Análise de Aflatoxinas Paula K. 2014
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Análise de aflatoxinas em amendoim por CCD
Profa. Paula da Silva Kujbida
UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO NORTEFaculdade de Farmácia - Centro de Ciências da Saúde
Departamento de Análises Clínicas e Toxicológicas
Disciplina: Toxicologia (ACT 0049)
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Propriedades físico-químicas das Aflatoxinas:Propriedades físico-químicas das Aflatoxinas:
Fluorescência sob luz UV (366 nm) B1 e B2 → azul G1 e G2 → verde
Substâncias apolares
Estáveis a temperaturas acima de 100°C.
Análise de aflatoxinas em amendoim por CCD
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Amostra: Amendoim/paçoca
Quais as etapas desenvolvidas?1ª extração/separação;
Purificação (clean up) para eliminação de interferentes;
2ª Extração (líquido-líquido);
Identificação (CCD).
Análise de aflatoxinas em amendoim por CCD
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Amostra: Amendoim/paçoca
Fundamento do método As aflatoxinas são extraídas da matriz usada para análise com metanol e cloreto de potássio. Posteriormente é realizada a etapa de limpeza, com a precipitação de proteínas com agentes clarificantes (sulfato de cobre e celite). As aflatoxinas são re-extraídas com clorofórmio por extração líquido-líquido e separadas dos componentes do extrato por cromatografia em camada delgada. A detecção e quantificação das aflatoxinas são realizadas por análise visual sob luz ultravioleta (366 nm).
Análise de aflatoxinas em amendoim por CCD
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Cromatografia em Camada Delgada (CCD)
(do grego χρώμα:chroma, corcor e γραφειν:"grafein", grafiagrafia)
Cromatografia em Camada delgada (CCD)
Fase estacionária placa com sílica gel
Fase móvelsolvente (capilaridade)
TÉCNICA DE ADSORÇÃO LÍQUIDO-SÓLIDO
Análise de aflatoxinas em amendoim por CCD
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Cromatografia em Camada Delgada (CCD)Técnica que consiste na separação dos compostos de uma
mistura por migração diferencial sobre uma camada delgada de adsorvente retido sobre uma superfície plana.
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ressuspender com 500 µL de
clorofórmio
IDENTIFICAÇÃO DE AFLATOXINAS POR CCD
2ª aula
Leitura em UV
Corrida cromatográfica: cuba saturada com o
sistema solvente clorofórmio:acetona (9:1)
Solução padrão de AFB1: 1 µg/mL
Análise de aflatoxinas em amendoim por CCD