmacognosia, v.16, p. 2. 2. BOSCOLO, O.H.; MENDONÇA-FILHO, R.F.W.; MENEZES, F.S.; SENNA-VALLE, L. 2007. Potencial antioxidante de algumas plantas de restingas citadas como medicinais. Revista. Brasileira de Plantas Medicinais, v. 9, p. 8-12. 3. MINETT, T.S.C.; BERTOLUCCI. P.H.F; 2000. Terapia Colinérgica na Doença de Alzheimer. Revista de Neurociências, v. 8, n.1, p. 11-14. 4. RHEE, I.K.; MEENT, M.V.; INGKANINAN, K.; VERPOORTE, R.J. 2001. Screening for acetylcholinesterase inhibitors from Amaryllidaceae using silica gel thin-layer chromatography in combination with bioactivity staining. Journal of Chromatography A, v.915, p. 217-223. . A constatação da inibição da AChE para cromatografia em camada delgada fina é possível através da observação de halos brancos. A medida da atividade antiacetilcolinesterásica é dada pela medida (em cm) dos halos. O extrato etanólico, acetato de etila, metanólico das folhas apresentaram, respectivamente, halos de 0,9cm; 0,8cm e 0,7cm, demonstrando uma ótima atividade anticolinesterásica quando comparados à fisostigmina que apresentou um halo de 0,9cm. Porém, as frações hexânica e clorofórmica não apresentaram atividade inibitória da AchE. O resultado é considerado satisfatório uma vez que a medida do halo é igual ou maior do que 50% da medida do halo encontrado para o padrão utilizado. Das amostras testadas, três apresentaram resultados positivos conforme a Tabela 1. . Os excelentes resultados obtidos na atividade anticolinesterásica da B.sericea estimulam a continuação das investigações dos extratos que apresentaram resultados positivos, visando o isolamento biomonitorado e a identificação de substâncias anticolinesterásicas que possam ser testadas inclusive, em outros ensaios biológicos bem como na produção de novos fármacos ou fitoterápicos. A separação dos constituintes das frações ativas será realizada utilizando-se coluna cromatográfica em sílica gel. A identificação será feita através de técnicas espectrométricas, como: espectrometria de infra- vermelho e espectrometria de ressonância magnética nuclear (RMN) e de massas. . Avaliação de Extratos das Folhas da Espécie Byrsonima sericea Quanto a Atividade Inibitória da Enzima Acetilcolinesterase *SOUSA, L.S.; MOREIRA, D.R.; CAVALCANTI, E.S.B.; COSTA, S.M.C. [email protected] Introduçã Introduçã o o Coleta das folhas; • Preparação do extrato; • Cromatografia em coluna cromatográfica (figura 1); •Teste de inibição da enzima Acetilcolinesterase 4 (figura 2); . Resultados e Discussão Resultados e Discussão . Referências Bibliográficas Referências Bibliográficas XVI Encontro de Iniciação à Pesquisa Universidade de Fortaleza 20 a 22 de Outubro de 2010 Figura 2: Teste de inibição da AChE TABELA 1: RESULTADOS DO TESTE DE INIBIÇÃO DA ACHE A UECE e ao CNPq pelas bolsas concedidas e a FUNCAP que viabilizou o orçamento do projeto. Figura 1: Coluna cromatográfica Extrato bruto Frações Hexânica, Clorofómica, Acetato de Etila e Metanólica AMOSTRA HALO (CM) FEBS 0,9 FHBS - FCBS - FABS 0,8 FMBS 0,7 PADRÃO FISOSTIGMINA 0,9 EEBS – Extrato etanólico da Byrsonima sericea; FHBS – Fração hexano da B. sericea; FCBS - Fração clorofórmio da B.sericea; FABS – Fração acetato de etila da B. sericea; FMBS – Fração metanólica da B. sericea. Laboratório de Produtos Naturais – Centro de Ciências e Tecnologia – UECE – Fortaleza/CE

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Oestudodaatividadeantiacetilcolinestersicadegrandeimportnciana prevenodadoenadeAlzheimer(DA),queumapatologia neurodegenerativacaracterizadapelaperdadascapacidadescognitivas superiores,ocasionandoemperdadememria!"madasalternativaspara tratar esta doena aumentar o n#vel do neurotransmissor acetilcolina (A$h) no cre%ro usando ini%idores da enzima acetilcolinesterase (Ach&)! ('ar%osa()ilhoetal!,*++,)!Asrecentespesquisasdemonstramqueasplantas medicinais podem possuir uma grande e-iccia no tratamento das desordens cognitivasedememria,umavezqueelasapresentamoschamados meta%litossecundriosouprodutosnaturais,quesocompostoscadavez maisinvestigadosporpossu#rematividades%iolgicase%ai.ato.icidade, podendoagircomoanticolinestersicosini%indoaDA!/esseconte.to destaca(seaByrsonimasericeada-am#lia0alpighiaceae,conhecida popularmentecomomuricidapraiaoumuricido%re1o,umaespciede ampla distri%uiogeogr-icaequeocorreem am%ientes de matas, sendo predominantenasreasmaisensolaradas!&staplantautilizada popularmentenotratamentodedia%etesedis-un2esgastrointestinase revelou o melhor poder antio.idante do e.trato etanlico das -olhas, -rente ao radical livre D334 entre vrias plantas medicinais analisadas por 'oscolo et al!(*++5)!Opresentetra%alhotemcomoo%1etivoestudaraatividade anticolinesterase6invitro7doe.tratoetanlicoedas-ra2eshe.nica, cloro-rmica, acetato de etila e metanlica das -olhas da B.sericea.! 8!'A9'O:A();0&D&;9O:,?!$!3!>D;/;@,0!)!)!0!>'AA;:AA, AA4ABD&();:;$"/4A,&!C! A*+++!Aerapia$olinrgicanaDoenade Alzheimer! Revista de Neurocincias, v! K, n!8, p! 88(8M.M! 94&&, ;!?!>0&&/A, 0!C!> ;/D?A/;/A/, ?!> C&93OO9A&, 9!=!*++8! :creening -or acetGlcholinesteraseinhi%itors-romAmarGllidaceaeusingsilicagelthin(laGer chromatographGincom%inationNith%ioactivitGstaining!JournalofChromatographyA, v!J8O, p! *85(**L!! A constataodaini%ioda A$h&paracromatogra-iaemcamadadelgada -inaposs#velatravsdao%servaodehalos%rancos!Amedidada atividadeantiacetilcolinestersica dadapela medida(emcm) dos halos! O e.tratoetanlico,acetatodeetila,metanlicodas-olhasapresentaram, respectivamente,halosde+,Jcm>+,Kcme+,5cm,demonstrandoumatima atividadeanticolinestersicaquandocomparadosP-isostigminaque apresentouumhalode+,Jcm!3orm,as-ra2eshe.nicaecloro-rmica noapresentaramatividadeini%itriadaAch&!Oresultadoconsiderado satis-atrioumavezqueamedidadohaloigualoumaiordoqueO+Qda medidadohaloencontradoparaopadroutilizado!Dasamostrastestadas, trRs apresentaram resultados positivos con-orme a Aa%ela 8!! Ose.celentesresultadoso%tidosnaatividadeanticolinestersicada B.sericeaestimulamacontinuaodasinvestiga2esdose.tratosque apresentaramresultadospositivos,visandooisolamento%iomonitoradoea identi-icaodesu%stnciasanticolinestersicasquepossamsertestadas inclusive,emoutrosensaios%iolgicos%emcomonaproduodenovos -rmacosou-itoterpicos!Aseparaodosconstituintesdas-ra2esativas serrealizadautilizando(secolunacromatogr-icaems#licagel!A identi-icaoser-eitaatravsdetcnicasespectromtricas,comoS espectrometria de in-ra(vermelho e espectrometria de ressonncia magntica nuclear (90/) e de massas! ! Avaliao de Extratos das Folhas da Espcie Byrsonima sericea Quanto a Atividade Inibitria da Enzima Acetilcolinesterase T:O":A, 0O9&;9A, D!9!> $ACA3=?)&': +,J)4': ()$': ()A': +,K)0': +,53AD9VO );:O:A;D0;/A +,J&&': W &.trato etanlico da Byrsonima sericea )4': W )rao he.ano da B. sericea> )$': ( )rao cloro-rmio da B.sericea )A': W )rao acetato de etila da B. sericea> )0': W )rao metanlica da B. sericea. 4aboratrio de *rodutos 6aturais @ 3entro de 3i#ncias e 2ecnolo%ia @ ,E3E @ FortalezaA3E