AULA Microscopia Eletronica
-
Upload
josiane-feliciano -
Category
Documents
-
view
134 -
download
1
Transcript of AULA Microscopia Eletronica
-
14/12/2012
1
UNIVERSIDADE DO ESTADO DO RIO DE JANEIRO
INSTITUTO DE BIOLOGIA ROBERTO ALCNTARA GOMES
DEPARTAMENTO DE HISTOLOGIA E EMBRIOLOGIA
Disciplina Mtodos para o Estudo da Clula
MICROSCOPIA ELETRNICA
Prof Las de Carvalho
MICROSCOPIOS ELETRNICOS
MICROSCOPIO ELETRNICO DE
TRANSMISSO - MET
MICROSCOPIO ELETRNICO DE
VARREDURA - MEV
Microscpio de Luz PROCESSAMENTO para M. OPTICA ou de LUZ:
FIXAO - formol
DESIDRATAO - etanol
INCLUSO - parafina
MICROTOMIA = 5um - 7um
COLORAO = H-E
OBSERVAR ao MO
MEVMO
MET
Hemcias
ou Microscpio de Luz
Tipos de Microscpios
A microscopia eletrnica de transmisso e de varredura se baseia na interao entre eltrons e
componentes dos tecidos.
Microscopia Eletrnica de Transmisso
-
14/12/2012
2
Obteno de amostras biolgicas para microscopia eletrnica de transmisso
Coleta do material
ME TRANSMISSO
FIXAO
GLUTARALDEIDO
(fixa proteinas)
PS-FIXAO
TETRXIDO DE SMIO
(fixa lipdeos)
DESIDRATAO
ETANOL
INCLUSO
EPON
ULTRAMICROTOMIA 50nm -70nmobteno de cortes ultrafinos
CONTRASTAO
OBSERVAR ao M ET
MICROSCOPIO ELETRNICO DE
TRANSMISSO ( MET)
.Fixao do material
Glutaraldeido
Tetrxido de smio
.Incluso
Epon
.Ultramicrotomia
.Contrastao
Uranila
Chumbo
Microscpio Eletrnico de Transmisso ULTRAMICRTOMO
obteno de cortes ultrafinos
TIPOS de FACA para MET :
VIDRO
DIAMANTE
Facas de VIDROFacas de DIAMANTE
cortes semifinos
PIRAMITOME
Preparao de cortes semifinos para
localizar a regio de interesse para
depois fazer cortes ultrafinos.
Aparelho para aparar os blocos
de MET.
rea para obter cortes ultrafinos
-
14/12/2012
3
ME TRANSMISSO
FIXAO
GLUTARALDEIDO - (fixa proteinas)
PS-FIXAO
TETRXIDO DE SMIO - (fixa lipdeos)
DESIDRATAO
INCLUSO = EPON
ULTRAMICROTOMIA 50nm -70nm
CONTRASTAO
OBSERVAR ao M ET
M OPTICA ou de LUZ
FIXAO
FORMOL
-----------------
DESIDRATAO
INCLUSO = PARAFINA
MICROTOMIA = 5um - 7um
COLORAO = H-E
OBSERVAR ao MO
COMPARAO entre os PROCESSAMENTOS para MO e MET:
Microscpio de varredura de vcuo varivel, LEO 1450VP - UERJ
Microscpio Eletrnico de Varredura
Microscopia Eletrnica de Varredura Microscopia Eletrnica de Varredura
ME TRANSMISSO
FIXAO
Glutaraldeido
PS-FIXAO
Tetrxido de smio
DESIDRATAO
INCLUSO - epon
ULTRAMICROTOMIA50nm -70nm
CONTRASTAO
OBSERVAR ao M ET
M OPTICA ou de LUZ
FIXAO
FORMOL
-----------------
DESIDRATAO
INCLUSO = PARAFINA
MICROTOMIA =
5um - 7um
COLORAO = H-E
OBSERVAR ao MO
COMPARAO entre os PROCESSAMENTOS para MO, MET e MEV:
ME VARREDURA
FIXAO
Glutaraldeido
PS-FIXAO
Tetrxido de smio
DESIDRATAO
PONTO CRITICO
METALIZAO
OBSERVAR ao M EV
MET
MEV
Clulas do
EPITLIO RESPIRATRIO
MO