30a Reunião Anual - SBQ Página 1 de 1

,'.

.:

...... '

; <

.....•.

file:IID:\index.htm 12/7/2007

Sociedade Brasileira de Química ( SBQ)

DIGESTÃO ÁCIDA DE MATERIAIS BIOLÓGICOS ASSISTIDA PORRADIAÇÃO MICROONDAS: EMPREGO DE RMN 1H PARA

INVESTIGAÇÃO DOS PRODUTOS REACIONAISMario H. Gonzalez1,2"(PG), Lucimara Forato3(PQ), Joaquim A. Nobrega4(PQ), Ana R. A. Nogueira 1(pQ)

1. Grupo de Análise Instrumental Aplicada, Embrapa Pecuária Sudeste, São Certos SP anarita@cppse.embrapa.br2. Instituto de Química de São Certos. Universidade de São Paulo, São Certos SP

3. Embrapa Instrumentação Agropecuária, São Certos SP4. Grupo de Análise Instrumental Aplicada, Departamento de Química, UFSGar, São Certos SP

Palavras Chave: preparo de amostras, ácidos diluídos, RMN IH, produtos reacionais, radiação microondas

lntrcduçãco emprego de fornos de radiação microondas para adigestão de amostras por via úmida já é uma técnicaestabelecida e uma alternativa eficiente no tocante àsolubilização de elementos minerais paradeterminação por técnicas espectroscópicas.Apresenta uma série de vantagens, entre as quais aredução do tempo de preparo das amostras, aminimização do uso de reagentes e um maiorcontrole das condições de digestão, facilitando ocontrole de temperatura e a medida da pressãoresultante. Em função das características do fornocom radiação microondas, o emprego de ácidosdiluídos é alternativa bastante efetiva para a digestãode amostras, diminuição da quantidade de resíduosgerados, redução de custos, obtenção de brancosanalíticos e desvios padrão menores 1. Além disso,propicia digeridos mais apropriados para introduçãopor nebulizadores pneumáticos em análisesespectroscópicas. No entanto, a eficiência desseprocedimento depende das características originaisda amostra. Neste trabalho, soluções diluídas deHN03 foram empregadas para a digestão de amostrascom altos teores de proteína e gordura. Foramavaliadas a eficiência de dgestão, a recuperação deminerais e a identificação preliminar dos principaisprodutos de reação por RMN de 1H para posteriorseparação e caracterização por técnicascromatográficas.

Resultados e DiscussãoAmostras de sangue, víscéras e músculo de bovinose amostras de forraqéira e soja em grãos foramsubmetidas à digestão assistida por radiaçãomicroondas, empregando-se 2,0 mL de HN03 14,7 e2 moi [1 + 1,0 mL de fi02 30% v/v. Os digeridosforam analisados por lep OES para caracterizaçãomultielementar e determinação do carbono residual.Para a separação dos compostos residuais foramrealizadas extrações líquido-líquido com o empregode clorofórmio e éter etílico. Os extratos foramrotaevaporados e reconstituídos em solventesdeuterados para análise por RMN de lH. Osespectros foram obtidos em 256 transientes, com

30" Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Química

pulso rú2 de 10 J..lS, tempo de repetição de 2 s etempo de aquisição de 1 s. Na Tabela 1 estãorepresentados os deslocamentos químicos e a regiãotípica de alguns compostos encontrados para asdiferentes amostras estudadas 1.

Tabela 1. Deslocamento Químico e Regiões TípicasPrincipais Produtos Reacionais em Amostras Biológicas 1.

dos

Deslocamento Químico Região Típica(ppm)

80,5-3,084,0-4,787,0-10,5

alifáticoshidrogênios carbinólicos

aromáticos enitrocompostos

Em concentrações de HN03 14 e 7 moi L-1 osespectros mostraram-se mais complexos, ou seja,com maior número de compostos formados após adigestão, sendo que soluções HN03 2 moi L-1

resultaram en redução na quantidade de sinais nosespectros de RMN de lH. Por outro lado, soluçãoHN03 7 moi L-1 propiciou a obtenção de menoresdesvios padrão e melhor recuperação de analitosquando comparado com HN03 14 moi L-1.

ConclusõesSoluções mais concentradas geram uma maiorvariedade de compostos orgânicos, tais comonitrocompostos, compostos alifáticos e aromáticosquando comparadas às soluções menosconcentradas, tendo como possível explicação o altopoder oxidante dessas misturas sob altas pressão etemperatura, gerando dessa forma uma quantidademaior de resíduos orgânicos. A eficiência da digestãoem meio de ácido nítrico diluído provavelmente estárelacionada com a oxidação do NO gerado a N02,reabsorção desse óxido em solução seguida dereação de desproporcionamento que regeneraria oácido nítrico. Tal ciclo ocorreria enquanto houvesseoxigênio gasoso na atmosfera do frasco reacional.

AgradecimentosÀ FAPESP pela bolsa concedida

Sociedade Brasileira de Química ( SBQ)

'Araújo, G.C.L., Gonzalez, M.H., Ferreira, A.G., Nogueira, A.R.A.,Nóbrega, l.A., Spect. Acta B, 57(2002)2121-2132.

25" Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Química - SBQ 2