Apesentação (Cronobacter sakazakii)

Cronobacter spp. (anteriormente Enterobacter sakazakii)

Áfia Suely Santos da Silva de Almeida

UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEARÁCENTRO DE CIÊNCIAS AGRÁRIASDEPARTAMENTO DE TECNOLOGIA DE ALIMENTOSPÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIA E TECNOLOGIA DE ALIMENTOSDISCIPLINA: MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOSPROFESSORA: EVÂNIA ALTINA T. DE FIGUEIREDO

Fortaleza2013

São patógenos emergentes associados a surtos de meningite, enterocolite necrosante e septicemia em neonatais em diversos países.

A taxa de mortalidade relatada varia de 40 a 80% e os sobreviventes apresentam sequelas neurológicas severas.

O desenvolvimento da infecção está associado ao consumo de fórmulas infantis desidratadas.

IntroduçãoIntrodução

Até 1980, Cronobacter spp. (literatura - Enterobacter cloaceae)

Em 1980, Farmer et al. definiram uma nova espécie, Enterobacter sakazakii, com base em experimentos de hibridização de DNA, produção de pigmento, reações bioquímicas e suscetibilidade aos antimicrobianos.

Em 2007, Iversen et al. publicaram um extenso estudo utilizando cepas padrão de E. sakazakii isolados de diferentes origens e representantes de espécies relacionadas. WARNKEN, 2010

Mudança de NomenclaturaMudança de Nomenclatura

As cepas de E. sakazakii foram separadas em grupos a partir de perfis obtidos por amplificação de fragmentos polimórficos fluorescentes de DNA (f-AFLP), ribotipos e análise de seqüências gênicas completas de 16S rRNA.

WARNKEN, 2010

PCR em tempo real - consiste em amplificar cópias de DNA “in vitro”, usando os elementos básicos do processo de replicação natural do DNA.

É o método para rápida amplificação de sequências específicas de DNA.

PCR em tempo real - consiste em amplificar cópias de DNA “in vitro”, usando os elementos básicos do processo de replicação natural do DNA.

É o método para rápida amplificação de sequências específicas de DNA.


A hibridização DNA-DNA revelou cinco genomoespécies cujos perfis fenotípicos foram determinados.

A partir dos resultados obtidos, os autores propuseram a reclassificação de E. sakazakii como um novo gênero, Cronobacter, dentro da família Enterobacteriaceae.

Atualmente o gênero Cronobacter pertence à família Enterobacteriaceae e é composto por cinco espécies e três subespécies:

C. sakazakii, C. turicensis, C. malonaticus, C. muytjensii, C. genomospecies I, C. dublinensis subsp. dublinensis, C. dublinensis subsp. lausannensis e C. dublinensis subsp. lactardi.

WARNKEN, 2010


Bactéria gram-negativa;

Móveis, com flagelos peritríquios;

Forma: bastonete;

CHEN, 2013

1. Organismo1. Organismo

Patogênica, não formadores de esporos;

Anaeróbios facultativos;

Doenças Transmitidas por Alimentos (crianças e adultos imunocomprometidos);

Sobrevive em condições de pouca umidade em alimentos por longos períodos (fórmulas infantis em pó)

CHEN, 2013


São capazes de se multiplicar na faixa de temperatura de 45-47°C.

A termotolerância parece variar de acordo com a cepa – 12 cepas de Cronobacter spp. sobreviveram em fórmulas infantis reidratadas, mantidas a 58°C e encontraram dois fenótipos de resistência.

Capazes de se multiplicar em fórmulas infantis durante estocagem sob refrigeração e de aderir aos equipamentos usados para preparo de alimentação infantil, possibilitando que esses se tornem reservatórios dos patógenos.

Breeuwer et al. (2003)


O gênero Cronobacter parece ter natureza ubíqua e seu reservatório primário ainda não foi determinado.

Iversen e Forsythe (2004) sugerem que esses microorganismos não façam parte da microbiota normal dos humanos ou dos animais e apontam a água, o solo e os vegetais como as principais fontes ambientais.


MortalidadeMortalidade

10% a 80% / 40 a 80 % 10% a 80% / 40 a 80 %

Risco: recém-nascidos (casos fatais são frequentemente associados com bebês prematuros ou de baixo peso ao nascer.

Risco: recém-nascidos (casos fatais são frequentemente associados com bebês prematuros ou de baixo peso ao nascer.

Nos últimos anos, a mortalidade mais elevada tem sido em bebês nascidos a termo saudáveis que desenvolveram septicemia.

Nos últimos anos, a mortalidade mais elevada tem sido em bebês nascidos a termo saudáveis que desenvolveram septicemia.

CHEN, FDA, 2013

2. Doença2. Doença

Dose infecciosaDose infecciosa

Não determinada, mas os cientistas têm especulado uma estimativa razoável, semelhante ao da Escherichia coli O157: H7 (isto é, baixo; por exemplo, 10 a 100 organismos).

Há pouca informação sobre o número de organismos em pacientes doentes, não sendo possível, desenvolver uma curva de dose-resposta para estabelecer a "dose infecciosa".

Contudo , é possível que um pequeno número de células presentes na fórmula para lactentes pode causar a doença..

( MARLER, 2011)

Início dos SintomasInício dos Sintomas

Bebês: dentro de poucos dias.

Adultos: raros, assim como as fontes de alimentos geralmente não foram determinados.

CHEN, FDA, 2013

Complicações da DoençaComplicações da Doença

Complicações Neurológicas Sistema Nervoso Central

Meningite

Infecções Generalizadas Corrente Sanguínea

Septicemia

Enterocolite necrosante (NEC): é caracterizada por necrose e pneumatose intestinal em que partes dos tecidos do intestino morrem, principalmente em bebês prematuros.

* O organismo tem sido associada a essas doenças, embora não tenha sido firmemente estabelecido como um agente causador.

CHEN, FDA, 2013

São muitas vezes graves e pode incluir:

Icterícia (Refere-se à cor amarela da pele e do branco dos olhos que é causada pelo excesso de bilirrubina no sangue. A bilirrubina é um pigmento normal, amarelo, gerado pelo metabolismo das células vermelhas do sangue.

Grunhindo enquanto respira;Instabilidade da temperatura do corpo;Convulsões;Abscesso cerebral;Hidrocefalia;Retardo do desenvolvimento e Irritabilidade.

SintomasSintomas

CHEN, 2013

A maioria das infecções são causadas por via oral, embora raros casos de infecção de ferida também têm sido relatados.

Duração dos sintomasDuração dos sintomas

Entre os sobreviventes, a colonização varia de 2 a 8 semanas.

Entre mortes, a morte pode ocorrer dentro de algumas horas a vários dias após os primeiros sinais de sepse aparecer.

Via de EntradaVia de Entrada

CHEN, FDA, 2013

- A patogênese da Cronobacter induzida por meningite neonatal e enterocolite não é totalmente compreendido.

- O organismo adere a superfícies celulares e se hospedam instantaneamente para reproduzir uma concentração ótima.

- A adesão de células epiteliais por Cronobacter é essencialmente não-fímbrias e outros fatores de virulência não identificadas também podem contribuir para a ligação.

PatogênesePatogênese

CHEN, FDA, 2013

- Poucos casos de infecção foram documentados, e o organismo raramente tem sido isolado de alimentos e amostras clínicas.

- Desde 1958, houve 120 casos de infecção em crianças, com uma média de 5 casos relatados/ano, em todo o mundo.

- Estudos epidemiológicos sugerem uma taxa de infecção por Cronobacter de menos de 1% entre os pacientes com sintomas suspeitos.

- Os dados não leva em conta a identificações de falso-negativos.

CHEN, FDA, 2013

3. Frequência3. Frequência

Infecções em Recém-nascidosInfecções em Recém-nascidos

Fórmulas infantis em pó contaminadas – aw -0.2

Fórmulas infantis em pó reidratadas - não estéreis

Utensílios usados para o preparo

Sobrevivência do Cronobacter em fórmula infantil em pó por até 2 anos tem sido relatada.

Sobrevivência do Cronobacter em fórmula infantil em pó por até 2 anos tem sido relatada.

CHEN, FDA, 2013

4. Fontes4. Fontes

• A formação de cápsulas de Cronobacter podem contribuir para a sua resistência à dessecação forte. Porque Cronobacter não sobrevive a pasteurização utilizado na produção de leite em pó;

• Tem sido sugerido que a contaminação ocorre principalmente devido a um ambiente contaminado pós-secagem ou adição de ingredientes que são sensíveis ao calor, mas são adicionados após o tratamento de pasteurização.

• A contaminação pode ser mais provável quando a fórmula reconstituída é mantida a temperaturas impróprias antes da utilização ou para uma longa duração do que o sugerido pelo fabricante.

• O organismo tem sido encontrada em outros alimentos, mas apenas fórmulas infantis em pó tem sido associada a surtos de doenças.

CHEN, FDA, 2013

4. Fontes4. Fontes

Alguns estudos relataram uma taxa de contaminação de 10% a 15% dos produtos de fórmulas infantis por Cronobacter , com menos de 1 UFC / 25 g em todas as amostras.

Estudos recentes isolou o organismo a partir de fórmulas infantis, alimentos infantis em pó, leite em pó, produtos de queijo, e outros alimentos secos.

Associação a outros alimentos (rara) IsoladoAssociação a outros alimentos (rara) Isolado

CEREAISPÃO

ARROZFRUTASLEGUMES

PRODUTOS DE LEGUMINOSAS

LEGUMESQUEIJO

ESPECIARIASERVAS

LEITECARNEPEIXE

Ambiente onde são processado estes alimentos.

Ambiente onde são processado estes alimentos.

Para diagnosticar doenças associadas a Cronobacter é necessária a identificação de cultura, isolados de tecidos, sangue, fluido cerebrospinal, ou aspiradas de urina.

CHEN, FDA, 2013

5. Diagnóstico5. Diagnóstico

Recém-nascidos e lactentes;

Infecções neonatais podem resultar do contato com Cronobacter no canal de parto ou por meio de fontes ambientais pós-nascimento;

Imunossupressão, parto prematuro e baixo peso ao nascer pode aumentar o risco de infecção.

CHEN, FDA, 2013

6. Público-Alvo6. Público-Alvo

Aproximadamente 50% das crianças infectadas com Cronobacter tem menos de 1 semana de idade, e 75% das crianças infectadas têm menos de 1 mês de idade.

Adultos são consideradas um grupo de baixo risco, no entanto, alguns casos de infecções em adultos imunocomprometidos e idosos também têm sido relatados.

Além da doença aguda, estudos indicam que o paciente pode se tornar um portador entérico de Cronobacter spp., por um período de até 18 semanas.

CHEN, FDA, 2013

6. Público-Alvo6. Público-Alvo

Em 2002, a FDA desenvolveu um método para a detecção de Cronobacter em fórmula infantil em pó, que envolve o caldo de enriquecimento, e plaqueamento em agar glicose bile violeta vermelho e Agar de Soja Trypticase.

Método é demorado e evidenciou fraca seletividade para o Cronobacter na presença da flora fundo concorrentes.

A FDA validou novo método para a detecção de Cronobacter que utiliza tecnologia PCR em tempo real, melhorando significativamente o desempenho da detecção.

CHEN, FDA, 2013

7. Análise de Alimentos7. Análise de Alimentos

8. Surtos8. Surtos

Dados Epidemiológicos – DTAPeríodo de 2000 a 2011

Ministério da SaúdeSecretaria de Vigilância em Saúde

Fonte: BRASIL, 2011

Ainda são poucos os relatos de infecção por Cronobacter spp.

1999 - O primeiro está relacionado a um surto ocorrido na Unidade de Neonatologia e no Centro de Terapia Intensiva no Hospital das Clínicas da UFMG;

2000 - O segundo, a um surto envolvendo quatro hospitais no Rio de Janeiro;

2003 - O terceiro relato descreve um caso de meningite por Cronobacter spp. em recém-nascido no Hospital Universitário da USP.

BrasilBrasil

2004: A Anvisa proibiu, em todo o território nacional, o ingresso, a comercialização, a distribuição, a exposição ao consumo e o uso da fórmula infantil/produto.

Fabricado na Holanda: “Leite Infantil com Ferro para Lactentes”, em pó das marcas Pregestimil e Enfamil Pregestimil

A decisão, transitória e em caráter de emergência, foi tomada porque o Ministério da Saúde da França investigou a relação do consumo do produto e a ocorrência de infecção causada pela bactéria Enterobacter sakazakii.

WARNKEN, 2010

BrasilBrasil

• Entretanto, os números de casos relatados nos diversos países provavelmente não refletem a realidade.

• Isso porque muitos laboratórios clínicos, independentemente do país, não incluem a pesquisa rotineira de Cronobacter spp. e na maioria dos casos o relato das infecções por esses patógenos não é obrigatório.

• Além disso, muitos países não dispõem de um sistema oficial de informação

A meningite bacteriana em neonatos é uma doença fatal de evolução rápida, e como as defesas imunológicas nos fluidos cerebrais destes indivíduos são limitadas, os antibióticos devem ser rapidamente administrados para a erradicação do agente etiológico.

9. Tratamento9. Tratamento

A antibioticoterapia, é o procedimento adotado no tratamento inicial de suspeita de infecção por Cronobacter spp.

Entretanto, vários autores têm relatado o desenvolvimento de resistência do microorganismo a

essas drogas.

• CHEN, Yi. Cronobacter species. In: FOOD AND DRUG ADMINISTRATION. Bad bug book. Foodborne pathogenic microorganisms and natural toxins. Second Edition. Disponível em: <http://www.fda.gov/Food/FoodborneIllnessContaminants/CausesOfIllnessBadBugBook/default.htm>. Acesso em: 04 abr. 2013.

• MARLER, B. What the Hell is Cronobacter sakazakii, formerly Enterobacter sakazakii? Food Poison Journal. Seattle, on December 24, 2011. Disponível em: < http://www.foodpoisonjournal.com/food-recall/what-the-hell-is-cronobacter-sakazakii-formerly-enterobacter-sakazakii/#.UWVhHDdae1t> Acesso em 05 abr. 2013.

• FOODBORNE ILLNESS Common bacteria and viruses that cause food poisoning. Cronobacter sakazakii. Disponível em: < http://www.foodborneillness.com/enterobacter_sakazakii_food_poisoning/ > Acesso em 05 abr. 2013.

10. Referências10. Referências

• WARNKEN, M. B. Cronobacter spp.: do isolamento à pesquisa de marcadores de virulência , 2010. Tese (Doutorado em Vigilância Sanitária) Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde - Fundação Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, 2010. Disponível em: < teses.icict.fiocruz.br/lildbi/docsonline/get.php?id=310 > Acesso em: 05 abr. 2013.

• BASSO, J. P. et al. Avaliação do método ISO Modificado para detecção de Cronobacter sakazakii em alimentos. Laboratório de Microbiologia, Centro de Ciência e Qualidade de Alimentos, Instituto de Tecnologia de Alimentos. Disponível em: < www.iac.br/areadoinstituto/pibic/anais/2009/.../RE0901008.pdf > Acesso em: 05 abr. 2013.

• BRASIL. Ministério da Saúde. Dados epidemiológicos: (DTA) período de 2000 a 2011. Secretaria de Vigilância em Saúde, 2011. Disponível em: < http://portal.saude.gov.br/portal/arquivos/pdf/dados_dta_periodo_2000_2011_site.pdf > Acesso em: 05 abr. 2013.

10. Referências10. Referências

http://portal.saude.gov.br/portal/arquivos/pdf/dados_dta_periodo_2000_2011_site.pdf

OBRIGADA!

A hibridação de DNA-DNA refere-se a uma técnica da biologia molecular que determina o grau de semelhança genética entre combinações de sequências de DNA

A hibridação de DNA-DNA refere-se a uma técnica da biologia molecular que determina o grau de semelhança genética entre combinações de sequências de DNA

Apesentação (Cronobacter sakazakii)

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