UNIVERSIDADE FEDERAL DE UBERLÂNDIA FACULDADE DE MEDICINA VETERINÁRIA

AVALIAÇÃO DO USO DE LITHOTHAMNIUM CALCAREUM E LEVEDURA DE CANA-DE-AÇUCAR NA CONTAGEM DE

CÉLULAS SOMÁTICAS E BACTERIANA TOTAL DO LEITE DE VACAS

Breno Henrique de Almeida Ribeiro Médico Veterinário

UBERLÂNDIA – MINAS GERAIS- BRASIL ABRIL – 2014

UNIVERSIDADE FEDERAL DE UBERLÂNDIA FACULDADE DE MEDICINA VETERINÁRIA

AVALIAÇÃO DO USO DE LITHOTHAMNIUM CALCAREUM E

LEVEDURA DE CANA-DE-AÇUCAR NA CONTAGEM DE CÉLULAS SOMÁTICAS E BACTERIANA TOTAL DO LEITE

DE VACAS

Breno Henrique de Almeida Ribeiro Orientadora: Profa. Dra. Anna Monteiro Correia Lima

Dissertação apresentada à Faculdade de Medicina Veterinária – UFU, como parte das exigências para obtenção do título de Mestre em Ciências Veterinárias (Saúde Animal).

Uberlândia – MG Abril – 2014

Dados Internacionais de Catalogação na Publicação (CIP)

Sistema de Bibliotecas da UFU, MG, Brasil.

R484a

2014

Ribeiro, Breno Henrique de Almeida, 1977-

Avaliação do uso de Lithothamnium Calcareum e levedura

de cana-de-açucar na contagem de células somáticas e

bacteriana total do leite de vacas / Breno Henrique de Almeida

Ribeiro. – 2014.

13 f. : il.

Orientadora: Anna Monteiro Correia Lima.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de

Uberlândia, Programa de Pós-Graduação em Ciências

Veterinárias.

Inclui bibliografia.

1. Veterinária - Teses. 2. Bovino de leite – Alimentação e

rações - Teses. 3. Leite – Produção – Teses. I. Lima, Anna

Monteiro Correia. II. Universidade Federal de Uberlândia.

Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. III.

Título.

1.

CDU:

619

E um homem disse: “Fala-nos do conhecimento de si próprio.”

E ele respondeu, dizendo:

“Vosso coração conhece em silêncio os segredos dos dias e das noites; mas vossos

ouvidos anseiam por ouvir o que vosso coração sabe.

Desejais conhecer em palavras aquilo que sempre conhecestes em pensamento.

Quereis tocar com os dedos o corpo nu de vossos sonhos.

E é bom que o desejeis.

A fonte secreta de vossa alma precisa brotar e correr, murmurando, para o mar; e o

tesouro de vossas profundezas ilimitadas precisa revelar-se a vossos olhos.

Mas não useis balanças para pesar vossos tesouros desconhecidos; e não procureis

explorar as profundidades de vosso conhecimento com uma vara ou uma sonda,

porque o Eu é um mar sem limites e sem medidas.

Não digais: ‘Encontrei a verdade.’ Dizei de preferência: ‘Encontrei uma verdade.’

Não digais: ‘Encontrei o caminho da alma.’ Dizei de preferência: ‘Encontrei a alma

andando em meu caminho.’

Porque a alma anda por todos os caminhos.

A alma não marcha numa linha reta nem cresce como um caniço.

A alma desabrocha, qual um lótus de inúmeras pétalas.”

GIBRAN KHALIL GIBRAN, O Profeta.

Ao meu pai, in memoriam, ofereço.

À minha mãe e irmãs, agradeço.

À Franciele, dedico.

Agradeço a todos que, de forma direta ou indireta, ajudaram na

realização deste trabalho.

Em especial, agradeço à minha orientadora Profa. Dra. Anna

Monteiro Correia Lima que foi sempre uma pessoa disponível, gentil e

competente na sua função.

Ao Prof. Dr. Ednaldo Carvalho Guimarães agradeço todo o trabalho

estatístico da dissertação, sem o qual os dados não teriam conclusão.

i

SUMÁRIO

1. INTRODUÇÃO...............................................................................................01

2. MATERIAL E MÉTODOS..............................................................................04

3. RESULTADOS E DISCUSSÃO.....................................................................06

4. CONCLUSÃO................................................................................................11

5. REFERÊNCIAS.............................................................................................12

ii

RESUMO - Este trabalho teve como objetivo avaliar se houve redução nas

CCS e CBT do leite de vacas, usando um suplemento dietético, em três diferentes

dosagens e constituído basicamente de minerais orgânicos oriundos da

Lithothamnium calcareum (92,5g/kg), principalmente cálcio e magnésio, e leveduras

de cana-de-açúcar (Saccharomyces cerevisiae) (2,5g/kg) enriquecidas com paredes

celulares destas (5g/kg). A pesquisa foi realizada na Fazenda Experimental do

Glória da Universidade Federal de Uberlândia, em Uberlândia, MG. Foram utilizadas

12 vacas mestiças leiteiras que estavam com mais de 60 dias pós-parto, com

produção leiteira acima de 20 kg/dia. Durante o período da pesquisa – cinco meses -

todos os animais ficaram 75 dias em confinamento com ração e silagem e 75 dias

com ração e pastagem. As 12 vacas foram divididas em quatro grupos de três

animais cada um. Dos grupos, três receberam, respectivamente, 40, 60 e

80g/dia/animal de suplemento misturado aos quatro kg diários de ração, oferecidos

durante a ordenha. Um grupo foi mantido como controle, sem receber o suplemento.

Foram coletadas cinco amostras mensais de leite de cada animal, uma no início do

experimento e as outras a cada 30 dias. As amostras de leite foram coletadas no

início da ordenha da tarde, antes da colocação das teteiras, em recipientes com

preservante bronopol (2-bromo, 2-nitro-1,3 propanediol), foram resfriadas e enviadas

para o Centro de Tecnologia para o Gerenciamento da Pecuária de Leite, na Clínica

do Leite (Esalq-USP). Através da citometria de fluxo foi determinada a CCS e da

Citometria de Fluxo - PO ANA 010 foi determinada a Contagem Bacteriana Total

(CBT). As médias de CCS e CBT variaram entre 107 x 1000 e 278 x 1000 células

por mL e 4 x 1000 e 17 x 1000 UFC por mL, respectivamente. Não foi observada

nenhuma alteração significativa nas CCS e CBT, com nenhuma dosagem utilizada.

Palavras-chave: Lithothamnium calcareum. Contagem de Células Somáticas.

Contagem Bacteriana Total. leite bovino.

iii

SUMMARY – The objective of the present study was to evaluate the reduction

in somatic cell count (SCC) and total bacterial count (TBC) in bovine milk to

acceptable parameters, using a dietary supplement, in three different dosages. The

dietary supplement consisted basically of organic minerals derived from

Lithothamnium calcareum (92.5 g/kg), Saccharomyces cerevisiae (2.5 g/kg) and

yeast cell walls (5g/kg). Twelve crossbred cows that were more than 60 days

postpartum and produced more than 20 Kg of milk/day were used in this research,

which was conducted at the experimental farm of the Federal University of

Uberlândia (Fazenda Experimental do Glória, Universidade Federal de Uberlândia,

Uberlândia, Brazil). During the first 75 days, the animals were confined and received

feed and silage. During the following 75 days, the animals were received feed and

pasture. The 12 cows were divided into four groups of three animals each, the

animals of each group receiving 0, 40, 60 or 80g of supplement per day. The

supplement was mixed in 4 kg of feed and offered during milking. Milk samples were

collected each month, the first one at the beginning of the experiment and the

remaining samples every 30 days. These samples were collected at the beginning of

the afternoon milking, before the placement of the teat cups, and were kept in

containers with bronopol (2-bromo, 2-nitro-1, 3 propanediol). After being collected,

the samples were cooled and sent to the Centro de Tecnologia para o

Gerenciamento da Pecuária de Leite, at the Clínica do Leite (Esalq-USP). Flow

cytometry was used to determine the SCC and flow cytometry – PO ANA 010 was

used to determine TBC. The average SCC ranged between 1,07 x 105 cells/mL and

2,78 x 105 cells/mL. The average TBC ranged between 4 x 103 CFU/mL and 17 x 103

CFU/mL. No significant changes in SCC and TBC counts were observed, regardless

of the dosage used was observed.

Keywords: Lithothamnium calcareum. Somatic Cell Count. Total Bacterial

Count. bovine milk.

1

1. INTRODUÇÃO

A bovinocultura leiteira, no Brasil, é hoje um dos setores mais importantes da

pecuária, o que favorece a procura por melhorias na produção e no desempenho

dos animais. A inclusão de aditivos seguros na dieta de bovinos tem sido utilizada

objetivando elevar a produção, diminuir os problemas com resíduos, sem causar

prejuízos aos animais.

Um artifício de grande importância e que vem sendo estudado recentemente

é o emprego da farinha de algas marinhas. De acordo com Melo e Moura (2009), as

algas marinhas calcárias retêm elevado índice de elementos minerais do meio

marinho, além de considerável quantidade de substâncias nutritivas. Uma destas

algas é o Lithothamnium calcareum, pertencente à família das coralinaceas e ao

grupo das algas vermelhas ou rodofíceas. O Lithothamnium sp é uma alga marinha

calcária encontrada em todos os mares do mundo. Ao absorverem os minerais do

ambiente, elas transformam os componentes químicos em compostos de fácil

absorção pelo nosso organismo. A principal função desses minerais é a formação de

enzimas, que funcionam como catalisadores orgânicos nas trocas químicas das

células. Por isso, são vitais para a sobrevivência das células e do corpo.

O Lithothamnium sp é utilizado, há anos, em países europeus e asiáticos em

diversos segmentos e indústrias, notadamente na nutrição vegetal e na nutrição

animal. O Brasil é comprovadamente o país que detém as maiores reservas desta

alga do mundo, seja em quantidade ou qualidade (MELO e MOURA, 2009).

De acordo com Melo et al. (2004) Lithothamnium sp é um suplemento

alimentar notavelmente equilibrado. Devido a sua origem orgânica, os nutrientes

contidos no Lithothamnium sp são de fácil absorção pelo organismo animal, suprindo

eficazmente deficiências nutricionais. Análises realizadas, no Brasil, demonstram

que este produto tem em sua composição mais de 48 elementos (macro e

micronutrientes), contendo ainda fitohormônios, vitaminas e aminoácidos na matéria

orgânica. Tem aspecto calcário, absorve o carbonato de cálcio e o magnésio, é

100% natural e os seus nutrientes e compostos são metabolizados organicamente e

absorvidos pelo animal. Magnésio e cálcio são elementos minerais relacionados de

forma muito íntima a diversos processos metabólicos no organismo animal. Em

vacas leiteiras, principalmente de alta produção, há grande mobilização de cálcio

2

para a glândula mamária para a produção de leite, predispondo a vaca a uma

hipocalcemia. Além disso, níveis reduzidos de cálcio e magnésio em vacas leiteiras

podem levar à retenção de placenta, redução da involução uterina e contração da

musculatura lisa e aumento da incidência de deslocamento do abomaso (HORTA,

1994; DIAS, 2000; SAUT et al., 2010).

Sabe-se que principalmente em gado leiteiro, as maiores necessidades

minerais são em cálcio, fósforo e magnésio. Esses minerais constituem 75% das

necessidades essenciais do rebanho. Deficiência de tais elementos se traduz

primeiramente em falta de apetite, a qual pode se agravar, podendo se instalar

quadro de anorexia. Quando há este sintoma observa-se um processo de deficiência

energética e logo após uma deficiência protéica (PEIXOTO et al., 1995). A nutrição

como ferramenta para modular o sistema imune, produzindo um estado ideal de

imunidade, tem se tornado um fato real não apenas em estados patológicos

imunossupressores, como também para a manutenção dos saudáveis (MENEZES e

BERTOLA, 2001), já que nas infecções o sistema imune é peça chave no seu

controle.

Melo et al. (2004) ainda afirmaram que alguns pesquisadores atribuem ações

extra-nutricionais às moléculas orgânicas, dentre elas maior tolerância aos fatores

estressantes; melhor eficiência no sistema imunológico; controle eficaz na retenção

de placenta; controle eficaz de até 80% nos problemas de cascos e controle de

mastite clínica e sub-clínica, com redução de CCS significativamente, para

patamares aceitáveis. Entretanto, Lopes (2012) observou que a suplementação

dietética de 1% da Matéria Seca de farinha de algas (Lithothamnium calcareum)

diminuiu a produção de leite de vacas em final de lactação, quando comparadas ao

grupo controle.

A edição da Instrução Normativa n. 62 (IN 62), de 29 de dezembro de 2011,

pelo Ministério de Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) define um novo

cronograma para adaptação gradativa dos produtores de leite e muda os limites da

CCS. As mudanças alteram o prazo e limite da CCS, que passa a ter como limite

máximo 600.000/mL, para os produtores das regiões Sul, Sudeste e Centro-Oeste, a

partir de janeiro de 2012. Há um escalonamento de prazos e limites para a redução

da CCS até 2016, para que se chegue a 400.000/mL (MAPA, 2011).

Vallin et al. (2009) observaram que, com práticas simples de manejo, se pode

melhorar a qualidade do leite, usando como parâmetros de qualidade a Contagem

3

de Células Somáticas (CCS), indicativo de sanidade da glândula mamária, e a

Contagem Bacteriana Total (CBT), indicativo de higiene de ordenha. A CBT indica a

contaminação no leite expressa em Unidade Formadora de Colônia por mililitro

(UFC/ml). A CCS alta é indicador da mamite subclínica e serve como avaliação do

risco de ocorrência de resíduos de antibióticos no leite, uma vez que nestas

condições, a frequência de tratamentos mamários contra mamites é maior. Foram

estudados mais de 70 mil resultados de CCS e CBT, provenientes de análises

automatizadas, de rebanhos leiteiros europeus e foi observado que quando a CCS

era alta, o coeficiente de correlação entre CCS e CBT foi de 0,84, indicando uma

alta correlação entre estes dois critérios de qualidade. Estes resultados demonstram

que os rebanhos com maiores médias de CCS apresentaram as piores condições de

higiene na produção de leite, o que pode ser um dos fatores relacionados com a

dificuldade de controle da mamite (SANTOS, 2006).

Outro importante suplemento usado na alimentação animal é a levedura da

cana-de-açúcar (Saccharomyces cerevisiae). A parede celular das leveduras

constitui-se, predominantemente, de polissacarídeos mananos e glucanos, que

agem como prebióticos. Os mananos, que se encontram presentes em maior

proporção na parede celular mais externa, agem como protetores do mecanismo de

defesa do organismo animal. Já os glucanos estimulam o sistema imune natural e a

produção de macrófagos que, através do processo de fagocitose, destroem os

microrganismos patogênicos (COSTA, 2004), o que faria uma diminuição nas

bactérias do leite.

Diante disto, os objetivos desta pesquisa foram:

Avaliar se houve redução na contagem de células somáticas do leite

(CCS) e na contagem bacteriana total (CBT) usando uma associação

de Lithothamnium calcareum (92,5g/kg), levedura de cana-de-açúcar

(Saccharomyces cerevisiae) (2,5g/kg) e paredes celulares destas

(5g/kg), como suplemento, em três diferentes dosagens.

Distinguir qual a dosagem usada apresentou queda maior na CCS e

CBT.

4

2. MATERIAL E MÉTODOS

A pesquisa foi realizada na Fazenda Experimental do Glória da Universidade

Federal de Uberlândia, situada no município de Uberlândia, MG. Possui clima

tropical semiúmido, com temperatura média anual de 23°C. A precipitação

pluviométrica média anual é de 1300 mm, distribuída entre os meses de novembro a

março (verão chuvoso). O período seco estende-se de abril a outubro (inverno

seco).

Foram utilizadas 12 vacas mestiças leiteiras (Zebu x holandês) que possuiam

uma genética próxima, em bom estado de saúde, com peso vivo médio de 580 kg, e

que estavam com mais de 60 dias pós-parto, com produção leiteira acima de 20

kg/dia. Durante o período do experimento – cinco meses (novembro/2012 a

março/2013) - todos os animais ficaram 75 em confinamento com ração e silagem e

os 75 dias seguintes com ração e pastagem.

As 12 vacas foram divididas em quatro grupos de três animais cada um. Três

grupos receberam, respectivamente, 40, 60 e 80g/dia/animal de suplemento

misturado aos quatro kgs diários de ração, oferecidos durante a ordenha. Um dos

grupos foi mantido como controle, sem receber o suplemento (Figura 1).

Cinco amostras mensais de leite foram coletadas de cada animal, uma no

início do experimento e as outras a cada 30 dias, de novembro de 2012 a março de

2013, através de ordenha manual.

As amostras de leite foram colhidas mediante sistema acionado do tanque

individual, na ordenha da tarde, em recipientes com preservante bronopol (2-

bromo,2-nitro-1,3 propanediol), foram resfriadas e enviadas para o laboratório.

Através da citometria de fluxo foi determinada a contagem de células somáticas

(CCS). Através da Citometria de Fluxo - PO ANA 010 foi determinada a Contagem

Bacteriana Total (CBT) (CASSOLI et al., 2007). As análises laboratoriais foram

realizadas no Centro de Tecnologia para o Gerenciamento da Pecuária de Leite, na

Clínica do Leite (Esalq-USP).

As análises estatísticas para os testes da CCS e da CBT foram feitas com a

aplicação do Teste de Normalidade de ANDERSON-DARLING (PORTAL ACTION,

2013, 2) e do Teste de KRUSKAL-WALLISS (PORTAL ACTION, 2013, 1).

5

A B

C D

E

Figura 1. Administração do suplemento dietético (A e B – separação dos

animais. C – colocação da ração. D – colocação do suplemento. E – ingestão)

6

3. RESULTADOS E DISCUSSÃO

Foram obtidos alguns valores da CCS. Os dados de comparação do valor

numérico da CCS com os períodos do experimento (confinamento e pastagem),

dosagem do suplemento contendo Lithothamnium sp (92,5g/kg) e levedura de cana-

de-açúcar (2,5g/Kg) e paredes celulares destas (5g/Kg) e meses do ano durante a

realização do experimento estão registrados nas TABELAS 1 e 2.

TABELA 1. Contagem de Células Somáticas das amostras de leite de 12 vacas, da Fazenda do Glória, UFU, 2014.

Períodos Confinamento ConfinamentoPastagem

Pastagem

Grupo (g)

No. do animal

CCS nov (x1000/mL)

CCS dez (x1000/mL)

CCS jan (x1000/mL)

CCS fev (x1000/mL)

CCS mar (x1000/mL)

CCS Média

do Animal

controle 15 321 105 107 351 173 211,4 controle 702 287 15 16 69 36 84,6 controle 838 215 35 315 124 168 171,4

40 491 204 117 972 427 205 385 40 698 221 159 479 364 241 292,8 40 831 68 24 101 24 76 58,6 60 320 215 41 112 208 52 125,6 60 703 175 23 64 27 65 70,8 60 777 23 22 60 26 33 32,8 80 466 375 280 331 339 152 295,4 80 528 220 75 365 174 515 269,8 80 720 352 392 416 751 650 512,2

CCS Média Mensal

223 107,33 278,17 240,33 197,17

Aplicado o Teste de Normalidade de ANDERSON-DARLING constatou-se

que a distribuição não era normal, portanto, não paramétrica e não necessitando

assim ser feita a análise de variância. Foi usado então, para uma análise não

paramétrica, o Teste de KRUSKAL-WALLIS, no qual foram comparados as

dosagens do suplemento, os meses do ano e os períodos do experimento com os

resultados da CCS.

Comparadas as dosagens com os resultados da CCS, independente dos

períodos e dos meses, houve diferenças significativas, no nível de significância de

0,05 entre o grupo controle, e o grupo que recebeu 80 gramas diárias do

7

suplemento. Contudo, não houve diferenças entre os grupos controle e os que

receberam 40 e 60 gramas.

TABELA 2. Sumário Básico por Fator. Dados do Processo. Uberlândia, MG, 2014.

Fator (g)

Períodos Meses Mínimo Média Mediana Máximo Desvio Padrão

0 CONF DEZ 15 51,67 35 105 47,258156

0 CONF JAN 16 146 107 315 153,26774

0 CONF NOV 215 274,33 287 321 54,123316

0 PAST FEV 69 181,33 124 351 149,4869

0 PAST JAN 16 146 107 315 153,26774

0 PAST MAR 36 125,67 168 173 77,693844

40 CONF DEZ 24 100 117 159 69,086902

40 CONF JAN 101 517,33 479 972 436,76348

40 CONF NOV 68 164,33 204 221 83,859009

40 PAST FEV 24 271,67 364 427 216,78638

40 PAST JAN 101 517,33 479 972 436,76348

40 PAST MAR 76 174 205 241 86,758285

60 CONF DEZ 22 28,67 23 41 10,692677

60 CONF JAN 60 78,67 64 112 28,936713

60 CONF NOV 23 137,67 175 215 101,29824

60 PAST FEV 26 87 27 208 104,79027

60 PAST JAN 60 78,67 64 112 28,936713

60 PAST MAR 33 50 52 65 16,093477

80 CONF DEZ 75 249 280 392 160,75758

80 CONF JAN 331 370,67 365 416 42,782395

80 CONF NOV 220 315,67 352 375 83,644087

80 PAST FEV 174 421,33 339 751 297,18064

80 PAST JAN 331 370,67 365 416 42,782395

80 PAST MAR 152 439 515 650 257,55194

Não houve ainda diferença significativa entre os grupos que receberam 40 e

80 gramas, como pode ser visualizado na TABELA 3. Considerando apenas

períodos, independente de dosagens e meses, no nível de significância de 0,05, não

houve diferença significativa entre confinamento e pastagem. E considerados

meses, independente de dosagens e períodos também, no nível de significância de

0,05, não houve diferença significativa, entre os meses do experimento.

8

Pelos cálculos das medianas, pode-se perceber que o melhor desempenho foi do

grupo que recebeu 60 gramas, seguido pelo grupo controle, depois o de 40 gramas,

e o de 80 gramas (TABELA 3). Ou seja, o grupo que recebeu 60 gramas de

suplemento teve a maior queda na CCS, porém não houve diferença significativa

com os outros grupos.

TABELA 3. Dosagem do suplemento X Mediana, na CCS, Uberlândia, MG. 2014

GRUPOS (DOSAGEM) (g)

MEDIANA DIFERENÇAS

0 115,5 A B

40 204,5 B C

60 60 A

80 385,5 C

A diminuição da CCS, pelo uso da suplementação da ração com a alga

marinha Lithothamnium sp, foi observada por Melo et al. (2004). A correção de

qualquer deficiência mineral existente no rebanho com a administração das algas

marinhas na alimentação, como sugere Dias (2000), permite a atuação satisfatória

do sistema imune dos animais no combate a agentes infecciosos. A deficiência

mineral pode levar a uma deficiência protéica, como relataram Peixoto et al. (1995),

que irá prejudicar a resposta imunológica do organismo, constituída basicamente de

proteína e tornará o indivíduo altamente susceptível a infecções. Menezes e Bertola

(2001) observaram que é necessário se ter um estado nutricional ideal para se

conseguir uma imunidade adequada a infecções.

Os valores da CBT foram de dezembro de 2012 a março de 2013, pois os de

novembro não foram processados devido ao fato de terem atingido uma temperatura

superior à temperatura desejável, durante o transporte. Os dados de comparação do

valor numérico da CBT com os períodos do experimento (confinamento e

pastagem), dosagem do suplemento e meses do ano estão computados nas

TABELAS 4 e 5.

9

TABELA 4. Meses do Experimento X Mediana, na CBT Uberlândia, MG, 2014.

MESES MEDIANA DIFERENÇAS

D 2 A

J 6 B

F 17 AB

M 5 AC

Tabela 5. Contagem Bacteriana Total (x 1000 UFC/mL) das amostras de leite de 12 vacas, da Fazenda do Glória, UFU, 2014.

Períodos Confinamento Confinamento

Pastagem Pastagem

Grupo (g)

No. do animal

CBTdez CBTjan CBTfev CBTmar CBT

Média do animal

controle 15 27 9 7 2 11,25

controle 702 1 4 4 3 3

controle 838 1 19 7 13 10

40 491 1 29 4 3 9,25

40 698 6 22 4 7 9,75

40 831 1 15 5 16 9,25

60 320 2 11 12 2 6,75

60 703 3 21 20 12 14

60 777 1 29 7 5 10,5

80 466 3 12 4 5 6

80 528 2 27 5 1 8,75

80 720 5 8 16 7 9

CBT Média Mensal 4,42 17,17 7,92 6,33

Aplicado o Teste de Normalidade de ANDERSON-DARLING constatou-se

que a distribuição não era normal, portanto, não paramétrica e não necessitando

assim ser feita a análise de variância. Foi usado então, para uma análise não

paramétrica, o Teste de KRUSKAL-WALLIS, no qual foram comparados as

dosagens do suplemento, os meses do ano e os períodos do experimento com os

resultados da CBT.

Comparada então, a CBT em relação a grupos de dosagem do suplemento e

períodos (pastagem – confinamento) não houve diferença estatística. Contudo,

10

quando se comparou a CBT com os meses testados, ocorreu uma diferença

significativa entre os meses de Dezembro e Janeiro e entre Janeiro e Março.

Apesar da pouca literatura que há sobre a utilização do Lithothamnium

calcareum como agente imunoestimulante, este benefício não foi estatisticamente

notado no experimento, correlacionando, em parte, com o trabalho de Lopes (2012)

que notou que a farinha de algas deprimiu o desempenho de vacas em final de

lactação, diminuindo a produção leiteira, quando associada à dieta.

Vários fatores podem explicar a ineficiência no uso da farinha de algas.

Na amostragem, foi constatado, depois dos primeiros exames laboratoriais,

que alguns animais apresentavam mastite crônica, e nestes casos se fazia

necessário o uso de antibióticos, como única solução.

O estresse do manejo, causado pela separação dos animais do experimento

do restante do rebanho, todos os dias, pelo arraçoamento feito em cocho separado.

Além disto, pela mudança de tratadores – quatro diferentes - (que davam a

alimentação) diariamente pode ter causado a diminuição do efeito imunoestimulante

com a imunossupressão causada pelo stress.

O produto usado poderia não ter as substâncias nas concentrações citadas

(Lithothamnium calcareum e leveduras), uma vez que este produto foi cedido, já

formulado, por um laboratório e pronto para comercialização.

Este suplemento não foi efetivo nos benefícios que eram esperados.

11

4. CONCLUSÃO

O uso de suplementação alimentar com Lithothamnium calcareum, levedura

de cana-de-açúcar (Saccharomyces cerevisiae) e sua parede celular na dosagem de

40 g, 60 g ou 80 g por animal, em vacas leiteiras,não contribuiu com a saúde do

úbere e não teve alteração significativa no número de células somáticas no leite. Os

meses do ano e os períodos de confinamento ou pastagem dos animais também

não influenciaram significativamente na CCS. Com relação à CBT, não houve

diferença significativa entre a dosagem do produto e os períodos de confinamento

ou pastagem. Houve diferença significativa entre os meses de Dezembro e Janeiro e

Janeiro e Março.

12

5. REFERÊNCIAS

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